趙 容,盧林明,張根葆,柴 琳,周 玨
(皖南醫(yī)學(xué)院 1.病理生理學(xué)教研室;2.病理學(xué)教研室;3.口腔醫(yī)學(xué)院,安徽 蕪湖 241002)
胃癌是全球常見腫瘤之一,占全世界病死率的第二位[1],我國(guó)胃癌發(fā)病率占全球的42.7%,且我國(guó)胃癌的發(fā)病率及病死率均占所有惡性腫瘤的前三位[2]。由于胃癌早期癥狀往往并不明顯,大多患者就診時(shí)已是胃癌晚期,失去了手術(shù)機(jī)會(huì),所以尋求新一代天然安全高效的抗腫瘤藥物成為我們進(jìn)一步延長(zhǎng)患者生命、提高患者生存質(zhì)量的重要課題[3-4]。蛇毒是由蛇的毒腺分泌的一種天然毒蛋白,成分復(fù)雜,主要含蛋白質(zhì)、多肽及一些酶類,具有廣泛的生物學(xué)活性,可作為天然的藥用資源。蛇毒可導(dǎo)致神經(jīng)和細(xì)胞毒性,水腫,血小板減少癥和血液凝固因子的損害,并存在可以損害細(xì)胞完整性的l-氨基酸氧化酶和解聯(lián)蛋白,國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明,蛇毒對(duì)多種腫瘤等都有較好的抑制作用[5-8]。皖南蝮蛇毒抑瘤組分Ⅰ(Agkistrodonhalysvenom antitumor component-Ⅰ,AHVAC-Ⅰ)是由皖南醫(yī)學(xué)院蛇毒研究所通過改良蛇毒分離純化技術(shù),從皖南產(chǎn)蝮蛇蛇毒中提取的一種抑瘤組分,前期課題組發(fā)現(xiàn)AHVAC-Ⅰ對(duì)胃癌細(xì)胞株的作用機(jī)制可能通過誘導(dǎo)凋亡來抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖[8],因線粒體凋亡途徑是重要的凋亡方式之一,故本實(shí)驗(yàn)選擇探討線粒體凋亡途徑在AHVAC-Ⅰ對(duì)胃癌細(xì)胞株的可能作用機(jī)制。
1.1 人胃癌細(xì)胞SGC-7901的體外培養(yǎng) 試劑及藥品: AHVAC-Ⅰ干凍粉由皖南醫(yī)學(xué)院蛇毒研究所提供。RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基(凱基生物Hyclone)、胎牛血清(杭州四季青公司)、青霉素-鏈霉素溶液、胰酶消化液、MTT試劑盒(美國(guó)Sigma公司)、JC-1線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,△Ψm)(碧云天生物技術(shù)公司)。……