生物活性陶瓷、骨形態發生蛋白、醫用生物蛋白膠復合物誘導成骨活性研究

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山東省濟寧市第二人民醫院骨科,濟寧 272049

隨著創傷性骨缺損及各種骨病刮除病灶后遺留骨缺損的日益增多,骨缺損的修復重建成為骨科常見的課題,也是難題之一。骨形態發生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)能夠誘導動物或人體間充質細胞分化為骨、軟骨、韌帶、肌腱和神經組織[1]。本研究用陶瓷人工骨、纖維蛋白和骨形態發生蛋白復合物進行誘導成骨試驗,通過大體標本、病理組織學觀察及堿性磷酸酶活性檢測,與單純使用陶瓷人工骨進行對比,以探討復合載體復合誘導因子的誘導成骨作用是否優越及其作用機制。

1 材料和方法

1.1 病例選擇、分組

選純種SD大鼠20只,雌雄不限,體質量(200±20)g,隨機分為A、B、C 3組,每組10只,觀察4周。每組10只分為2組,每組5只,第1組(試驗組)、第2組(對照組)。

1.2 復合物制備

將骨形態發生蛋白溶液、纖維蛋白原溶液、陶瓷人工骨按1∶1∶1比例放入玻璃容器,攪拌,充分混合后,置于37 ℃恒溫箱中保溫1 h,充分反應,即得陶瓷人工骨、骨形態發生蛋白及纖維蛋白復合物。

1.3 手術過程

大鼠用0.25%硫賁妥鈉腹腔注射麻醉,將雙腿剃毛,酒精消毒,切開股后肌群,分離出肌袋,按表1分別植入相應復合物,縫合各層,放入籠中飼養。

1.4 術后處理

每只大鼠每日肌注青霉素4萬單位,連注3 d,4周檢測。

1.5 大體標本肉眼觀察植入物的大小、硬度、血管分布情況

各組動物于相應時間點用脫臼法處死,觀察植入物的大小、硬度、血管分布情況。測量并記錄植入物的直徑,記錄血管長入情況,并記錄硬度。

1.6 術后植入物組織學觀察

在設定的時間點處死動物,取出標本,每組5個標本用10%甲醛中性液固定,常規脫鈣、脫水、石蠟包埋,5 μm連續切片,蘇木精-伊紅(HE)染色,光鏡下觀察。……