泉州地區漢族冠狀動脈粥樣硬化性心臟病人群Ⅰ相藥物代謝酶CYP2C19基因多態性分布研究

廖琳潔，陳德志，陳巧輝，陳志民

（中國人民解放軍第180醫院靜脈藥液配置中心，福建 泉州 362000）

細胞色素P450氧化酶是參與Ⅰ相藥物代謝最重要的酶，是目前已知底物最廣泛的生物轉化酶類，是一組結構和功能相近的超家族基因編碼的同工酶，主要存在于肝微粒體中，參與了人體內40%～50%的藥物代謝。CYP2C19是CYP家族中的重要一員，許多內源性底物、環境污染物及臨床約10%的藥物都由其催化代謝，涉及藥物包括質子泵抑制劑、三環類抗抑郁藥、選擇性5－羥色胺再攝取抑制劑、苯二氮 類、巴比妥類、普奈洛爾、S－美芬妥英等[1]。其基因呈多態性分布，CY2C19*1等位基因是野生型，編碼正常活性酶蛋白。*2，*3等位基因是在亞洲人群中常見的突變類型，均編碼無活性酶蛋白，這2個等位基因可解釋在東方人中99% 弱代謝表型[2－3]。代謝表型的差異導致經該酶代謝藥物作用的個體差異。近年來，多有我國各地區不同民族CYP2C19基因多態性調查情況的報道，但尚無泉州及周邊地區的相關報道。本研究中考察泉州地區漢族冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）人群CYP2C19*1，*2，*3基因型的分布情況，并與其他地區漢族人群作比較，為本地區相關人群個體化精準給藥方案的制訂和臨床合理用藥提供參考依據。

1 資料與方法

1．1 資料收集

連續收集心內科確診為冠心病、籍貫為泉州且無親緣關系的住院患者210例。其中，男154例，平均年齡（58．88 ±1．14）歲；女 56 例，平均年齡（56．82 ±2．10）歲。

1．2 方法

CYP2C19基因型檢測：采集上述人群靜脈血2 mL，置EDTA抗凝管內，用血液基因組提取試劑盒提取樣本DNA，采用聚合酶鏈反應微陣列芯片雜交方法測定CYP2C19*1，*2，*3基因型。試劑和儀器均為上海百傲科技有限公司配套試劑盒及Bai O系列儀器，嚴格按照試劑和儀器說明書操作規程進行操作。

代謝表型：無功能缺失等位基因的CYP2C19*1／*1為快代謝型（EM）；攜帶 1個功能缺失等位基因的CYP2C19*1／*2和 CYP2C19*1／*3為中間代謝型（IM）；攜帶2個功能缺失等位基因的CYP2C19*2／*2，CYP2C19*2／*3和 CYP2C19*3／*3為慢代謝型（PM）。

1．3 統計學處理

采用 SPSS 22．0統計軟件進行分析。按 Hardy－Weinberg平衡定律驗證樣本群體代表性，等位基因及基因型采用計數法計算。計量資料以表示，行 t檢驗；計數資料以百分率表示，行 χ2檢驗。P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 CYP2C19基因多態性分布情況

本研究人群中CYP2C19*1，*2，*3等位基因分布符合 Hardy－Weinberg平衡定律（P ＞0．05），提示入選對象具有群體代表性,詳見表1。本研究人群CYP2C19*1，*2，*3等位基因分布頻率分別為60．48% ，33．10% ，6．43% ，CYP2C19*1 ／*1，*1 ／*2，*1／*3，*2／*2，*2／*3 基因型分布頻率分別為32．86% ，45．71% ，9．52% ，8．57% ，3．33% ，暫未發現*3／*3 基因型。EM，IM，PM 分別為 69，116，25 例，頻率分別為 32．86% ，55．23% ，11．90% 。結果見表 2。

2．2 不同性別CYP2C19基因型分布情況

按人群性別分組后對CYP2C19等位基因分布頻率、基因型分布頻率進行比較（P＞0．05），結果見表2。

2．3 不同年齡組CYP2C19基因型分布情況

按人群年齡分組后對CYP2C19等位基因分布頻率、基因型分布頻率進行比較（P＞0．05），結果見表3。

2．4 與其他地區、不同民族人群的比較

將本研究人群CYP2C19等位基因和基因型分布情況分別與福建、廣東、河南、云南、沈陽漢族健康人群及回族、維吾爾族、哈薩克族人群進行比較：在等位基因分布方面，本研究人群與福建、廣東、河南、云南、沈陽漢族健康人群相似（P ＝0．84，0．22，0．87，0．77，0．30），與回族、維吾爾族、哈薩克族人群差異顯著（P＝0．00）；在基因型分布方面，本研究人群與福建、廣東、河南、云南漢族健康人群相似（P ＝ 0．46，0．22，0．88，0．33），與沈陽漢族，回族、維吾爾族、哈薩克族人群差異顯著（P＝0．02，0．00，0．00，0．00）,詳見表 4。

3 討論

CYP2C19基因位于人10號染色體長臂上(10q24．1．10q24．3)，包含 9 個外顯子和 8 個內含子。CYP2C19*2是外顯子5第686位堿基發生G→A突變，從而產生了一個異常的剪切位點，引起40 bp的堿基發生缺失，改變了mRNA的閱讀框架，從而使蛋白的合成過早終止，生成一個缺乏血紅素結合位點的無功能酶蛋白[4]。CYP2C19*3是在外顯子4的第636位堿基處發生G→A突變，產生了未成熟的終止密碼子代替了色氨酸，導致蛋白合成提前終止，產生1個211個氨基酸的缺乏血紅素及底物結合區而無活性蛋白[5]。IM(*1／*2或*1，*3)產生的酶催化活性下降，僅為EM(*1 ／*1）酶活性的 10% ～45%，PM(*2 ／*2，*2 ／*3或*3／*3）產生的酶活性僅為正常的1% ～5%[6]。

表1 泉州漢族冠心病人群CYP2C19*2，*3位點Hardy－Weinberg平衡檢驗結果（例，n＝210）

表2 不同性別CYP2C19基因型分布比較(%)

表3 不同年齡CYP2C19基因型分布比較(%)

表4 不同地區、不同民族人群比較(%)

本研究中，泉州漢族冠心病人群的CYP2C19基因多態性分布情況在不同性別和年齡層次中的分布均無差異，且與福建漢族健康人群[7]無顯著差異（P ＝0．461＞0．05），提示CYP2C19*2，*3等位基因與冠心病發病的相關性不大，與張冬青等[8]的研究結論一致，但仍需結合多因素多層次分析校正后確認。多項研究表明，CYP2C19*2，*3等位基因（尤其是*2等位基因）增加氯吡格雷抵抗、經皮冠狀動脈介入(PCI)術后支架內血栓形成、嚴重不良心血管事件的發生風險[9－10]。Simon等[11]研究指出，2 208例急性心肌梗死患者中1 535例接受PCI治療者，攜帶2個突變等位基因患者心血管事件發生率是非攜帶者的 3．58 倍(95%CI，1．71 ～ 7．51)。Gladding等[12]提出，對于攜帶功能缺陷性CYP2C19變異基因的患者，增加氯吡格雷劑量可提高其抗血小板效果。特別是，同時攜帶2個突變等位基因的患者建議聯合抗凝治療或換用替格瑞洛等無需活化的新一代抗血小板藥[13]。

本研究結果顯示，泉州漢族冠心病人群中攜帶有CYP2C19*2，*3突變等位基因者高達67．13%，我國其他地區漢族人群中攜帶此二突變等位基因者也約有60%[7，14－18]，顯著高于回族、維吾爾族、哈薩克族人群；且冠心病人群多為中老年人群，常合并其他疾病如消化道潰瘍、肺部感染、失眠、抑郁、癲癇等，除常用氯吡格雷抗血小板治療外，還會經常用到奧美拉唑等質子泵抑制劑及伏立康唑、地西泮、西酞普蘭、丙戊酸鈉等藥物，均有經CYP2C19途徑代謝。因此，研究漢族冠心病人群中的CYP2C19基因多態性對指導該人群的合理用藥、減少不良反應發生具有重要意義。

泉州地區漢族人口主要由東晉末期和唐代末期大量中原漢族入閩與當地百越人融合發展而來[19]。通過與我國不同地區漢族比較可知，泉州漢族人群與廣東、河南、云南等中南部地區漢族人群的CYP2C19基因多態性分布相似，與沈陽地區漢族人群在CYP2C19基因型的分布上則有顯著差異，而漢族與回族、維吾爾族、哈薩克族人群在CYP2C19等位基因和基因型的分布上差異顯著（P＝0．00），說明 CYP2C19基因多態性在不同種族間差異較大，同一民族在不同地區的淵源、發展也會產生較大差異，再考慮到肝藥酶的可誘導性，臨床應注意地區、種族的影響，以更好地指導個體化合理用藥，具體仍需進行擴大樣本量的多因素、多中心研究證實。