絨山羊羔羊和成年羊前體脂肪細胞的 原代培養及傳代方法

張清月 王 雪 劉樹林 于 洋 郭曉宇 閆素梅

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

脂肪細胞內的脂肪酸代謝與羊肉風味密切相關。脂肪細胞是由前體脂肪細胞分化而來的，且該過程涉及一系列決定脂肪細胞形成的轉錄因子，所以前體脂肪細胞是研究動物脂肪代謝機理的理想模型。體外培養前體脂肪細胞，可重現脂肪細胞的發生、增殖和分化的全過程，也便于觀察各種因素對細胞的影響，可用于探討脂肪形成機理，研究對脂肪形成有效調控的方法。目前，國內利用膠原酶法已建立起牛[1]、綿羊[2]、豬[3]和絨山羊[4]等多種動物的前體脂肪細胞培養模型，但普遍來源于幼齡動物。脂肪細胞的數量在生命早期就已基本確定[5]，隨著動物年齡的增長，前體脂肪細胞逐漸分化為脂肪細胞，所以利用膠原酶消化直接得到動物前體脂肪細胞只適用于胚胎和幼齡動物，這使得利用前體脂肪細胞模型進行脂肪代謝的機理研究受到了動物年齡的限制，因此，研究成年動物前體脂肪細胞的分離與培養方法是非常必要的。目前，成年動物的前體脂肪細胞主要是利用“天花板”法培養成熟脂肪細胞后再去分化獲得。成熟脂肪細胞的去分化是一個以脂解為主并伴有一定水平成脂的脂質代謝過程[6]。在成熟脂肪細胞積聚的過程中，其脂肪酸代謝和脂滴代謝受基因調控最終致使脂滴消失[7]，并通過自分泌和旁分泌途徑刺激脂肪細胞分解，尤其是降低脂蛋白酯酶的生成及活性，阻止前體脂肪細胞分化，誘導成熟脂肪細胞逆分化，以促成脂肪細胞的去分化[8]。……