二代測序技術在白化病家系檢測中的應用及突變分析

曾玉坤 劉玲 余麗華 丁紅珂 張彥

(廣東省婦幼保健院 醫學遺傳中心，廣東 廣州 511442)

白化病是由于酪氨酸酶缺乏或功能減退引起的一種皮膚及附屬器官黑色素缺乏或合成障礙所導致的一種常染色體隱性遺傳病。主要由于黑色素生物合成或轉運相關基因突變所引起，有較強的異質性，國外相關報道發病率為 1/20 000～1/10 000[1-3]。目前相關研究明確的人類白化病亞型包括非綜合征型的眼皮膚白化病(oculocutaneous albinism，OCA)1～7型、眼白化病(ocular albinism，OA)型以及綜合征型的Hermansky-Pudlak綜合征(Hermansky-Pudlak syndrome，HPS)1～9型、Chediak-Higashi綜合征等[4]。由于白化病患者部分亞型臨床表型往往存在較多的交叉，因而白化病僅通過臨床癥狀很難明確其亞型，基因檢測成為明確家系白化病分型的唯一可靠方法。本研究擬通過二代測序技術方法對一白化病家系進行分子遺傳學研究，查明可能的致病原因，為該家庭盡可能預防二胎白化病再發風險提供科學的優生遺傳咨詢指導。

1 對象與方法

1.1 研究對象 先證者出生時臨床表現為頭發根部發白，發梢淡黃；3個月時整根頭發白中帶淡黃色，眉毛白色，睫毛白色，眼球水平震顫。父母否認雙方家族存在其他患者，父母本人表型均正常，非近親婚配，否認孕期存在用藥史或不良環境接觸史。本研究經廣東省婦幼保健院醫學倫理委員會批準，所有基因診斷工作均取得患者家屬的同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本收集和DNA提取 抽取先證者外周血及父母外周靜脈血各2ml，以乙二胺四乙酸二鉀抗凝。采用血液基因組DNA提取試劑盒(廈門致善生物科技股份有限公司)提取外周血標本基因組DNA，-20 ℃保存備用。……