紅景天苷通過降低氧化應激介導氨基糖苷類藥物耳毒性的抑制作用

于姝媛 李浩楠 朱紫嘉 王蘋 杜波

近年來研究發現噪聲、增齡、耳毒性藥物以及耳蝸缺血再灌注引起的聽力損失，都與活性氧自由基氧化應激損傷有關[1]。紅景天苷（salidroside，SA）作為紅景天屬植物中廣泛存在的酚苷類化合物，可從植物的根、莖中提取，亦可通過生物合成、化學合成等途徑合成[2]，具有天然抗氧化作用。Zhang等[3]通過大鼠原代培養皮層神經元細胞模型，發現紅景天苷對氯化鈷誘導的缺氧損傷的保護作用呈劑量依賴性，認為與紅景天苷能夠提高神經元HIF-1的表達，降低細胞內活性氧水平，抑制核轉錄因子-кB蛋白的超表達有關。也有研究表明紅景天苷可激活NRF2信號傳導通路，促進NRF2核轉位，通過增加下游抗氧化酶表達來降低氧化應激水平，從而減輕氧自由基對心臟的損害[4]。但紅景天苷是否具有抵抗藥物耳毒性尚未見報道。本研究利用耳蝸基底膜離體培養技術，離體水平觀察SA藥物對毛細胞損傷的保護效應，并探討可能的分子機制。

1 材料及方法

1.1 主要實驗材料

DMEM-F12培養基，胎牛血清為Invitrogen公司產品。丙二醛（malondialdehyde，MDA）測試盒，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）測試盒，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）測定試劑盒購于南京建成科技有限公司。cDNA第一鏈合成試劑和qPCR擴增試劑盒為羅氏診斷產品。

1.2 實驗方法

1.2.1 耳蝸基底膜分離培養 取出生后4天的大鼠（由吉林大學醫學部實驗動物中心提供）。取材前先準備培養基，在直徑為35 mm的培養皿中加入完全培養液(1：1 DMEM/F12+10% FBS+100 U青霉素)500 μl，室溫放置30 min；在無菌條件下將大鼠斷頭取出聽泡，于顯微鏡下去除螺旋韌帶分離耳蝸基底膜。……