跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)TgAPP/PS1小鼠海馬Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)清除的影響

何標(biāo) 梁艷 徐波 黃柔 閆清偉 李百俠 梁菲 于海珍 毛倩 趙慧 張憲亮

摘 要：探討12周中等強(qiáng)度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)AD小鼠海馬內(nèi)Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)清除的影響。選3月齡雄性Tg APP/PS1小鼠，隨機(jī)分為轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組（TE，n=12只）和轉(zhuǎn)基因安靜組（TC，n=12只）；選同窩野生型小鼠作為正常對(duì)照組（C，n=12只）和運(yùn)動(dòng)對(duì)照組（E，n=12只）。E組和TE組小鼠給予12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，C組和TC組安靜飼養(yǎng)。選用蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)小鼠海馬LRP-1和RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平；選用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定小鼠海馬Aβ40、Aβ42，血液Aβ40、Aβ42、sLRP-1和sRAGE的質(zhì)量濃度。結(jié)果：1）TE組小鼠海馬Aβ40（P<0.05）和Aβ42質(zhì)量濃度（P<0.05）較TC組顯著下降，TE組小鼠血液Aβ40（P<0.01）和Aβ42質(zhì)量濃度（P<0.01）較TC組顯著下降。2）TE組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平（P<0.01）和血液sLRP-1質(zhì)量濃度（P<0.05）較TC組顯著升高。3）TE組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平（P<0.01）和血液sRAGE質(zhì)量濃度（P<0.01）較TC組顯著下降。結(jié)果說明，12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)通過上調(diào)海馬LRP-1的蛋白相對(duì)表達(dá)水平，提高血液sLRP-1的質(zhì)量濃度，下調(diào)海馬RAGE的蛋白相對(duì)表達(dá)水平，降低血液sRAGE的質(zhì)量濃度，提高Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ40和Aβ42的轉(zhuǎn)運(yùn)清除速率。

關(guān) 鍵 詞：運(yùn)動(dòng)生物化學(xué)；跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)；海馬Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)；阿爾茨海默病；β淀粉樣蛋白；小鼠

中圖分類號(hào)：G804.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-7116（2018）04-0134-06

Abstract： In order to probe into the effects of a 12-week medium intensity treadmill exercise on Aβ transfer and removal in AD mouse hippocampus， the authors selected 3 months old male Tg APP/PS1 mice， randomly divided them into a transgenic exercise group （TE， n=12） and a transgenic calm group （TC， n=12）， selected littermate wild mice as a normal control group （C， n=12） and an exercise control group （E， n=12）， let the mice in groups E and TE do a 12-week medium intensity treadmill exercise， bred the mice in groups C and TC in a calm condition， tested the protein relative expression levels of mouse hippocampus LRP-1 and RAGE by means of western blotting， measured the mass concentrations of mouse hippocampus Aβ40 and Aβ42， blood Aβ40， blood Aβ42， blood sLRP-1 and blood sRAGE by means of ELISA， and revealed the following findings： the mass concentrations of hippocampus Aβ40 （P<0.05） and Aβ42 （P<0.05） of the mice in group TE decreased significantly as compared with those of the mice in group TC； the mass concentrations of blood Aβ40 （P<0.01） and Aβ42 （P<0.01） of the mice in group TE decreased significantly as compared with those of the mice in group TC； 2） the protein relative expression level of hippocampus LRP-1 （P<0.01） and the mass concentration of blood sLRP-1 （P<0.05） of the mice in group TE increased significantly as compared with those of the mice in group TC； 3） the protein relative expression level of hippocampus RAGE （P<0.01） and the mass concentration blood sRAGE （P<0.01） of the mice in group TE decreased significantly as compared with those of the mice in group TC. The said findings indicated the followings： By increasing the protein relative expression level of hippocampus LRP-1， the 12-week medium intensity treadmill exercise increased the mass concentration of blood sLPR-1， decreased the protein relative expression level of hippocampus RAGE， decreased the mass concentration of blood sRAGE， and increased the hippocampus Aβ40 and Aβ42 transfer and removal rate of Tg APP/PS1 mice.

Key words： sports biochemistry；treadmill exercise；hippocampus Aβ transfer and removal；Alzheimer disease；Aβ；mouse

阿爾茨海默病（Alzheimers disease，AD）是一種與年齡相關(guān)的進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病，以漸進(jìn)的記憶丟失和認(rèn)知功能障礙為主要臨床特征，以海馬神經(jīng)元丟失、神經(jīng)纖維纏結(jié)和細(xì)胞外老年斑為主要病理特征[1]。“Aβ學(xué)說”認(rèn)為腦內(nèi)Aβ的生成和清除失衡引起Aβ聚集加速，導(dǎo)致AD的發(fā)生[2]。家族型AD（familial Alzheimers disease，fAD）（僅占總發(fā)病的5%）因過表達(dá)AD致病基因，導(dǎo)致Aβ生成增多；而散發(fā)性AD（sporadic Alzheimers disease，sAD）（占總發(fā)病的95%）主要是由腦內(nèi)Aβ清除功能障礙引起的[3]。腦內(nèi)Aβ的清除對(duì)延緩Aβ異常聚集具有重要作用[4]。機(jī)體清除Aβ的主要途徑是通過轉(zhuǎn)運(yùn)功能將腦內(nèi)的Aβ轉(zhuǎn)出腦組織并進(jìn)入外周血液[5]。該途徑主要是在低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1（low density lipoprotein receptor-related protein-1，LRP-1）和晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（receptor for advanced glycation end products，RAGE）作用下完成的，腦內(nèi)Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)到外周是一個(gè)雙向的過程，LRP-1是Aβ由腦內(nèi)運(yùn)至外周組織的主要載體，RAGE則是Aβ從外周運(yùn)至腦內(nèi)的主要載體，LRP-1功能異常或表達(dá)減少降低了腦內(nèi)Aβ的轉(zhuǎn)運(yùn)速率，增加腦內(nèi)可溶性Aβ的濃度，最終導(dǎo)致腦內(nèi)老年斑積聚速度加快[6]。與正常大腦相比，AD患者腦內(nèi)Aβ的清除能力降低了約30%左右[7]。

研究表明：長(zhǎng)期中等強(qiáng)度的有氧運(yùn)動(dòng)可以延緩AD的病理進(jìn)程[8]。運(yùn)動(dòng)通過抑制Aβ生成降低腦內(nèi)Aβ的含量已經(jīng)得到證實(shí)[9]。運(yùn)動(dòng)通過提高Aβ降解酶活性和激活小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬功能加速Aβ的清除也得以證實(shí)[10]。目前，鮮有運(yùn)動(dòng)對(duì)Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)清除方面的研究，鑒于上述研究現(xiàn)狀，本實(shí)驗(yàn)就運(yùn)動(dòng)對(duì)TgAPP/PS1小鼠海馬內(nèi)Aβ的轉(zhuǎn)運(yùn)清除進(jìn)行研究，為闡述運(yùn)動(dòng)預(yù)防和緩解AD的發(fā)生提供理論和實(shí)踐依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料及方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

選3月齡雄性Tg APP/PS1小鼠，隨機(jī)分為轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組（TE，n=12只）和轉(zhuǎn)基因安靜組（TC，n=12只），選同窩野生型小鼠作為正常對(duì)照組（C，n=12只）和運(yùn)動(dòng)對(duì)照組（E，n=12只）。T組和TE組小鼠給予12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，C組和TC組安靜飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物房，常規(guī)分籠飼養(yǎng)，自由飲食進(jìn)水，自然光照。（鑒于該種系小鼠死亡率高，為防止實(shí)驗(yàn)過程中小鼠意外死亡，實(shí)際實(shí)驗(yàn)小鼠多于48只）。

1.2 運(yùn)動(dòng)方案

把實(shí)驗(yàn)小鼠置于標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物房適應(yīng)性喂養(yǎng)2周，然后進(jìn)行1周的適應(yīng)性跑臺(tái)訓(xùn)練：先將E組和TE組小鼠置于靜止的跑臺(tái)上適應(yīng)2 d，每天30 min，第3天開始進(jìn)行15 min的跑臺(tái)訓(xùn)練，第4天進(jìn)行30 min的跑臺(tái)訓(xùn)練，第5天進(jìn)行45 min的跑臺(tái)訓(xùn)練，第6天和第7天休息。隨后，E組和TE組小鼠進(jìn)行為期12周的跑臺(tái)訓(xùn)練，每周5次，每次訓(xùn)練持續(xù)45 min，速度為9 m/min，每天下午16：00進(jìn)行跑臺(tái)訓(xùn)練，訓(xùn)練強(qiáng)度參照文獻(xiàn)[11]進(jìn)行，運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度為小鼠最大攝氧量的45%～55%。

1.3 取材

小鼠末次運(yùn)動(dòng)后，禁食12 h，摘除眼球取血；脫頸處死，取左右側(cè)海馬置-80 ℃冰箱，待測(cè)。所有操作均在冰上進(jìn)行。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定海馬內(nèi)Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度

取10～20 mg海馬，按1∶10（質(zhì)量比）加入PBS溶液，重復(fù)均漿2～3次，12 000 g/min低溫離心20 min，取上清檢測(cè)海馬Aβ40和Aβ42質(zhì)量濃度，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值D（λ），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度。

1.5 酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定血液Aβ40、Aβ42、sLRP-1和sRAGE的質(zhì)量濃度

小鼠末次運(yùn)動(dòng)后，禁食12 h摘眼球取血，置于離心管內(nèi)，4 ℃靜置過夜，4 000 r/min離心20 min，取上清置離心管內(nèi)，檢測(cè)血液Aβ40、Aβ42、sLRP-1和sRAGE的質(zhì)量濃度，操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行：每孔先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測(cè)樣品10 μL（最終稀釋樣品濃度5倍），用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定光密度值D（λ），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中所含Aβ40、Aβ42、sLRP-1和sRAGE的質(zhì)量濃度。

1.6 蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)海馬LRP-1和RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平

取20～30 mg海馬組織，按1∶7（質(zhì)量比）加入混有PMSF的裂解液，重復(fù)均漿3～4次，12 000 g/min低溫離心5 min，取上清，用BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度。用SDS-PAGE進(jìn)行凝膠電泳，進(jìn)行PVDF轉(zhuǎn)膜，用5%脫脂牛奶封閉2 h，加一抗稀釋液（LRP-1，ab92544，1∶1 000；RAGE，ab172473，1∶1 000），4 ℃搖床過夜，次日加二抗，孵育2 h，TBST搖床洗3次，暗室ECL顯影，用AIpha成像系統(tǒng)曝光，ImageJ1.46進(jìn)行灰密度值分析，將目的蛋白與內(nèi)參平均密度的比值作為目的蛋白相對(duì)表達(dá)水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

用SPSS18.0軟件對(duì)所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s）表示，組間比較采用雙因素方差分析（Two-way ANOVY），事后比較采用LSD法，P<0.05表示差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01表示差異有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果及分析

2.1 運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠海馬Aβ40和Aβ42的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與C組比較，TC組小鼠海馬Aβ40的質(zhì)量濃度升高，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與TC組比較，TE組小鼠海馬Aβ40的質(zhì)量濃度下降，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與C組比較，TC組小鼠海馬Aβ42的質(zhì)量濃度升高，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與TC組比較，TE組小鼠海馬Aβ42的質(zhì)量濃度下降，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（見表1）。

2.2 運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠血液Aβ40和Aβ42的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與C組比較，E組小鼠血液Aβ40的質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與C組比較，TC組小鼠血液Aβ40的質(zhì)量濃度上升，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠血液Aβ40的質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與C組比較，E組小鼠血液Aβ42的質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與C組比較，TC組小鼠血液Aβ42的質(zhì)量濃度上升，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠血液Aβ42的質(zhì)量濃度降低，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（見表2）。

2.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠海馬LRP-1和RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平的影響

蛋白實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與C組比較，E組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平提高，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與C組比較，TC組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平降低，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平提高，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。蛋白實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與C組比較，E組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平下降，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與C組比較，TC組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平升高，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平降低，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（見表3）。

2.4 運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠血液sLRP-1和sRAGE的影響

與C組比較，E組小鼠血液sLRP-1質(zhì)量濃度升高，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與C組比較，TC組小鼠血液sLRP-1質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠血液sLRP-1質(zhì)量濃度升高，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與C組比較，E組小鼠血液sRAGE質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與C組比較，TC組小鼠血液sRAGE質(zhì)量濃度上升，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；與TC組比較，TE組小鼠血液sRAGE質(zhì)量濃度下降，差異具有非常顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）（見表4）。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度均顯著高于野生型小鼠，說明本實(shí)驗(yàn)選用的Tg APP/PS1小鼠能夠成功模擬AD病理特征，即腦內(nèi)含有較高質(zhì)量濃度的Aβ。通過比較兩組轉(zhuǎn)基因小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度顯著下降，說明本實(shí)驗(yàn)選用的運(yùn)動(dòng)方案能夠有效降低Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度，進(jìn)而達(dá)到延緩AD病理進(jìn)程的目的。對(duì)兩個(gè)野生型小鼠的比較發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度較對(duì)照組低，但差異均不具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明野生型小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度處于較低水平，可經(jīng)過正常的機(jī)體代謝使其維持在合理的范圍內(nèi)，而轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度顯著下降，可能是運(yùn)動(dòng)對(duì)較高質(zhì)量濃度的Aβ40和Aβ42產(chǎn)生更好的調(diào)節(jié)效果。已有研究證實(shí)，對(duì)Tg APP/PS1小鼠進(jìn)行6周無刺激的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)（10 m/min，每周5次）發(fā)現(xiàn)，與安靜組比較，運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬Aβ40和Aβ42質(zhì)量濃度顯著降低[12]。近期的研究證實(shí)，對(duì)Tg NSE/APP小鼠進(jìn)行7周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)后發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)組小鼠皮層Aβ40和

Aβ42的質(zhì)量濃度較安靜組顯著降低[13]。

Aβ是一類由39～42個(gè)氨基酸組成的小分子疏水肽，以Aβ40和Aβ42最為人們所熟知，也是老年斑的主要成分，其中以對(duì)神經(jīng)細(xì)胞毒性較大的Aβ42為主要成分，Aβ42的積聚速率大于清除速率，就會(huì)導(dǎo)致Aβ42細(xì)胞外異常沉積，進(jìn)而導(dǎo)致AD的發(fā)生[14]。因此，提高Aβ的清除速率對(duì)延緩AD的病理進(jìn)程至關(guān)重要[15]。促進(jìn)Aβ從腦內(nèi)向血液流出，抑制血液中的Aβ流向腦內(nèi)是降低腦內(nèi)Aβ的重要手段[16]。LRP-1是Aβ轉(zhuǎn)運(yùn)至外周的主要載體，本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ外轉(zhuǎn)蛋白LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平顯著降低，Aβ內(nèi)轉(zhuǎn)蛋白R(shí)AGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平顯著提高，血液sLRP-1質(zhì)量濃度顯著降低，血液sRAGE質(zhì)量濃度顯著提高，說明該小鼠海馬內(nèi)Aβ外轉(zhuǎn)速率下降，外周血液Aβ內(nèi)轉(zhuǎn)速率提高，導(dǎo)致海馬內(nèi)Aβ質(zhì)量濃度增加。經(jīng)過12周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)，轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sLRP-1質(zhì)量濃度較轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M顯著增加，而轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sRAGE質(zhì)量濃度較轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M顯著降低。因此，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可能通過上調(diào)海馬Aβ外轉(zhuǎn)蛋白LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sLRP-1的質(zhì)量濃度，下調(diào)了內(nèi)轉(zhuǎn)蛋白R(shí)AGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sRAGE質(zhì)量濃度，進(jìn)而降低了Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度。研究證實(shí)，對(duì)6月齡Tg2576小鼠進(jìn)行3個(gè)月的跑臺(tái)訓(xùn)練后發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平較對(duì)照組顯著提高，且效果高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)優(yōu)于低強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)[17]。

RAGE能夠與配體結(jié)合引起機(jī)體的炎癥反應(yīng)，被視為炎癥受體因子。此外，RAGE與Aβ在血腦屏障的管腔膜處結(jié)合，調(diào)節(jié)Aβ通過血腦屏障進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)的速率[18]。與其他小分子肽相比，RAGE介導(dǎo)Aβ的內(nèi)流速度是其他分子的2～3倍。本研究發(fā)現(xiàn)，TgAPP/PS1小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平顯著高于野生型小鼠，而轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)組小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平較轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M低，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)能夠降低TgAPP/PS1小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平，降低外周血液Aβ入腦的速率。但有研究發(fā)現(xiàn)，與安靜對(duì)照組比較，12 d的自主跑輪運(yùn)動(dòng)顯著降低側(cè)腦室注射Aβ25-35導(dǎo)致AD小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平[19]。還有研究證實(shí)，與安靜對(duì)照組比較，10周的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)4月齡TgAPP/PS1小鼠海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平?jīng)]有產(chǎn)生顯著影響[20]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果不一致，其可能的原因是由選用實(shí)驗(yàn)小鼠的月齡不一致導(dǎo)致的。

血液中的Aβ主要來源于腦內(nèi)，血液中Aβ僅占腦脊液Aβ 1%左右，但血液中Aβ質(zhì)量濃度的變化是早期檢測(cè)AD的重要指標(biāo)，Mehta等[21]檢測(cè)了78例AD患者血液Aβ40的質(zhì)量濃度后發(fā)現(xiàn)：AD患者外周血液Aβ40質(zhì)量濃度顯著高于正常人群。本研究進(jìn)一步驗(yàn)證了12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)Tg APP/PS1小鼠外周血液Aβ40和Aβ42質(zhì)量濃度的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與野生型小鼠比較，轉(zhuǎn)基因安靜組小鼠血液Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度均顯著升高，與各自安靜組比較，正常運(yùn)動(dòng)組和轉(zhuǎn)基因運(yùn)動(dòng)小鼠外周血液Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度顯著降低。腦內(nèi)Aβ進(jìn)入外周血液后以可溶性的形式存在，血液中可溶性Aβ可以與多種分子顆粒結(jié)合形成復(fù)合物，LRP-1在外周血液以可溶性的LRP-1（sLRP-1）存在，sLRP-1是外周組織與Aβ結(jié)合的主要蛋白，能夠結(jié)合約90%的Aβ，Aβ與sLRP-1結(jié)合所形成的復(fù)合物能夠被肝臟和腎臟清除。AD病人血液中sLRP-1的質(zhì)量濃度顯著低于正常人群，導(dǎo)致外周清除Aβ的能力下降[22]。本研究進(jìn)一步檢測(cè)了12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)TgAPP/PS1小鼠血液sLRP-1和sRAGE質(zhì)量濃度的影響，研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因安靜組小鼠血液sLRP-1的質(zhì)量濃度顯著低于正常對(duì)照組小鼠，與各自安靜組比較，運(yùn)動(dòng)對(duì)照組和轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M小鼠血液sLRP-1質(zhì)量濃度顯著升高。與安靜對(duì)照組比較，轉(zhuǎn)基因安靜組小鼠血液sRAGE的質(zhì)量濃度顯著高于正常對(duì)照組小鼠，與各自安靜組比較，運(yùn)動(dòng)對(duì)照組和轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M小鼠血液sRAGE質(zhì)量濃度顯著下降，提示12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)通過提高血液sLRP-1的質(zhì)量濃度，降低血液sRAGE的質(zhì)量濃度，從而降低了血液Aβ入腦的速率，加速外周Aβ的清除。

Tg APP/PS1小鼠海馬及外周血液Aβ40和Aβ42的質(zhì)量濃度較同窩野生型小鼠均顯著升高，其海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sLRP-1質(zhì)量濃度均顯著降低，海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sRAGE質(zhì)量濃度顯著升高。12周中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)能夠降低TgAPP/PS1小鼠海馬和血液Aβ40和Aβ42質(zhì)量濃度，推測(cè)中等強(qiáng)度的跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可能通過提高海馬LRP-1蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sLRP-1質(zhì)量濃度，降低海馬RAGE蛋白相對(duì)表達(dá)水平和血液sRAGE質(zhì)量濃度，進(jìn)而提高了Tg APP/PS1小鼠海馬Aβ向轉(zhuǎn)運(yùn)速率和外周清除速率，降低Tg APP/PS1小鼠海馬和血液Aβ40和Aβ42質(zhì)量濃度。

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