西南地區(qū)974 例皮膚科門(mén)診患者HPV 檢測(cè)結(jié)果分析

張 靜 徐 艷 鐘白玉 宋志強(qiáng) 翟志芳

陸軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科（重慶 400038）

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A 屬， 是球形DNA 病毒，能引起人體皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖。HPV病毒目前發(fā)現(xiàn)的有100 多種， 與人類(lèi)生殖道疾病相關(guān)的有40 多種。 世界各地與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)的HPV 感染亞型存在差異， 其感染的相關(guān)因素也報(bào)道不一[1]。尖銳濕疣(condyloma acuminatum，CA)是由人乳頭瘤病毒感染引起的一種常見(jiàn)的性傳播疾病， 近年來(lái)隨著CA 的發(fā)病率急速上升和宮頸癌、 肛門(mén)癌等的增多，HPV 感染越來(lái)越引起人們的關(guān)注。為了解HPV 不同性別的感染狀況，本研究是對(duì)2012 年10 月～2016 年5月來(lái)自重慶四川云南貴州等西南地區(qū)就診于我科門(mén)診的974 例患者HPV 檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果總結(jié)如下。

資料及方法

一、標(biāo)本來(lái)源及標(biāo)本采集

標(biāo)本來(lái)源于2012 年10 月～2016 年5月期間在西南醫(yī)院皮膚科門(mén)診就診的974 例擬診為CA 的患者、性伴侶檢出HPV 感染的患者、3 個(gè)月內(nèi)有高危性行為者以及患有其他性病者。 年齡8 個(gè)月～83 歲， 平均年齡32.0 歲；其中男性患者519 例，女性患者455 例。

男性患者用棉拭子擦拭冠狀溝、尿道口周?chē)⒏刂芑蝠囿w表面。 女性患者利用采集器采集宮頸口脫落細(xì)胞樣本，也可直接切除疣體組織置于標(biāo)本管中4℃保存24h 內(nèi)檢測(cè)。

二、檢測(cè)方法

按照HPV 基因分型檢測(cè)試劑盒（亞能生物技術(shù)有限公司）操作說(shuō)明進(jìn)行DNA 提取,13000×g離心15min,去上清加50μL 裂解液，100℃加熱10min，13 000×g離心15min 保留DNA 溶液。 使用BIOERPCR 擴(kuò)增儀進(jìn)行 擴(kuò) 增，50℃15min，95℃10min 然 后94℃30s 解 鏈，42℃90s 退 火，72℃30s 延, 重 復(fù)40 個(gè) 循 環(huán)； 韓國(guó)FINEPCR 雜交儀進(jìn)行反向雜交， 條件為51℃1.5h，然后洗膜，孵育，顯色判讀。

三、統(tǒng)計(jì)與分析

應(yīng)用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件， 組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以α=0.05 為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

結(jié) 果

一、HPV 感染的基本情況結(jié)果顯示

在974 例患者中，652 例HPV 檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，陽(yáng)性率66.94%。 其中，男性366 例，陽(yáng)性率70.52%；女性286 例，陽(yáng)性率62.86%，男性感染率高于女性，兩者感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

二、HPV 感染與年齡的相關(guān)性

將974 例病人分成6 個(gè)年齡組，分別為15 歲以下陽(yáng) 性 率47.06%（8/17 例）；16～25 歲72.41%（189/261例）；26～35 歲64.81%（256/395 例）；36～45 歲64.92%（124/191 例）；46～55 歲65.15%（43/66 例）；55 歲 以 上72.3%（32/44 例）。 對(duì)各年齡組間HPV 感染率進(jìn)行比較，經(jīng)卡方檢驗(yàn)（P＞0.05），各組間HPV 感染無(wú)顯著性差異（圖1）。

圖1 各年齡組人數(shù)及陽(yáng)性人數(shù)（率）分布圖

三、HPV 亞型分布

結(jié)果顯示HPV 感染率較高的前7 位依次是6 型49.7%， 11 型34.5%，16 型15.5%，58 型11.0%， 52 型10.0%，43 型9.4%，81 型9.0%。 但男性感染率較高的7 種HPV 亞型依次為：6、11、16、43、58、52、81 型； 女性感染率較高的7 種HPV 亞型為：6、11、16、58、52、81 和18 型。 經(jīng)檢驗(yàn)，低危型HPV 感染，男感染率高于女性，男女性間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；女性高危型HPV感染率高于男性（P＜0.05）， 兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，表1）。

表1 652 例HPV 陽(yáng)性患者高低危型HPV 感染狀況分析

討 論

人類(lèi)是HPV 的唯一宿主，因此具有高度的宿主特異親和力。 HPV 與多種疾病密切相關(guān)， 是迄今已被肯定的DNA 腫瘤病毒之一，HPV 主要感染人的皮膚和黏膜上皮細(xì)胞引發(fā)感染部位的良、惡性病變。 目前已知HPV6、11、16、18 等低危亞型感染一般不引發(fā)癌變，高危型HPV（包括HPV16、18、31、33、52.58 等）感染則與宮頸瘤變和宮頸癌密切關(guān)聯(lián)[2]。 目前對(duì)女性HPV 感染的研究比較深入，而男性HPV 感染的相關(guān)報(bào)道相對(duì)較少。 近年來(lái)報(bào)道顯示男性感染HPV 會(huì)影響精子質(zhì)量，降低男性生育能力，甚至不育[3]，因此，男性感染HPV的危害同樣不可忽視。 臨床上傳統(tǒng)HPV 檢測(cè)方法逐漸被基因芯片、反向斑點(diǎn)雜交等先進(jìn)的技術(shù)方法所取代，與傳統(tǒng)HPV 檢測(cè)方法相比， 基因芯片具有敏感性高、特異性好的特點(diǎn)， 能快速有效的診斷不同HPV 亞型，是臨床HPV 感染分型檢測(cè)有效方法[3]。

本研究采用PCR- 反向斑點(diǎn)雜交技術(shù)對(duì)西南醫(yī)院皮膚科門(mén)診974 例(其中男性519 例，女性455 例)尖銳濕疣患者或高危人群進(jìn)行23 種HPV 亞型檢測(cè)， 結(jié)果顯示男性較女性HPV 感染率更高。 從感染人群分布上看20～40 歲人群是個(gè)峰值，由于該年齡段是生育期，性生活比較活躍。 從感染HPV 的類(lèi)型來(lái)看，女性高危型感染率相對(duì)更高，這與近年來(lái)國(guó)內(nèi)外報(bào)道一致[4-5]。 因此，做好性病宣教工作，對(duì)女性開(kāi)展大面積HPV 初篩，及早發(fā)現(xiàn)可疑宮頸病變對(duì)預(yù)防宮頸癌變十分必要；同時(shí)，應(yīng)注重男性HPV 感染常規(guī)檢測(cè)及干預(yù)，對(duì)HPV 感染防治和提高計(jì)劃生育質(zhì)量有著重要意義。 我們的研究結(jié)果表明，盡管HPV 感染在男性高于女性，但各年齡組間感染率并無(wú)顯著差異， 因此， 注重并加強(qiáng)HPV感染的宣教及檢測(cè)， 盡早接種HPV 疫苗， 對(duì)于抵御HPV 感染，提高生育質(zhì)量，預(yù)防生殖系統(tǒng)癌變具有重要意義。

綜上所述，HPV 感染型別與性別、 人群差異有關(guān)，掌握尖銳濕疣的HPV 感染情況和基因型分布不僅是流行病學(xué)調(diào)查的需要，而且對(duì)于指導(dǎo)醫(yī)生對(duì)高危型和多重感染患者的監(jiān)測(cè)、 降低HPV 相關(guān)腫瘤的發(fā)生和特異性疫苗的研制，以及提高生育質(zhì)量具有重要的意義[5-6]。