呼吸內胚層及第二生心區與小鼠胚胎心動脈端發育關系

李慧超+師亮+楊艷萍

【摘要】 目的：探討呼吸內胚層及第二生心區與小鼠胚胎心動脈端發育的關系。方法：對35例胚齡9～13 d小鼠胚胎心連續石蠟切片應用抗音猬因子（Shh）、抗Ptc1、抗Smo、抗心肌肌球蛋白重鏈（MHC）、抗胰島因子（ISL-1）、抗α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）抗體進行免疫組織化學和免疫熒光化學染色。結果：胚齡9～11 d，呼吸內胚層開始發育，其腹側形成Ptc1陽性的內胚層細胞索，與緊鄰的第二生心區咽前ISL-1陽性間充質細胞形成對稱的錐體形結構，頂端突入動脈囊腔。胚齡12～13 d，隨內胚層細胞索消失，氣管腹側ISL-1陽性間充質細胞數量明顯減少，心包內主動脈和肺動脈分離。結論：發育中的呼吸內胚層可能通過Shh信號通路為第二生心區咽前ISL-1陽性間充質細胞的發育聚集提供位置信息，參與小鼠胚胎心流出道的正常形態發生。

【關鍵詞】 呼吸內胚層； 第二生心區； 小鼠； 免疫組織化學； 免疫熒光

【Abstract】 Objective：To explore the relationship of pulmonary endoderm and the second heart field with development of the distant of the mouse embryonic heart.Method：Serial sections of thirty-five mouse embryos from embryonic day（ED）9 to embryonic day（ED）13 were stained immunohistochemically or immunofluorescently with antibodies against Sonic Hedgehog（Shh），Patched（Ptc1），Smoothened（Smo），myosin heavy chain（MHC），islet 1（ISL-1），α-smooth muscle actin（α-SMA）.Result：From ED9 to ED11，pulmonary endoderm started to develop，and formed a solid endoderm cord with Ptc1 positive expression which was surrounded by ISL-1 positive prepharyngeal mesenchyme in the second heart field projected into the aortic sac.During ED12 to ED13，following the disappearance of endoderm cord，the quantity of ISL-1 positive mesenchyme cells was obviously reduced，aorta and pulmonary artery were totally seprated.Conclusion：The developing pulmonary endoderm probably provides the positional information for the aggregation of ISL-1 positive prepharyngeal mesenchyme in the second heart field to take part in the morphogenesis of the outflow tract in mouse embryonic heart.

【Key words】 Pulmonary endoderm； Second heart field； Mouse； Immunohistochemisty； Immunofluorescence

First-authors address：Changchun Medical College，Changchun 130031，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.29.001

胚胎心流出道的正常發育和分隔保證了機體血液循環的有效進行[1]。近年研究表明，胚胎心流出道的分隔和延長有賴于第二生心區心前體細胞的參與[1-2]。位于咽前胰島因子（ISL-1）是心前體細胞較好的標記蛋白，敲除ISL-1基因小鼠胚胎右心室、流出道缺失[3]。Shh信號通路參與維持第二生心區細胞的存活和增殖，條件性敲除前腸內胚層處Shh信號通路中任一成員，均引起相似的呼吸系統及流出道發育畸形[4-6]，但由于轉基因或敲基因引起的心臟畸形動物多死于胚胎早、中期，對流出道正常發育的關系鮮見報道。本實驗觀察Shh信號通路分子在前腸呼吸內胚層的表達規律，探討其與第二生心區咽前ISL-1陽性間充質的關系，為進一步闡明流出道發育畸形提供一定的形態學基礎。……