劉雪梅 駱 雯 劉 黎

遂寧市中心醫院腫瘤科 (四川 遂寧， 629000)

肝細胞癌(HCC)是世界范圍內最常見的惡性腫瘤之一，其預后較差，并且是中國東南沿海地區腫瘤相關死亡的首要原因[1，2]。HCC的發病率和死亡率有逐年升高的趨勢，手術切除或肝移植仍然是唯一可能達到根治性治療的措施[3]。惡性腫瘤切除術的根治程度與殘留腫瘤的分級相關，其中R0切除是肝細胞癌治療的最主要手段，但即使是根治性切除的患者仍有較高的術后復發率(5年復發率高達 70%)，嚴重影響患者的長期生存[4]。基質金屬蛋白酶是細胞外基質降解與重構的關鍵酶，與多種惡性腫瘤的轉移、惡化和增殖過程密切相關[5，6]。本研究對肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清中細胞外基質重構酶和縫隙連接蛋白(Connexins)水平相關性進行研究，為臨床診斷和治療提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2006年1月至2016年12月我院接受肝細胞瘤R0切除的120例患者的臨床資料，其中男68例，女52例，年齡60～72歲，平均(66.6±7.9)歲。所有患者均實施肝部分切除術，且每位患者臨床病理資料完整。患者納入標準：①初發的原發性肝細胞癌，術前未做過任何治療，且不同時伴發其他器官腫瘤；②術中檢查無淋巴結及遠處轉移；③術前肝功能Child-Pugh分級A級或部分肝功能較好的 B 級患者；④均為限期手術且術中不聯合其他器官切除術(除膽囊外)。所有病例均由術后病理切片證實為原發性肝細胞癌。

1.2 手術治療方法 依據患者腫瘤的發生位置、肝臟的儲備功能和患者經切除術后肝臟剩余容量決定采取的肝切除術。手術原則上采用解剖性肝臟切除，但對肝臟儲備功能較差的患者和肝臟切除術后剩余肝容量不足的患者采用部分肝臟切除術。對有血管侵犯的患者，在術后30d內實施經皮肝動脈栓塞化療術(順鉑40mg、吡柔比星40mg、碘化油5ml)。

1.3 分析指標 分析患者預后與血清基質金屬蛋白酶MMP2、MMP9和基質金屬蛋白酶抑制劑TIMP1、TIMP2及Connexin40、Connexin43蛋白、淋巴細胞計數、AFP和CEA水平的相關性。

1.4 隨訪 患者術后3個月內每月復查1次，此后每2個月復查1次，未能按時復查患者進行電話回訪。隨訪日期截至2016年12月或患者死亡時。懷疑患者發生肝內復發或肝外轉移時，采取上腹部CT、肺部CT及MR檢查進行確診。

1.5 統計學方法 統計學軟件采用SPSS 18.0進行，計量資料數據以均值±標準差表示；計數資料數據用計數和百分比表示。分類變量采用χ2檢驗或Fisher確切概率法分析，Kaplan-Meier法計算患者術后生存率，并繪制總體生存曲線。生存曲線間的比較采用Log-Rank檢驗。

2 結果

2.1 120例患者預后與血清MMPs水平的相關性 患者預后與血清MMP2、MMP9水平密切相關，患者生存率隨著MMP2和MMP9蛋白表達的增強，逐漸下降，見圖1、2。

圖1 120例患者預后與血清MMP2水平的相關性圖

圖2 120例患者預后與血清MMP9水平的相關性圖

2.2 肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清TIMPs水平的相關性 患者預后與TIMP1和TIMP2水平密切相關，隨著血清TIMP1和TIMP2蛋白表達的增強，患者的生存率下降，見圖3、4。

圖3 120例患者預后與血清TIMP1水平的相關性圖

圖4 120例患者預后與血清TIMP2水平的相關性圖

2.3 肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清縫隙連接蛋白水平的相關性 患者預后與血清Connexin40和血清Connexin43水平密切相關，隨著血清Connexin40和Connexin43蛋白表達的降低，患者的生存率下降，見圖5、6。

圖5 120例患者預后與血清Connexin40水平的相關性圖

圖6 120例患者預后與血清Connexin43水平的相關性圖

2.4 120例患者預后與血常規指標的相關性 患者預后與淋巴細胞計數密切相關，隨著淋巴細胞計數的降低，患者的生存率下降，見圖7。

圖7 120例患者預后與淋巴細胞計數的相關性圖

2.5 肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清AFP和CEA水平的相關性 患者預后與AFP和CEA表達水平密切相關，隨著血清AFP和CEA水平的升高，患者的生存率下降，見圖8、9。

圖8 120例患者預后與血清AFP水平的相關性圖

圖9 120例患者預后與血清CEA水平的相關性圖

3 討論

肝癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，也是引起死亡的最主要的惡性腫瘤。隨著現代診療技術的進步，肝癌患者的生存率有所提高，但患者術后高復發率仍是影響手術效果和患者預后的關鍵因素。本研究在對肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清中細胞外基質重構酶和Connexins蛋白水平相關性進行研究時發現肝細胞癌R0切除術后患者預后與血清MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2、Connexin40、Connexin43水平、淋巴細胞計數、血清AFP和CEA水平密切相關，且隨著MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2、AFP和CEA蛋白表達的增強及Connexin40、Connexin43、淋巴細胞計數的降低，患者的預后變差。結果表明，肝細胞癌R0切除術后患者預后與基質金屬蛋白酶及其抑制劑表達呈負相關，而與Connexins水平呈正相關。

縫隙連接蛋白是腫瘤細胞物質、能量和信息交換的主要通道，也是腫瘤細胞增殖、轉移和凋亡過程的關鍵調控蛋白[7，8]。在分析BRMS1和Connexin43蛋白異常表達與甲狀腺癌發生發展關系的研究中發現縫隙連接蛋白表達異常與甲狀腺癌的發病及患者的預后過程密切相關[9]，且Connexin43基因修飾對人膽囊癌GBC-SD細胞增殖和遷移能力產生明顯的影響[10]。以往的研究發現牽牛子酒提取物對Lewis肺癌的抗腫瘤和抗轉移作用與其調控腫瘤細胞縫隙連接蛋白的表達有關[11]，而蛋白酶活化受體1活化或抑制對鼻咽癌細胞遷移侵襲的影響也與其調控縫隙連接蛋白43的表達有關[12]。汪靈芝等[13]也發現依托咪酯對神經膠質瘤細胞縫隙連接通訊的影響主要是通過調節縫隙連接蛋白表達實現。本研究也發現肝細胞癌R0切除術后患者預后隨著Connexin 40和Connexin 43蛋白表達的降低而變差。

基質金屬蛋白酶及其抑制劑的表達是腫瘤細胞增殖和轉移過程的主要調控蛋白，也與患者的臨床分期和預后密切相關[14，15]。以往的研究發現垂體腫瘤轉化基因1、MMP2及MMP9與胃癌患者的臨床分期及預后密切相關[16]，且脂聯素與MMP9在非小細胞肺癌組織中的表達與腫瘤血管生成過程緊密聯系[17]。同時，MMP2、MMP9及其抑制劑MMI-166參與了惡性腫瘤的發生和發展過程[18]，且MMP9的表達水平與兒童及成人中耳膽脂瘤的病變過程有關[19]。本研究也發現肝細胞癌R0切除術后患者預后隨著MMP2、MMP9、TIMP1和TIMP2蛋白表達的增強而變差。

因此，肝細胞癌R0切除術后患者預后與基質金屬蛋白酶及其抑制劑表達呈負相關，而與Connexins水平呈正相關。