阿德福韋酯聯(lián)合九味肝泰治療對兒童慢性乙型肝炎患者T細(xì)胞亞群及肝纖維化指標(biāo)的影響

張俊婷 安和兵

研究[1]顯示，乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染的慢性化及免疫耐受與患者自身免疫狀態(tài)密切相關(guān)，而免疫耐受及免疫功能紊亂是慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)的治療難點(diǎn)。兒童CHB多由母親感染HBV后，經(jīng)胎盤垂直傳播，生活密切接觸、注射、輸血等也是HBV重要的傳播途徑[2]。目前，CHB的治療仍缺乏特異性，臨床主要通過提高患者自身免疫功能、增強(qiáng)抵抗力來提高HBV清除率。研究[3]表明，具有核苷類似結(jié)構(gòu)的藥物可有效抑制HBV的繁殖，防止CHB向肝纖維化及肝硬化發(fā)展。阿德福韋酯作為新型抗HBV藥物，為單磷酸腺苷無環(huán)核苷類似物，能夠競爭性抑制HBV多聚酶作用，終止乙肝病毒脫氧核糖核酸(hepatitis B virus -desoxyribose nucleic acid，HBV-DNA)鏈的延長，抑制HBV復(fù)制，達(dá)到治療CHB的目的[4]。九味肝泰具有活血化瘀之功效，可增加肝組織血流量、改善微循環(huán)、護(hù)肝降酶、恢復(fù)肝細(xì)胞代償功能[5]。本研究采用阿德福韋酯聯(lián)合九味肝泰治療兒童CHB，探討該療法對T細(xì)胞亞群及肝纖維化指標(biāo)的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年8月至2016年7月收治的兒童CHB患者74例為研究對象，依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察組和對照組，每組各37例，觀察組中男性21例，女性16例；年齡7～15歲，平均(8.12±1.74)歲；病程1～6年，平均(3.81±1.63)年。對照組中男性20例，女性17例；年齡6～15歲，平均(8.24±1.91)歲；病程1～6年，平均(3.74±1.51)年。兩組患者年齡、性別、病程差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合兒童CHB診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；②轉(zhuǎn)氨酶持續(xù)或反復(fù)異常>6個月者；③ HBV-DNA和乙肝表面抗原(hepatitis B virus surface antigen，HBsAg)陽性>6個月者；④患兒家長知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①藥物性肝損傷、酒精性肝損傷、自身免疫性肝病、其他型肝炎等患者；②自身免疫性疾病、惡性腫瘤及近1年內(nèi)進(jìn)行抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等治療者。

1.3 方法 對照組患者在保肝、降酶的基礎(chǔ)上，口服阿德福韋酯(正大天晴藥業(yè)，國藥準(zhǔn)字H20051942)0.25 mg/kg，1次/天，觀察組患者在對照組的基礎(chǔ)上，口服九味肝泰膠囊(湖南新匯制藥，國藥準(zhǔn)字Z20025174)1粒/次，3次/天。兩組患者均治療6個月，治療期間，定期檢查肝腎功能。

1.4 觀察指標(biāo)及檢測方法 觀察兩組患者治療前后肝功能、T細(xì)胞亞群、肝纖維化指標(biāo)及轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor beta 1，TGF-β1)變化。分別采集治療前后患者清晨空腹外周靜脈血15 mL，分別置于肝素管中送檢。肝功能：采用全自動生化分析儀(日本Olympus AU800)測定總膽紅素(total bilirubin，TBIL)、總膽汁酸(total bile acid，TBA)、天氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase ,AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(gamma-glutamyltransferase，GGT)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanine amino transferase，ALT)的水平。T細(xì)胞亞群：采用流式細(xì)胞儀(美國BD公司)測定CD3+、CD4+、CD8+，計算CD4+/CD8+。肝纖維化指標(biāo)：標(biāo)本以3 000 r/min離心，提取血清，采用放射免疫法(GC1200r放射免疫計數(shù)儀，上海海研所)測定血清透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)、Ⅳ型膠原(IV collagen，ⅣC)、層黏蛋白(laminin，LN)、Ⅲ型前膠原N末端肽(N-terminal peptide of type Ⅲ procollagen，PⅢNP)；采用ELISA法(上海太陽生物技術(shù)公司)測定TGF-β1。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后肝功能比較 治療前，兩組患者肝功能各項指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組患者TBIL、TBA、AST、GGT、ALT水平較同組治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組患者的TBIL、TBA、AST、GGT、ALT水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組患者治療前后肝功能各項指標(biāo)水平的比較

表1續(xù)

組別例數(shù)TBIL(μmol/L)TBA(μmol/L)AST(U/L)GGT(U/L)ALT(U/L)治療后 對照組3718.76±5.23*11.73±3.62*35.76±6.83*45.74±6.36*42.36±7.13* 觀察組3711.79±3.76*5.82±1.41*18.45±3.61*28.41±5.23*20.37±4.16*t值6.584 9.26213.63212.80316.201P值<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001

注：與同組治療前比較，*P<0.05

2.2 兩組患者治療前后T細(xì)胞亞群水平比較 治療前，兩組患者T細(xì)胞亞群水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較同組治療前升高，CD8+降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；觀察組患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于對照組，CD8+低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組患者治療前后T細(xì)胞亞群水平的比較

注：與同組治療前比較，*P<0.05

2.3 兩組患者治療前后肝纖維化指標(biāo)比較 治療前，兩組患者肝纖維化指標(biāo)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。治療后，兩組患者HA、ⅣC、LN、PⅢNP、TGF-β1較同組治療前降低(P<0.05)；觀察組患者的HA、ⅣC、LN、PⅢNP、TGF-β1低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。詳見表3。

表3 兩組患者治療前后肝纖維化各項指標(biāo)水平比較

注：與同組治療前比較，*P<0.05

3 討論

現(xiàn)代研究[7]認(rèn)為，CHB的發(fā)病與免疫系統(tǒng)關(guān)系密切，人體感染HBV后，首先發(fā)生一系列非特異性反應(yīng)，表現(xiàn)為自然殺傷細(xì)胞、肝巨噬細(xì)胞、干擾素等的活化，若病毒未能及時清除，將發(fā)生特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)。研究[8]顯示，樹突狀細(xì)胞可激發(fā)CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的活性，增強(qiáng)鄰近細(xì)胞對HBV的抵抗作用；另一方面，T細(xì)胞可誘導(dǎo)病毒感染的靶細(xì)胞凋亡，有效清除病毒。因此，筆者認(rèn)為外周血T細(xì)胞亞群的變化可直接反應(yīng)機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)變化。

藥理研究[3-5]顯示，阿德福韋酯通過作用于逆轉(zhuǎn)錄酶起到抑制和阻斷HBV復(fù)制的作用，從而降低HBV-DNA載量，改善肝功能；九味肝泰對改善CHB患者肝功能、促進(jìn)HBV-DNA陰轉(zhuǎn)具有重要意義。本研究兩組患者治療后，TBIL、TBA、AST、GGT、ALT水平較同組治療前降低(P<0.05)，而觀察組患者治療后，TBIL、TBA、AST、GGT、ALT水平低于同期對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。療效結(jié)果與文獻(xiàn)[9]相近似，提示阿德福韋酯聯(lián)合九味肝泰對兒童CHB患者肝功能指標(biāo)有明顯改善作用。T細(xì)胞由不同亞群組成，是機(jī)體抗感染免疫中起主導(dǎo)作用的免疫活性細(xì)胞，為細(xì)胞免疫主要組成部分[10-11]。T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在肝細(xì)胞損傷的發(fā)生和HBV清除方面起重要作用，外周血CD3+、CD4+、CD8+是反映機(jī)體細(xì)胞免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)，當(dāng)T細(xì)胞亞群數(shù)量和功能發(fā)生異常時，可引起機(jī)體免疫功能紊亂而發(fā)生HBV感染[12-13]。本研究發(fā)現(xiàn)，治療后，觀察組患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+高于同期對照組，CD8+低于同期對照組(P<0.05)，提示CD4+T細(xì)胞在兒童CHB患者中起誘導(dǎo)和輔助作用，感染HBV后，細(xì)胞免疫功能受損，CD4+T細(xì)數(shù)量減少，而阿德福韋酯和九味肝泰能夠抑制HBV，使CD4+T細(xì)胞數(shù)量升高，CD8+T細(xì)胞在CD4+T細(xì)胞輔助下，通過非細(xì)胞損傷途徑清除HBV。

有學(xué)者[14-15]指出，LN、PⅢNP、HA、ⅣC聯(lián)合組成慢性肝病肝纖維化血清學(xué)檢測譜，并表明其水平與肝纖維化程度呈正相關(guān)。因此，通過檢測CHB患者血清LN、PⅢNP、HA、ⅣC指標(biāo)可對臨床療效進(jìn)行評價。研究[16]表明，CHB患者血清IL-10、HA會異常增高，而TGF-β1、HA高表達(dá)是受損肝纖維化的重要標(biāo)志，臨床抑制TGF-β1、HA過度表達(dá)也是治療兒童CHB的關(guān)鍵。有學(xué)者[17]采用九味肝泰膠囊聯(lián)合恩替卡韋治療兒童CHB，治療6個月后，TGF-β1、HA水平降低程度明顯優(yōu)于單獨(dú)用藥組，說明核苷類似結(jié)構(gòu)的藥物聯(lián)合九味肝泰膠囊可通過多種機(jī)制保肝降酶和抑制肝纖維化。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組患者治療后，HA、ⅣC、LN、PⅢNP、TGF-β1低于同期對照組(P<0.05)，結(jié)果與文獻(xiàn)[17]報道相符，提示阿德福韋酯聯(lián)合九味肝泰治療兒童CHB，具有良好的保肝、抗纖維化作用。

綜上所述，阿德福韋酯聯(lián)合九味肝泰可有效調(diào)節(jié)兒童CHB患者免疫功能，有效改善肝功能，并具有良好的抗纖維化作用。

[1] 蔡群,張亞飛,李鴻賓,等.慢性乙型肝炎患者肝組織內(nèi)HBcAg表達(dá)的臨床研究[J].安徽醫(yī)學(xué),2016,37(12):1477-1479.

[2] 曾躍紅,田海清,王新華,等.乙型病毒性肝炎臨床轉(zhuǎn)歸與機(jī)體細(xì)胞免疫功能狀況的相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報,2015,12(5):8-12.

[3] 馬玉秀,辛?xí)远?于國英,等.阿德福韋酯抗病毒對慢性乙型肝炎的臨床療效及對外周血T淋巴細(xì)胞亞群的影響研究[J].中國生化藥物雜志,2014(4):88-90.

[4] 張凱,李征,陳紅.替比夫定聯(lián)合阿德福韋酯治療慢性乙型肝炎療效與安全性的系統(tǒng)評價[J].中國循證醫(yī)學(xué)雜志,2014,14(3):335-340.

[5] 秦雪琴,陳悅,吳文琴,等.九味肝泰膠囊聯(lián)合恩替卡韋治療慢性乙型肝炎肝硬化的臨床療效觀察[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2016,26(6):361-363.

[6] 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)[J].中華內(nèi)科雜志,2011,50(2):1-12.

[7] 李冶剛,張超飛,郭希邦.慢性乙型肝炎病毒感染者外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化及檢測意義[J]. 中國慢性病預(yù)防與控制,2015,23(10):775-776.

[8] 汪云,李紅霞,馮濤,等.不同病毒載量慢性乙型肝炎患者樹突狀細(xì)胞B7-H1表達(dá)及對免疫功能的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,14(6):1029-1032.

[9] 楊增強(qiáng),陳悅,吳文琴,等.九味肝泰聯(lián)合恩替卡韋對慢性乙型肝炎早期肝硬化患者肝纖維化及肝功能的影響[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2016,32(6):1191-1194.

[10]邵錦帆,袁曉東,駱必偉,等.慢性乙型肝炎患者外周血中記憶T細(xì)胞亞群分布研究[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué),2015 (3):15-17.

[11]張靜.重組人干擾素α-2b注射液治療兒童慢性乙型肝炎療效分析[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2015 (2):118-119.

[12]楚玉蘭,顧洪立,蘭繼,等.慢性乙型肝炎及后期肝病患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群標(biāo)志的研究[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué),2016,23(7):873-876.

[13]田艷平,朱曉虹.41例兒童慢性乙型肝炎患者抗病毒藥物使用分析[J].藥物流行病學(xué)雜志，2017 (1):53-55.

[14]高慧,肖芙蓉,許小珍,等.自擬抗纖方治療慢性乙型肝炎肝纖維化患者的療效及對患者Th1/Th2細(xì)胞亞群的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志,2016,24(11):864-867.

[15]陳宇鋒,顧爾莉,張琳,等.抗纖膠囊聯(lián)合恩替卡韋治療慢性乙型肝炎肝纖維化的臨床研究[J].南通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2016,36(6):550-552.

[16]朱文靜,陳江,逮心敏,等.乙型肝炎病毒感染相關(guān)疾病患者T淋巴細(xì)胞亞群的變化與意義[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2015 (8):1102-1103.

[17]王欣玲,羅霞,孫建琴,等.九味肝泰膠囊聯(lián)合恩替卡韋治療兒童慢性乙型肝炎的臨床研究[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2017,32(1):96-100.