改進代茶飲保健作用實驗研究

王昕 陳星宇 劉繼平

【摘要】目的：對改進代茶飲的保健作用進行評價。方法：觀察改進代茶飲對小鼠耐缺氧、抗疲勞、睡眠時間的影響，以及對小鼠記憶功能、免疫、抗氧化等方面的改善作用。結果：耐缺氧、抗疲勞及睡眠試驗研究結果表明，改進代茶飲組與對照組相比存活時間延長（P<0.05），游泳時間明顯提高（P<0.01），睡眠時間無較大差異；改進代茶飲能明顯降低小鼠體重（P<0.01），升高小鼠脾臟臟器指數(shù)（P<0.05），而對胸腺臟器指數(shù)無顯著影響；改進代茶飲能升高小鼠血清SOD及GSH-βx活性（P<0.05），提高MDA的水平（P<0.01）；跳臺試驗學習和記憶測試中，改進代茶飲的反應時間顯著較長（P<0.01）；錯誤次數(shù)明顯較少（P<0.05）；水迷宮實驗訓練中，改進代茶飲可明顯縮短小鼠尋找平臺的潛伏期和游泳距離（P<0.05）；水迷宮試驗測試中，改進代茶飲可明顯延長小鼠設定目標象限的游泳距離（P<0.01），穿越平臺次數(shù)增多。結論：改進代茶飲有一定保健作用。

【關鍵詞】改進代茶飲；保健作用；實驗研究

亞健康通俗來說就是似病非病，它給人們帶來種種不適，但卻沒有顯著的病理指標改變。可能表現(xiàn)為失眠，有氣無力，精神差等等狀態(tài)低下的癥狀。當今社會，絕大多數(shù)人從小就背負了巨大的學習壓力，成年后復雜多變的人際交往，工作中面臨各方壓力都是可能導致亞健康的。亞健康的人需要及時的治療，因其身體機能已經(jīng)有所下降，所以不盡早干預治療，則有很大可能將亞健康的狀態(tài)轉變?yōu)榛疾〉臓顟B(tài)，畢竟亞健康的病人其免疫力已經(jīng)顯著降低。如此說來，用傳統(tǒng)醫(yī)學來解決亞健康的問題，是具有開創(chuàng)性和現(xiàn)實意義的。針對保健市場魚龍混雜的局面，根據(jù)我們傳統(tǒng)醫(yī)學“治未病”的思想和“藥食同源”的理念，結合現(xiàn)代科學技術來開發(fā)中藥代茶飲，可為亞健康狀態(tài)人群的保健提供新的科學方法。

1 材料

1.1 實驗動物

雄性SD小鼠80只，SPF級，體重20～22g，空軍軍醫(yī)大學實驗動物中心供應，許可證號：SCXK（軍）2012-0007。

1.2 試劑

改進代茶飲水提液，制備：取干燥改進代茶飲，加蒸餾水，煮沸2次；每次50min，合并濾液，置冰箱中備用。用時采用蒸餾水溶解配置成濃度1g/mL的液體。超氧化物歧化酶（SOD）測試盒（A001-3）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測試盒（A005）、丙二醛（MDA）測試盒（A003-1），以上試劑來源均為南京建成生物工程有限公司。

1.3 主要儀器

低速離心機（江蘇省金壇市正基儀器有限公司，型號KA-1000）。酶標儀（美國BioTek公司，型號ELX8080IU）。跳臺（山東省醫(yī)學科學院設備站，型號YLS-3T）。Morris水迷宮（上海吉量）。電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司，型號BSA-224S）。

2 方法

2.1 耐缺氧實驗

2.1.1 實驗

取雄性小鼠，體重20±2g，自由攝食攝水，動物室內(nèi)只在白天光照12小時，動物室溫度維持在22-25℃。把15g消除二氧化碳和水的鈉石灰放到250毫升的廣口瓶中。再取20只測量過體重的小鼠隨機均分為兩組。一組給予改進代茶飲適量灌胃（根據(jù)人日用量計算小鼠等效量），另一組給予等量生理鹽水。給茶30min時，把2組小鼠一并放置于密封廣口瓶內(nèi)。隨即開始計時，留心小鼠的狀態(tài)，于小鼠死亡時，得出實驗中小鼠所存活的時間。綜合實驗結果，求得改進代茶飲組小鼠平均存活時間，并與對照組相比，求得存活時間延長的百分率。

2.1.2 計算方法

存活時間延長百分率=（受試茶組平均存活時間-對照組平均存活時間）/對照組平均存活時間×100%。

2.2 抗疲勞實驗

取20只測量過體重的小鼠隨機均分成兩組。一組給予改進代茶飲適量灌胃（根據(jù)人日用量計算小鼠等效量），另一組給予等量生理鹽水。給茶后30分鐘把小鼠（每次1只）投入玻璃缸進行游泳試驗，水深25cm，水溫設置為300C，用秒表記錄小鼠鼻孔沉下水面所用時間，統(tǒng)計比較。

2.3 改進代茶飲對小鼠睡眠時間的影響

取20只測量過體重的小鼠隨機均分成兩組。一組給予改進代茶飲適量灌胃（根據(jù)人日用量計算小鼠等效量），另一組給予等量生理鹽水。給茶30分鐘后，小鼠腹腔注射0.15%戊巴比妥鈉，觀察記錄睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時間，統(tǒng)計比較。

2.4 改進代茶飲對小鼠記憶功能、免疫、杭氧化作用的研究

2.4.1 實驗動物分組與給藥

取20只測量過體重的小鼠隨機均分成兩組。一組給予改進代茶飲適量灌胃（根據(jù)人日用量計算小鼠等效量），另一組給予等量生理鹽水。連續(xù)給茶15d。

2.4.2 指標測定

2.4.2.1 行為學

（1）跳臺實驗。每組小鼠喂對應茶液15d時，把小鼠放到跳臺儀中，3min后。再將最底層銅柵通上36V交流電，記錄小鼠受到電擊后跳上跳臺的反應時間以及小鼠5min內(nèi)受電擊的次數(shù)（出錯次數(shù)），作為小鼠的學習成績。24h后把小鼠放置到跳臺儀中順應環(huán)境變化3min，然后將其放置到跳臺上，記錄小鼠第1次跳下平臺的潛伏期及3min內(nèi)受電擊的次數(shù)（出錯次數(shù)），作為小鼠的記憶成績。

（2）Morris水迷宮實驗。實驗在各組小鼠喂對應茶液15d后開始。迷宮站臺半徑20.0cm，半徑240cm，水池高50cm，4個入水點分別為A、B、C、D，且把水迷宮等分為4個象限。迷宮的上面是一個由電腦所控制，能記錄小鼠活動的攝像機，能監(jiān)測小鼠的所有活動。小鼠的學習記憶能力用小鼠找到站臺所需時間的長短來表示。實驗室須絕對安靜，水溫保持的范圍為22±0.5℃。在開始實驗前，小鼠須早晚訓練2min，每次從不同入水點把試驗小鼠置于水迷宮中，若小鼠 2min未找到站臺，則把小鼠拿到站臺上并讓小鼠在站臺上等待20s。第3天的水迷宮測試隨機選一下水點進行。

2.4.2.2 血清SOD、MDA、GSH-Px測定

最后一次喂對應茶液后24h，把小鼠眼球摘除取血，然后采用常規(guī)辦法分離血清。按照試劑盒方法測定血清SOD、MDA、GSH-Px值。

2.4.2.3 臟器指數(shù)

小鼠殺死后趕快取出胸腺、脾臟。吸去器官上的血液，并去除附著在器官上的脂肪、系膜，同時用電子天平稱取其濕質(zhì)量。最后根據(jù)小鼠體質(zhì)量計算胸腺和脾臟指數(shù)。

胸腺、脾臟指數(shù)計算公式：臟器指數(shù)=臟器質(zhì)量/小鼠體質(zhì)量（mg/g）。

3 結果

3.1 改進代茶飲對小鼠耐缺氧、抗疲勞、睡眠時間的影響實驗

比之于空白組，改進代茶飲組存活時間明顯延長（P<0.05）；游泳時間提升（P<0.01）；而睡眠時間與空白組無差異，見表1。

3.2 改進代茶飲水提液對小鼠體重及臟器指數(shù)的影響

比之于空白組，改進代茶飲組的體重明顯降低（P<0.01），胸腺臟器指數(shù)與空白組無明顯差異；脾臟臟器指數(shù)升高（P<0.05，表2）。

3.3 改進代茶飲水提液對小鼠抗氧化指標的影響

比之于空白組，改進代茶飲組小鼠血清SOD活力明顯升高（P<0.05）；MDA水平顯著下降（P<0.01）；活力顯著升高（P<0.05，表3）。

3.4 改進代茶飲水提液對小鼠跳臺試驗的影響

比之于空白組，學習期間，改進代茶飲組的反應時間明顯較長（P<0.01）；錯誤次數(shù)明顯較少（P<0.05）；記憶時期，改進代茶飲組的潛伏期較長（P<0.01）；錯誤次數(shù)較少（P<0.05，表4）。

3.5 改進代茶飲水提液對小鼠水迷宮試驗潛伏期的影響

訓練期間，比之于空白組，改進代茶飲組小鼠游泳潛伏期越來越短（表5）。

3.6 改進代茶飲水提液對小鼠水迷宮試驗總路程的影響

訓練期間，比之于空白組，改進代茶飲組在整個水迷宮象限內(nèi)總路程越來越短（表6）。

3.7 小鼠水迷宮試驗目標象限時間和穿越次數(shù)的影響

測試期間，比之于空白組，改進代茶飲組在目標象限路程明顯較長（P<0.01，表7，圖1）；穿越平臺的次數(shù)增多。

4 討論

如前文所述，亞健康通俗來說就是似病非病，它給人們帶來個種種不適，但卻不是醫(yī)學中的疾病。本論文的研究對象即為針對亞健康狀態(tài)所設的改進代茶飲，其組成為黃芪，黨參，熟地，玫瑰花，綠萼梅，麥冬。改進代茶飲的組成里黃芪能益氣升陽，益衛(wèi)固表；黨參補中益氣，生津養(yǎng)血；熟地能峻補血氣，生精填髓；玫瑰花行氣散結，活血祛瘀；綠萼梅條達肝氣；麥冬生津潤肺。現(xiàn)代藥理學研究表明，黨參能增強人體抗應激能力及免疫力；可抗?jié)儯鰪娔c胃蠕動等作用。黃芪能提高免疫力。熟地能延緩衰老，益智，同時能提高免疫力，增強造血功能。玫瑰花可擴張血管，能預防心肌梗死，亦能抗部分病毒及病菌，如白血病病毒，傷寒桿菌等。麥冬可提高免疫力，有抗心肌缺血，抗心律失常，耐缺氧抗疲勞及降血糖等作用。

本研究所做實驗中，耐缺氧實驗顯示改進代茶飲能使小鼠在缺氧環(huán)境中存活時間延長；抗疲勞實驗顯示改進代茶飲可使小鼠耐力提高；睡眠時間影響實驗表明改進代茶飲改善了小鼠的睡眠情況。在對改進代茶飲對小鼠記憶功能、免疫、抗氧化作用的研究中也顯示小鼠的記憶功能有所增強，免疫力增強，抗氧化能力增強。由此可見，改進代茶飲確有保健作用，可長期服用。

本研究旨在通過對改進代茶飲的研究，來分析改進代茶飲的保健效果，以尋求合適的產(chǎn)品來改善人們亞健康的狀態(tài)。目前來看，改進代茶飲不失為改善亞健康的良好產(chǎn)品，值得推廣。

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