氧化應激體外模型的構建及沙利度胺保護作用的研究

高紅亮，吳 超，王 超，程 倩，李 曙

(皖南醫學院 病理生理學教研室，安徽 蕪湖 241002 )

氧化應激是指機體在遭受到有害刺激后，機體細胞內活性氧(reactive oxygen species，ROS)產生過多，導致組織和細胞的損傷[1]。由于氧化應激的增強，組織細胞內ROS水平急劇上升，而抗氧化酶如超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、過氧化氫酶(Catalase，CAT)等活性降低，使得ROS大量生成積聚，損傷核酸、蛋白質及脂質，導致炎癥因子表達，并觸發包括平滑肌細胞增殖和遷移在內的多種病理反應，甚至引起細胞凋亡或壞死[2-5]。氧化應激與臨床上多種疾病的發生發展有著極大的聯系，如動脈粥樣硬化發生發展、肺纖維化、癲癇、高血壓等[6]。沙利度胺(反應停又名酞胺哌啶酮，Thalidomide)最初作為鎮靜劑治療妊娠嘔吐,因有致畸作用(嬰兒海豹肢)而被禁用。隨著近年來的研究，沙利度胺作為抗血管生成劑和免疫調節劑被用于多種疾病的治療[7]，但是在對抗炎癥引起的氧化應激損傷中的研究較少，本實驗旨在通過體外炎癥氧化應激模型的構建，觀察沙利度胺對其的影響。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 沙利度胺購于常州制藥廠，為純品原料藥，將其溶解于二甲基亞砜(DMSO)后得終濃度為50 g/L的母液。四甲基偶氮唑藍(MTT)試劑盒購于碧云天生物有限公司，脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)(貨號L2880，Sigma公司),凋亡試劑盒(Sigma公司)。

1.2 方法

1.2.1 細胞培養 人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)獲于弋磯山醫院中心實驗室。用DMEM培養基加10%胎牛血清于37℃、含5%CO2的培養箱中培養，同時在培養基中加入雙抗(1%青霉素和鏈霉素)共同培養。

1.2.2 MTT實驗 MTT法檢測沙利度胺對于HUVEC的無毒性濃度范圍。……