已防腐固定尸頭標本的血管灌注方法研究

溫一奇 賴贊區(qū) 葉曉云 魏小兵▲

1.廣東省惠州市第三人民醫(yī)院神經(jīng)外科，廣東惠州 516001；2.廣東省惠州衛(wèi)生職業(yè)技術學院基礎部，廣東惠州516000

目前臨床常用顯微外科的技術進行顱腦部位疾病的治療，但是該手術操作精確細微，嚴謹細致，對醫(yī)師的解剖學知識要求非常嚴格[1]。只有進行該手術的醫(yī)生有足夠的解剖學知識儲備，才能夠在微創(chuàng)條件下，很好的完成手術的入路以及相關疾病的治療[2]。因此，很多外科醫(yī)生迫切地需要充足、制作精良的人體標本進行解剖知識的學習以及手術模式的推演與研究。所有類型的標本中，通過血管灌注制作的標本因為可以清晰地顯示人體血管的走形、分布以及各條重要分支，因而備受青睞[3-4]。現(xiàn)階段我國用于研究的尸體比較緊張，而且絕大部分是用福爾馬林進行固定的標本，進行常規(guī)的血管灌注有一定的難度。為了研究科學合理并且高效的灌注方法，促進解剖學教育以及顯微外科學的發(fā)展，我院特利用現(xiàn)有的20例通過福爾馬林固定的尸頭標本，研究對已固定好的尸頭標本的合理灌注方法，現(xiàn)詳細報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇惠州市衛(wèi)生職業(yè)技術學院2002年至今保存的經(jīng)過福爾馬林固定防腐處理的尸頭標本共計20例進行本次研究。本次研究使用的灌注用品采用白乳膠加質(zhì)量優(yōu)良的普通顏料配合而成。動脈灌注時選擇紅色顏料，靜脈灌注時選擇藍色顏料。進行灌注之前標本的浸泡軟化采用析純氨水和蒸餾水蒸餾水。其他用品包括醫(yī)用一次性注射器以及輸液器。

1.2 方法

1.2.1 灌注之前尸頭標本的處理 標本從福爾馬林固定液中取出以后，因為有比較大的刺激性氣味，不適合立即進行灌注[5]。首先把標本浸泡在濃度為60%～70%的酒精中，時間設定為2周。經(jīng)過充分浸泡以后，標本內(nèi)的福爾馬林大部分都被酒精洗凈，因為刺激性氣味大大降低，同時酒精也能讓因為長期浸泡發(fā)生顏色以及形態(tài)改變的標本得到一定程度的恢復，標本軟化，有利于下一步的操作。

1.2.2 對尸頭標本進行解剖 為了下一步插管的順利進行，需要對尸頭部位較大的血管進行解剖，有利于血管的充分暴露及導管的置入。依據(jù)具體灌注部位的不同選擇合適的解剖部位。

1.2.3 插管并進行血管的沖洗 把去掉頭皮針和過濾器的輸液器置入提前解剖暴露的尸頭標本的血管之中[6]，并進行合理牢固的固定。完成后把插管和盛有蒸餾水的輸液瓶連接，并抬舉到一定高度形成壓力差，開放另一側未連接插管的血管。注意靜脈生理上承受壓力的能力低于動脈，為防止血管破裂，應控制好沖洗的壓力。沖洗動脈時使用的液體量在500～1000mL之間，進行靜脈的沖洗時液體量一般在2000mL左右。

1.2.4 調(diào)配灌注所需的顏料 白乳膠以及普通染料和氨水適量混合，攪拌均勻后制作顏料。其中，稀色料的制作需要使用白乳膠的量為20g，氨水需要使用15mL左右。比較濃稠的染料色料需要使用白乳膠的量為40g，氨水需要使用的量大約為3mL左右。

1.2.5 灌注 進行灌注的時候首先用骨蠟堵住頸椎的斷口。把所有插管關閉后，開放一側頸動脈的插管并注入調(diào)配好的稀染料。無法繼續(xù)注入時，進行另一側頸動脈的注入直至顏料流出。同樣的步驟進行椎動脈內(nèi)的灌注。注入稀色料注成功以后馬上依照完全一樣的步驟進行較粘的顏料的灌注。操作完成把血管封閉。靜脈灌注：注意靜脈生理上承受壓力的能力低于動脈，為防止血管破裂，應控制好沖洗的壓力，不宜過于用力。完成操作60min以后需要再次進行灌注，防止血管收縮后影響灌注效果。

1.2.6 效果的檢查 操作成功以后，選擇顱頂部位進行鉆孔用來檢查灌注結果。灌注以后組織分層清晰，腦內(nèi)動靜脈可以輕松辨認，無漏膠現(xiàn)象則認為灌注結果滿意。如果未取得令人滿意的效果，可以再次灌注。檢查結果滿意后，將標本放置2 ～ 3d后，置入含有濃度為60%酒精的塑料桶內(nèi)等待下一步的使用或研究。

1.3 標本灌注效果的評價

觀察灌注完成以后尸頭標本的組織分離情況，血管的各項分支和各種變異的顯示情況，計算灌注的成功率，綜合評價本次尸頭標本灌注的效果，并分析影響灌注效果的相關因素。

其中，灌注成功的標準為組織分層明顯易于辨認、血管分支清晰地顯示、可以輕松地發(fā)現(xiàn)標本存在的變異，成功率為：（灌注成功標本數(shù)/標本總數(shù)）×100%。

2 結果

在進行本次研究之前，我們查閱相關文獻按照常規(guī)新鮮尸頭標本制作的流程和方法進行過實驗性標本制作，但是發(fā)生了大范圍的染料露出現(xiàn)象，制作的標本無法用于解剖學研究（見圖1 ～ 2），共制作了5具標本，有4具制作失敗，制作的成功率僅為20%。本次研究嚴格依照上述操作步驟進行尸頭標本的灌注，總共制作了20例標本。經(jīng)過浸泡軟化以后，長時間固定的標本顏色以及肌肉組織的狀態(tài)得到一定程度的改善，雖然骨骼顏色變化并不明顯，但是組織分層明顯，層次非常清晰，有利于灌注的進行（見圖3 ～ 4）。制作的20例標本中，有17例制作成功，效果滿意，成功率為85%（17/20），明顯比以往進行標本制作（20%）的成功率高，有2例（10%）因為靜脈灌注時靜脈血管破裂導致灌注染料露出影響了標本質(zhì)量；有1例（5%）標本動脈灌注存在缺陷。制作完成的標本，血管因為有灌注液的充盈，非常飽滿容易辨認，動靜脈顏色顯示清晰，可以輕松地辨別。各個重要分支顯示的很清楚，可以很方便及時地發(fā)現(xiàn)存在的各種變異。

圖1 常規(guī)新鮮標本灌注方法發(fā)生的染料露出

圖2 常規(guī)新鮮標本灌注方法發(fā)生的染料露出

圖3 組織分層明顯

圖4 骨骼顏色變化不明顯

3 討論

隨著我國科技近年來的巨大進步，醫(yī)學相關技術也得到了極大的發(fā)展。這其中，發(fā)展最迅速的當屬外科學門類中的神經(jīng)外科學[7]，該科學目前已經(jīng)發(fā)展到不單單進行簡單的可視性手術，而是可以利用多種技術和器材就行創(chuàng)口極小的顯微外科的治療的地步[8]。該方式可以用來治療多種對人們健康有極大的危害的疾病，給患者帶來很大的好處，減輕了他們的經(jīng)濟以及心理負擔，極大地促進了相關疾病的治療[9]。但是，顯微神經(jīng)外科手術操作精細，對顱腦外科醫(yī)師的解剖學知識提出了比較嚴格的要求。該手術需要進行操作的醫(yī)生具有綜合全面的解剖學知識，對人體顱腦部位分各個解剖結構及其部位甚至重要血管的較大的分支都有清晰的認識。而學習研究解剖學知識最有效的方式就是觀察揣摩人體標本，顱腦外科最需要的自然是尸頭標本。通過這種標本，解剖研究人員或者相關科室的臨床大夫可以對解剖知識更加熟悉，從而對人體的正常結構了然于胸，有利于手術成功率的提高。因此，通過血管灌注的方式進行標本的制作對醫(yī)學科學的發(fā)展具有重要的意義[10]。通常進行灌注的材料選擇乳膠和普通染料，乳膠一般不溶于水中，可以使人體死亡后塌陷的血管重新充盈[11]，便于觀察；加入的普通染料可以起到標注的作用，能夠分別顯示動脈以及靜脈血管，更利于觀察和研究[12]。進行灌注之后的標本，血管充盈度更優(yōu)秀，各個解剖部位與走形更加直觀，而且染料分布均勻，各部位顯色清晰[13]，不容易引起相關部位的污染，有利于學習。目前最常見的是針對新鮮尸體標本的灌注方法[14]，而缺乏針對已固定好的標本的灌注方法。因此我院嘗試進行經(jīng)過長時間福爾馬林浸泡固定的尸頭標本的血管灌注。

較以前按照常規(guī)新鮮尸頭標本進行的實驗性血管灌注研究，本次研究通過科學合理的分析之后，改進了灌注方法，取得了令人滿意的灌注效果。總共制作的20例尸頭標本中，只有3例標本灌注效果沒有達到預期效果，成功率達到85%（17/20），明顯高于我們按照傳統(tǒng)方法制作標本的成功率（20%）。而且改進方法之后，灌注完成的標本血管充盈、顯示良好，清楚地顯示了重要血管的分支以及存在的變異，各組織層次分明，是非常優(yōu)良的學習與觀察標本，效果非常令人滿意。經(jīng)過查閱文獻以及討論分析，對于本次研究取得令人滿意結果的原因，可能有以下幾點因素：（1）本次研究在灌注之前經(jīng)過了60%乙醇的浸泡軟化。長期儲存于甲醛溶液之中的標本，受到其影響，標本的顏色發(fā)生變化，含有蛋白質(zhì)的肌肉血管等組織受到福爾馬林的侵蝕，對物理刺激的耐受降低，非常容易破裂。通過酒精的作用，可以去除一部分甲醛，恢復血管的物理抗性，使皮膚等組織恢復原有的顏色，有利于灌注的進展和進一步的觀察與學習。（2）本次研究對血管進行了沖洗操作。合理的清洗可以去除血管內(nèi)的淤血，使管腔更加通暢，內(nèi)部壓力降低。從而有利于灌注時染料的順利進入以及均勻分布[15]。（3）本次研究針對長期福爾馬林浸泡過的標本物理抗性降低這一因素制定了合適的壓力。壓力過大會導致染料露出，污染組織使標本制作失敗；壓力過低染料無法均勻分布于標本的各個部位，染色不均勻，同樣無法取得令人滿意的效果。

綜上所述，對已經(jīng)固定好的尸頭標本進行血管灌注的操作時，要密切注意灌注前對標本進行浸泡軟化，灌注前要對血管進行沖洗，并且選擇合適的灌注壓力，只有這樣，才能制作出令人滿意的解剖學標本。

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