HIF-1α和SIRT6在甲狀腺癌組織中的表達及其與腫瘤血管生成的關系

曾 勇，鄭克思，陳 聰，吳元肇，陳 碧

(溫州市人民醫院，浙江 溫州 325000)

甲狀腺癌是內分泌系統常見腫瘤之一，該病起病較為隱匿，生物學特征多變，就現有影像學和病理診斷對良惡性腫瘤鑒別診斷均存在一定誤差，故研究甲狀腺癌組織形成和表達的分子機制，從微觀角度尋找輔助鑒別甲狀腺癌的分子診斷標志物，用以指導臨床選擇更為合理的治療方案具有重要意義[1]。HIF-1α在多種實體腫瘤中均檢測到高表達狀態，是一種重要轉錄調節因子，可能參與了腫瘤浸潤和轉移過程，對患者預后有重要影響。SIRT6與多種腫瘤的進展有關，包括結直腸癌，小細胞肺癌，乳腺癌等，SIRT6可以通過調節多種通路來調節腫瘤的發生發展[2]。本研究探討HIF-1α和SIRT6在甲狀腺癌組織中的表達及其與腫瘤血管生成的關系，現報道如下。

一、對象與方法

1.研究對象。選取2017年9月-2019年3月我院收治的甲狀腺癌患者89例，其中男51例，女48例，年齡22-73歲，平均(39.67±4.82)歲。其中乳頭狀癌60例，濾泡狀癌16例，髓樣癌11例，未分化癌2例。所有患者術前均未行新輔助放療、化療、內分泌治療及靶向治療，術前病理診斷明確，所有癌組織和癌旁組織均按常規標準制作石蠟對切片進行包埋。

2.研究方法。應用免疫組織化學Envision法檢測患者甲狀腺癌組織和癌旁組織中HIF-1α和SIRT6的表達，研究使用的是Envision染色超敏試劑盒和DAB顯色試劑盒，兔抗人SIRT6多克隆抗體和鼠抗人HIF-1α單克隆抗體。操作程序嚴格按照說明書進行。檢測結束后對甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達陽性率進行比較，并分析甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達相關性。

3.評價標準。在高倍鏡下對癌細胞數量進行觀察，高倍顯微鏡為某公司提供的SZ61型光學顯微鏡。HIF-1α和SIRT6均以細胞膜和細胞質染色。評價標準如下：-：幾乎不染色；+：淺黃，弱陽性；++：棕黃色，陽性；+++：深棕色，強陽性。

4.統計學方法。使用SPSS 21.0進行統計分析。本研究HIF-1α、SIRT6表達陽性率為計數資料，采用χ2檢驗，以率/百分比表示。HIF-1α、SIRT6表達相關性采用Pearson相關性分析，以r表示，以P<0.05表示兩組之間差異有統計學意義。

二、結 果

1.甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達陽性率比較。89例甲狀腺癌患者中，HIF-1α、SIRT6在癌組織和癌旁組織均有表達，HIF-1α在癌組織中表達陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05)；SIRT6在癌組織中表達陽性率明顯高于癌旁組織(P<0.05)(見附表)。

附表 甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6 表達陽性率比較(n)

2.甲狀腺癌組織和癌旁組織HIF-1α、SIRT6表達相關性分析。兩者均在癌組織中呈現高表達，且在癌旁組織中呈現低表達，HIF-1α、SIRT6表達呈顯著正相關(r=0.867)，差異有統計學意義(P<0.05)。

三、討 論

甲狀腺腫瘤病灶發展較為緩慢，但癌瘤細胞早期容易發生頸部淋巴結遠處轉移，患者預后不理想且病死率高，但目前其對早期診斷準確率偏低，在甲狀腺癌中缺氧發揮著重要作用[3]。

HIF-1α基因定位于人的14號染色體，是HIF-1的活性亞基，也是調控細胞代謝途徑轉換過程的重要因子。HIF-1α可誘導血管內皮生長因子表達，促進血管生成，在腫瘤細胞產生、浸潤和轉移過程中起到重要作用。

SIRT6是Sirtuin蛋白重要成員，是酵母細胞中沉默信息調節因子2同源物，主要定位于細胞核，具有ADP-核糖基轉移酶催化活性作用，與癌癥反映和多種代謝相關疾病存在相關，可與抑癌因子泛素特異性蛋白酶10發揮協同作用。SIRT6在癌癥發生中的作用最為復雜，可通過調節癌細胞中有氧糖酵解發揮腫瘤促進和腫瘤抑制因子的雙重作用，且轉化的SIRT6缺陷細胞顯示出糖酵解增加和腫瘤生長促進，甲狀腺癌細胞組織SIRT6蛋白表達水平明顯低于癌旁正常組織，說明SIRT6在基因轉錄階段就已經出現表達缺失的情況。

本次研究結果顯示，HIF-1α和SIRT6在癌組織中表達陽性率均明顯高于癌旁組織，表明HIF-1α和SIRT6可能與甲狀腺癌侵襲轉移有相關性，過表達的HIF-1α和SIRT6可能對甲狀腺癌的進展過程起到一定作用，可能是甲狀腺癌患者預后不良的標志。HIF-1α、SIRT6在癌組織和癌旁組織中表達呈顯著正相關，提示兩者在甲狀腺癌發生發展過程中可能起到協同作用。