張 會,趙 輝,董丹丹,劉真真,賈 楠,朱元祺,*
(1.青島大學醫學院,山東 青島 266071;2.青島大學附屬醫院 檢驗科,山東 青島 266555)
自2001年Yigit等[1]第一個報道產肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)臨床分離株以來,攜帶blaKPC-2基因腸桿菌在世界各地傳播開來。2007年國內Wei等首次報道產KPC-2酶的肺炎克雷伯菌浙江分離株。此后,全國各地陸續有檢出KPC-2陽性菌株報道[2]。我們收集2017年4月某兒童醫院分離的碳青霉烯類耐藥肺炎克雷伯菌株,對其耐藥表型、耐藥基因以及同源性進行研究,以便為采取醫院感染控制措施提供依據,現報道如下。
1.1菌株和病人資料9株肺炎克雷伯菌來源于2017年4月分離自某兒童醫院心血管外科(5株)、心血管科(2株)和新生兒科(2株)住院患兒。對病人的病例資料進行回顧性分析,按照2010年1月21日衛生部頒布的《醫院感染診斷標準(試行)》,根據病例資料判定這9例患兒的感染都屬于醫院感染。
菌株鑒定和藥敏試驗采用Vitek-2 Compact系統。藥敏結果判定依據美國臨床實驗室標準化委員會制定CLSI-M100(2017)標準。儀器質控菌株為ATCC25922、ATCC35218、ATCC700603和ATCC27853。
1.2主要儀器和試劑MyCycle型PCR擴增儀和CHEF MAPPER XA型脈沖場凝膠電泳儀為美國Bio-RAD公司; HP3400型全自動凝膠成像系統為美國Alpha Innotech公司。基因組提取試劑盒、瓊脂糖、PCR試劑和核酸分子量標準為大連寶生生物。
1.3耐藥基因的檢測分別檢測碳青霉烯類耐藥基因(blaKPC、blaNDM、blaBIC、blaOXA-48、blaIMP、blaSPM、blaVIM、blaAIM、blaGIM、blaDIM和blaSIM)和超廣譜β-內酰胺酶耐藥基因(blaCTX-M、blaSHV、blaTEM和blaOXA-1)。耐藥基因的PCR擴增引物序列和方法參照文獻[3]。引物合成和產物測序由生工(上海)生物技術有限公司完成。
1.4多位點序列分……