人工鏡檢與朗邁（LabUMat+UriSed）全自動尿液分析儀對尿液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞檢測比較分析

任艷玲　劉麗霞

【摘要】 目的：比較朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀、朗邁UriSed全自動尿沉渣儀分析儀對尿液檢測的準(zhǔn)確性、可靠性，為臨床提供快速、準(zhǔn)確的結(jié)果。方法：隨機(jī)抽取1782例患者尿液標(biāo)本，分別用朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀、朗邁UriSed全自動尿沉渣儀分析儀及人工鏡檢三種方法進(jìn)行檢測，對檢測結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：以顯微鏡檢查作為對照，朗邁Urised全自動尿沉渣分析儀檢查紅細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：98.66%（960/973），97.78%（791/809）、0.98；朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢查紅細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：99.59%（969/973）、95.92%（776/809）、0.97。朗邁Urised全自動尿沉渣分析儀檢查白細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：98.59%（1190/1207），95.48%（549/575）、0.96；朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢查白細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：77.38%（934/1207）、73.91%（425/575）、0.63。結(jié)論：朗邁（LabuMat+UriSed）全自動分析儀檢測速度快、結(jié)果比較準(zhǔn)確，但不能完全取代人工鏡檢，必須與人工鏡檢合理的結(jié)合才能最快速、準(zhǔn)確地為臨床提供檢驗(yàn)結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】 尿沉渣； 尿干化學(xué)； 人工鏡檢； 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)； 白細(xì)胞計(jì)數(shù)

Comparison of Detection of Red Blood Cells and White Blood Cells in Urine by Manual Microscopy and （LabuMat+UriSed） Automatic Urine Analyzer/REN Yan-ling，LIU Li-xia.//Medical Innovation of China，2017，14（22）：047-050

【Abstract】 Objective：To compare the accuracy and dependability of LabuMat automatic urine dry chemical analyzer and UriSed automatic urine sediment analyzer for urine testing，and to provide the fastest and the most accurate results for clinic.Method：Urine samples of 1782 patients were randomly selected and detected by the three methods，detection results were compared.Result：Compared with microscopy，the sensitivity，specificity and Kappa values of RBC Urised automatic urine sediment analyzer were 98.66%（960/973），97.77%（791/809） and 0.98 respectively；the sensitivity，specificity and Kappa value of RBC LabuMat automatic urine dry chemical analyzer were 99.59%（969/973），95.92%（776/809） and 0.97 respectively.The sensitivity，specificity and Kappa values of WBC Urised automatic urine sediment analyzer were 98.59%（1190/1207），95.48%（549/575） and 0.96 respectively；the sensitivity，specificity and Kappa value of WBC LabuMat automatic urine dry chemical analyzer were 77.38%（934/1207），73.91%（425/575） and 0.63 respectively.Conclusion：LabuMat automatic urine dry chemical analyzer and UriSed automatic urine sediment analyzer can quickly and accurately provide clinical results，but they can not completely replace the manual microscopy，and they must be combined with manual microscopy to provide the fastest and the most accurate results for clinical.

【Key words】 Urinary sediment； Urine dry chemistry； Manual microscopy； Red blood cell count； White blood cell count

First-authors address：The Second Affiliated Hospital of Baotou Medical College，Baotou 026000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.22.014

尿液分析作為臨床檢驗(yàn)的三大常規(guī)之一，標(biāo)本采集方便、且能為泌尿系統(tǒng)及相關(guān)疾病診斷及治療提供重要依據(jù)，受到臨床醫(yī)生越來越多的重視，成為疾病診斷和常規(guī)體檢的必須手段。人工鏡檢的結(jié)果直觀、可靠，仍為尿液檢查的金標(biāo)準(zhǔn)[1]。但其操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、工作強(qiáng)度較大[2]，不能完全適應(yīng)臨床尿液檢測標(biāo)本量的增加。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的突飛猛進(jìn)，全自動尿液檢測分析儀問世了。朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢測最快速度達(dá)到250樣本/h，朗邁UriSed全自動尿液有形成分分析儀最快達(dá)到100樣本/h，其檢測速度之快是人類手工鏡檢不可比擬的，在一定程度上彌補(bǔ)了人工鏡檢速度較慢的不足。但是實(shí)際檢測中尿液成份十分復(fù)雜，一些形態(tài)近似的成分會產(chǎn)生相互干擾，結(jié)果使得朗邁UriSed全自動尿沉渣分析儀對某些有形成分產(chǎn)生錯(cuò)誤的判斷。朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀的干化學(xué)試紙比較容易受到環(huán)境因素的影響而出現(xiàn)假陽性或者假陰性，這暴露了全自動尿液檢測分析儀器的局限性。為此筆者進(jìn)行了如下的研究，以便全自動儀器與人工鏡檢緊密結(jié)合，取全自動尿液檢測分析儀器檢測速度快之長，補(bǔ)人工鏡檢費(fèi)時(shí)之短為臨床提供快速、準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2016年8-12月門診及住院部送檢患者尿液標(biāo)本1782例，年齡3～87歲，平均（42.0±2.5）歲。

1.2 儀器與試劑 普通雙目生物顯微鏡（日本Olympus公司）；朗邁UriSed全自動尿沉渣分析儀及配套尿沉渣計(jì)數(shù)板（匈牙利77Elektronika公司）；朗邁LabuMat干化學(xué)分析儀及其質(zhì)控品（北京倍肯恒業(yè)科技發(fā)展有限公司）；湘儀L550型臺式離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 每一位患者留中段尿液10 mL，盛于一個(gè)10 mL帶有刻度的、專用尿沉渣離心管中，標(biāo)本必須在2 h內(nèi)完成檢測。

1.3.2 尿液首先使用朗邁LabuMat干化學(xué)分析儀及朗邁UriSed沉渣分析儀進(jìn)行檢測。朗邁LabuMat干化學(xué)分析儀直接將檢測干化學(xué)條試紙完全浸入尿液中后取出，白光照射到尿試紙條上，彩色CCD傳感器接收反射光。儀器內(nèi)置程序?qū)?shù)字化的圖像信號進(jìn)行處理，先對試紙條上空白色塊進(jìn)行定位，然后對反射光的各波長進(jìn)行分析，計(jì)算出尿液中各組成成分的數(shù)值結(jié)果。朗邁UriSed全自動尿沉渣分析儀是將不離心的尿液經(jīng)混勻后加入特制的計(jì)數(shù)板中，通過內(nèi)置離心機(jī)以2000 r/min離心10 s（半徑6 cm），使尿液均勻地沉積于計(jì)數(shù)板底部。離心后，樣本承載板被推片裝置推至顯像系統(tǒng)上方的移動機(jī)械臂中，機(jī)械臂帶動樣本承載板自動移動20個(gè)攝像位，全自動計(jì)算機(jī)顯微鏡鏡檢智能識別，以形態(tài)學(xué)方法對尿液中的有形成分進(jìn)行自動識別與分類計(jì)數(shù)并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

1.3.3 人工鏡檢 參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[3]，取朗邁LabuMat干化學(xué)分析儀測試完的尿液標(biāo)本，以1500 r/min，離心5 min，傾去上清液，留取

0.2 mL混勻，吸取20 μL涂于清潔玻片，加蓋蓋玻片鏡檢，分別計(jì)數(shù)紅、白細(xì)胞等，細(xì)胞以10個(gè)視野中最少數(shù)到最多數(shù)報(bào)告。人工鏡檢均由有經(jīng)驗(yàn)的中級以上檢驗(yàn)師進(jìn)行操作。

1.3.4 結(jié)果判定 人工鏡檢紅細(xì)胞超過3個(gè)/高倍視野，但肉眼所見尿液顏色沒有異常時(shí)，稱為鏡下血尿；白細(xì)胞正常人尿沉渣鏡檢白細(xì)胞加膿細(xì)胞不超過5個(gè)/高倍視野，當(dāng)超過5個(gè)/高倍視野，就稱為鏡下膿尿。結(jié)果尿液有形成分參考范圍，一次性計(jì)數(shù)板法，紅細(xì)胞：男0～4.5 P/μL（成人）；女0～6 P/μL（兒童），0～7 P/μL（成人）；白細(xì)胞：男0～3 P/μL（兒童），0～6 P/μL（成人）；女0～4 P/μL（兒童），0～14/μL（成人）[4]。朗邁Urised全自動尿沉渣分析儀與朗邁LabuMat干化學(xué)分析儀廠家提供的參考范圍見表1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用 字2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。運(yùn)用Kappa檢驗(yàn)判斷一致性強(qiáng)弱，Kappa≤0.6表示一致性弱，0.60.8表示一致性極強(qiáng)。

2 結(jié)果

2.1 三種方法檢測尿液中RBC、WBC陽性結(jié)果比較 以人工鏡檢作為對照，Urised全自動尿液沉渣儀和LabuMat全自動尿液干化學(xué)分析儀檢測RBC、WBC結(jié)果見表2。

2.2 1782例尿液中紅細(xì)胞人工鏡和朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀及Urised全自動尿液沉渣儀法檢測結(jié)果比較 朗邁Urised全自動尿沉渣分析儀檢查紅細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：98.66%（960/973），97.78%（791/809）、0.98；朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢查紅細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：99.59%（969/973）、95.92%（776/809）、0.97，見表3。

2.3 1782例尿液中白細(xì)胞人工鏡和朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀及Urised全自動尿液沉渣儀法檢測結(jié)果比較 朗邁Urised全自動尿沉渣分析儀檢查白細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：98.59%（1190/1207），95.48%（549/575）、0.96；朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢查白細(xì)胞靈敏度、特異度、Kappa值分別為：77.38%（934/1207）、73.91%（425/575）、0.63，見表4。

3 討論

朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)分析儀檢測原理是利用尿液中的相關(guān)化學(xué)物質(zhì)使尿常規(guī)干化學(xué)試紙條不同發(fā)色模塊發(fā)生變色反應(yīng)。尿干化學(xué)潛血是根據(jù)血紅蛋白接觸活性原理，通過尿中的過氧化物酶分解過氧化物[5]，使鄰聯(lián)甲苯胺氧化呈色，強(qiáng)氧化劑可能造成假陽性。如果尿中有易熱性觸酶、尿液被氧化劑污染、尿路感染的細(xì)菌產(chǎn)生過氧化物酶時(shí)可出現(xiàn)假陽性，尿中存在大量血紅蛋白及含有大量還原物質(zhì)如維生素C、甲醛和亞硝酸鹽等時(shí)可出現(xiàn)潛血假陰性[6]。本研究發(fā)現(xiàn)除外血管內(nèi)溶血性疾病和肌紅蛋白損傷性疾病[7]，朗邁UriSed全自動尿液有形成分紅細(xì)胞與朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)中潛血呈一定的相關(guān)性，若出現(xiàn)二者不一致的現(xiàn)象均需進(jìn)行人工鏡檢。干化學(xué)檢測尿液中的白細(xì)胞主要根據(jù)酯酶法的原理[8]，將尿中的白紅胞轉(zhuǎn)化為酯酶的測定，這種酶能水解一種3-羥基吡咯類底物，釋出酚從而與重氮試劑反應(yīng)生成紫紅色化合物。尿干化學(xué)的檢測受到很多因素的影響，當(dāng)與尿沉渣結(jié)果不符合時(shí)，必須進(jìn)行人工鏡檢[9]。高比重尿、淋巴細(xì)胞尿、高葡萄糖（10～20 g/L以上）及室溫較低時(shí)（20 ℃以下）可造成白細(xì)胞測定結(jié)果偏低或假陰性。朗邁UriSed全自動尿液有形成分白細(xì)胞與朗邁LabuMat全自動尿干化學(xué)中白細(xì)胞酯酶呈一定的相關(guān)性，若出現(xiàn)二者不一致的現(xiàn)象均需進(jìn)行人工鏡檢。

朗邁UriSed全自動尿液有形成分分析儀對細(xì)胞自動識別理論是基于人工網(wǎng)絡(luò)自適應(yīng)共振理論[10]，可以逼真地模擬生物神經(jīng)系統(tǒng)，擁有學(xué)過不忘和不斷積累的能力[11]，一般情況下可以很好的識別尿液中的有形成分但是容易受到尿液中鹽類結(jié)晶、酵母菌、滴蟲、精子、上皮細(xì)胞、黏液絲等困擾[12-14]，所以當(dāng)有肉眼可見膿尿、血尿、鹽類結(jié)晶較多的尿液時(shí)必須要鏡檢。另外研究中發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果尿沉渣中白細(xì)胞與干化學(xué)白細(xì)胞脂酶的一致性比較差，分析原因與干化學(xué)檢測的局限性有關(guān)，干化學(xué)法試帶上帶有的化學(xué)物質(zhì)吲哚酚酯僅與尿液中的中性粒細(xì)胞酯酶發(fā)生反應(yīng)而顯色[15]，所以不能檢出淋巴和單核細(xì)胞。尿液中存在大量膿細(xì)胞也會干擾酯酶反應(yīng)，而使干化學(xué)出現(xiàn)陰性。恰恰慢性尿道炎癥、腎移植術(shù)后發(fā)生排斥反應(yīng)的患者尿液中有大量的淋巴細(xì)胞核和單核細(xì)胞，所以在檢測過程中常常干化學(xué)LEU陰性，沉渣中見到大量白細(xì)胞。白細(xì)胞容易受到滴蟲或者細(xì)菌的影響而變形[16-17]，本研究中還發(fā)現(xiàn)尿液中若存在滴蟲，儀器常常將波狀運(yùn)動某一狀態(tài)的滴蟲錯(cuò)誤的識別為白細(xì)胞，沉渣的照片中的白細(xì)胞多模糊，且有變形。此時(shí)需要離心鏡檢以確認(rèn)白細(xì)胞的數(shù)量及是否有滴蟲存在。在研究中還發(fā)現(xiàn)另外一個(gè)現(xiàn)象，同一干化學(xué)條上的色塊在浸入尿液中取出后都會在30S左右發(fā)生顏色的變化，并且一步到位，但是白細(xì)胞的色塊顏色發(fā)生變化要相對長一些，所以有時(shí)沉渣中出現(xiàn)大量白細(xì)胞但是干化學(xué)卻顯示白細(xì)胞酯酶陰性，這一說法還需要進(jìn)一步的研究和比對。

LabuMat全自動尿沉渣分析儀與LabuMat全自動尿液干化學(xué)分析儀在充分發(fā)揮尿沉渣分析儀快速篩查的功能時(shí)，當(dāng)LabuMat全自動尿沉渣分析儀與LabuMat全自動尿液干化學(xué)分析儀檢測紅細(xì)胞/白細(xì)胞的結(jié)果一致時(shí)，完全不用人工鏡檢[18]，但存在其它情況絕對不能忽視顯微鏡檢查的重要性[19-20]，只有兩者密切結(jié)合，才能既快速又準(zhǔn)確的為臨床疾病的診斷和鑒別診斷、療效觀察和健康普查等提供客觀、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。

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（收稿日期：2017-04-12） （本文編輯：鄧朝陽）endprint