上皮性卵巢癌患者血漿中化療耐藥相關蛋白標志物的臨床表達意義

張惠淵

卵巢惡性腫瘤發病率僅次于子宮頸癌和子宮體癌，列居第3位，其中以上皮性卵巢癌最常見，占卵巢腫瘤的50%～70%。目前治療上皮性卵巢癌的主要方法是早期進行全面手術，術后進行化療。但是惡性腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥常常最終導致化療失敗，進而影響患者恢復[1]。在治療卵巢癌的過程中，使用生物標志物，預測卵巢癌的化療耐藥，對于治療此種惡性腫瘤具有重要意義。本次研究通過對比分析化療敏感和化療耐藥2組上皮性卵巢癌患者的血漿蛋白質，發現差異蛋白質表達點，預測與上皮性卵巢癌化療耐藥相關的蛋白標志物，進而指導化療用藥，為卵巢癌患者探索新的治療方法。

1 材料與方法

1.1 一般資料

本次研究選取2014年12月至2016年12在本院接受治療的上皮性卵巢癌患者169例，均采用手術與化療聯合治療，化療4～6個療程。本研究經本院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。采集患者術后化療的血漿標本，根據NCCN卵巢癌診療指南[2]，將患者標本分為2組。對照組85例，F/M為47/38例(化療敏感：初期予以基礎化療，病情緩解，停止化療半年后復發)，年齡45～55歲28例，年齡55～65歲33例，年齡65～75歲24例。試驗組84例(化療耐藥：初期予以基礎化療，病情緩解，停止化療半年內復發)，年齡45～55歲29例，年齡55～65歲37例，年齡65～75歲18例。2組患者年齡基本資料對比，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 患者納入排除標準

納入標準：①均為上皮性卵巢癌患者；②其他器官無惡性腫瘤且無相關惡性腫瘤疾病的病史；③均采用手術與化療的聯合治療方法，化療4～6療程；④根據卵巢惡性腫瘤手術病理分期(FIGO)[3]分為Ⅰ～Ⅳ期。排除標準：①其他病理類型的卵巢癌患者；②未進行手術與化療的聯合治療；③患有其他部位惡性腫瘤或有過相關疾病病史；④不符合FIGO病理分期。

1.3 上皮性卵巢癌復發標準

①腫瘤標志物水平升高；②影像學檢查提供依據；③其他檢查出現異常；④腹脹、腹痛、排便異常等消化道癥狀，部分患者陰道出血[4]。出現以上任一情況，可根據臨床表現、癥狀及以上檢查予以診斷復發。

1.4 檢測方法

采集患者血漿標本，分為2組即對照組(化療敏感)和試驗組(化療耐藥)，運用雙向凝膠電泳的技術，篩選2組患者的差異蛋白質表達點，并對其進行圖像掃描分析并鑒定[5]。

1.5 統計學意義

2 結果

2.1 上皮性卵巢癌患者化療耐藥與手術病理分期的關系

本次研究中，對照組(化療敏感)患者病例85例，其中Ⅰ期42例，Ⅱ期34例，Ⅲ期8例，Ⅳ期1例；試驗組(化療耐藥)患者病例84例，其中Ⅰ期20例，Ⅱ期 31例，Ⅲ期 28例，Ⅳ期5例。2組對比，差異具有統計學意義(C=0.67，P=0.04)，說明化療耐藥與手術病理分期存在一定的相關性。

2.2 2組患者血漿2-DE結果比較及蛋白質鑒定

將2組血漿標本分為上皮性卵巢癌對照組(化療敏感)和試驗組(化療耐藥)，使用2-DE技術篩選出差異蛋白點并進行鑒定，蛋白質表達用灰度值表示，灰度值均值相除得到差異倍數，蛋白質表達上調或下調>200%，發現其中明顯上調的有：凝集素、碳酸酐酶、補體 C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 鏈；明顯下調的有：補體 C3、觸珠蛋白、載脂蛋白 E、β-2-糖蛋白、甲狀腺素運載蛋白、補體因子I輕鏈、Igγ-2 鏈C區、Igγ-1鏈C區、Igκ鏈C區，見表1。

表1 2組患者結果對比及蛋白質鑒定

3 討論

卵巢癌是僅次于子宮頸癌和子宮體癌的女性生殖器官三大惡性腫瘤之一，早期難以發現，致死率位居婦科惡性腫瘤首位。上皮性卵巢癌更是其中的典型，對婦女患者身體健康造成嚴重威脅[6]。目前治療上皮性卵巢癌的大多數方法是手術基礎上輔助化療，聯合治療。化療是目前治療惡性腫瘤重要的手段之一，但是惡性腫瘤細胞對化療藥物的耐藥常常最終導致化療失敗，進而影響患者恢復，這也是卵巢癌患者的致死率居高不下的原因[7-10]。對于婦科腫瘤臨床而言，及早發現并診斷化療耐藥有利于進一步改善上皮性卵巢癌的預后。生物標志物是指可以標記系統、器官、組織、細胞及亞細胞結構或功能的改變或可能發生的改變的生化指標，應用廣泛，目前多用于疾病診斷、判斷疾病分期或新療法在目標人群中的安全性及有效性[11-12]。本次研究通過篩選差異蛋白表達點，探討蛋白質標志物對于治療卵巢癌是否具有重要的臨床應用意義。

本次研究中，運用雙向凝膠電泳技術，分析對比上皮性卵巢癌患者的血漿，篩選出對照組(化療敏感)與試驗組(化療耐藥)不同患者的血漿中存在差異蛋白質表達點32個，其中試驗組較對照組上調的蛋白質表達點共有20個，其中表現明顯的有：凝集素、碳酸酐酶、補體C4A、α1-抗胰蛋白酶、免疫球蛋白J 鏈；試驗組較對照組下調的蛋白質表達點共有12個，其中表現明顯的有：補體C3、觸珠蛋白、載脂蛋白E、β-2-糖蛋白、甲狀腺素運載蛋白、補體因子I輕鏈、Igγ-2鏈C區、Igγ-1鏈C區、Igκ鏈C區。這些差異蛋白質的下調或上調，可以反映患者的機體情況或者某些病情的改變，有利于在婦科腫瘤臨床中篩選化療耐藥的生物標志物，對于卵巢癌的預測、預后及診斷復發有重要意義。

綜上所述，上皮性卵巢癌患者中，化療耐藥與化療敏感不同患者的血漿中存在差異蛋白表達點，其中表達明顯的α1-抗胰蛋白酶、β-2-糖蛋白、觸珠蛋白、甲狀腺素運載蛋白等可能通過不同的機制影響了上皮性卵巢癌的化療耐藥，研究中標記出來的差異蛋白表達點有可能成為上皮性卵巢癌化療耐藥相關的蛋白質標志物，在臨床應用中具有重要研究價值。