AD患者血清Hcy 葉酸及維生素B12與認知功能減退的關系研究

王 聰 張杰文

鄭州大學人民醫院，河南 鄭州 450003

AD患者血清Hcy 葉酸及維生素B12與認知功能減退的關系研究

王 聰 張杰文△

鄭州大學人民醫院，河南 鄭州 450003

目的研究維生素B12和葉酸水平以及同型半胱氨酸是否對阿爾茨海默癥(AD)患者存在潛在影響。方法運用美國國立神經病學、語言障礙和卒中-阿爾茨海默病和相關疾病學會(NINCDS-ADRDA)標準嚴格篩選AD患者95例。從體檢中心選取年齡、性別及受教育程度匹配的無腦血管病、無認知障礙的健康對照組76例。采用化學發光微粒子免疫分析法檢測171例年齡≥50歲的老年癡呆患者血清維生素B12和葉酸水平。采用肝素抗凝的血漿進行循環酶法Hcy測定。探討血清低水平維生素B12和葉酸以及高水平同型半胱氨酸是否是老年癡呆發生的危險因素。認知功能的評價采用目前通用的神經心理測試：中文版簡易精神狀態檢查表(MMSE)。采用Logistic回歸分析評估血清維生素B12、葉酸以及同型半胱氨酸與老年癡呆患病風險的關系。結果171例中153例葉酸正常，其中對照組79例(51.63%)，實驗組74例(43.27%)；124例維生素B12正常，其中對照組60例(48.39%)，實驗組64例(51.61%)；101例同型半胱氨酸正常，其中對照組51例(50.50%)，實驗組50例(49.50%)。作各協變量調整后，AD患者血清維生素B12及葉酸水平以及同型半胱氨酸與CMMES評分無相關性(P>0.05)。但低血清維生素B12水平以及低葉酸水平與AD患病風險相關。結論血清維生素B12和葉酸水平以及同型半胱氨酸水平與AD患者認知功能之間無明顯關聯。低水平維生素B12以及低水平葉酸可能通過某種機制增加AD患病風險，低水平同型半胱氨酸可能通過某種機制降低AD患病風險。

維生素B12；葉酸；同型半胱氨酸；阿爾茨海默癥；認知功能障礙

阿爾茨海默病是發生于老年和老年前期、以進行性認知功能障礙和行為損害為特征的中樞神經系統退行性病變。臨床上表現為記憶障礙、失語、失用、失認、視空間能力損害、抽象思維和計算力損害、人格和行為改變等。流行病學調查顯示，65歲以上老年人AD患者患病率在發達國家為4%～8%，我國為3%～7%，女性高于男性[1]。阿爾茨海默病的危險因素有低教育程度、膳食因素、吸煙、女性雌激素水平降低、高血糖、高膽固醇、高同型半胱氨酸和血管病因素等。同型半胱氨酸又稱高半胱氨酸(homocysteine，Hcy)，是甲硫氨酸的中間代謝產物，在體內由甲硫氨酸轉甲基后生成，有兩種去路，一是Hcy可在胱硫醚縮合酶(CBS)和胱硫醚酶的催化下生成半胱氨酸，需維生素B6的參與，或經巰基氧化結合生成高胱氨酸；另外，Hcy還可在葉酸和維生素B12的輔助作用下再甲基化重新合成甲硫氨酸，此過程需甲硫氨酸合成酶(MS)的催化，且必須有N5-甲基四氫葉酸作為甲基的供體，后者是四氫葉酸經5，10-甲烯四氫葉酸還原酶(MTHFR)催化而產生。Shen等[2]用Meta分析研究68項AD與Hcy關系的文獻發現，Hcy含量增多可能增加AD的發病風險；低水平的維生素B12或葉酸會增加患老年癡呆的患病風險[3-4]。本研究探討葉酸、維生素B12以及同型半胱氨酸與認知損害關系。

1 對象與方法

1．1研究對象AD組：選擇2015-10—2017-01鄭州大學人民醫院神經內科門診及住院患者，均符合 NINCDS-ADRDA的可能診斷標準。男40例，女55例，年齡47～90歲。對照組：同期選擇76例無臨床腦血管病史、無認知功能障礙的志愿者為對照組。男40例，女36例，年齡45～89歲。所有研究對象均排除急慢性腎功能不全或嚴重的肝功能異常、惡性腫瘤、甲狀腺功能障礙、近期有心肌梗死史、近期有感染征象、2周內有服用B族維生素史、目前正在使用抗精神病藥或抗焦慮藥物和其他可能導致維生素B12和葉酸水平變化的治療藥物。

1．2血清維生素B12和葉酸水平以及同型半胱氨酸測定符合入組標準的研究對象，經知情同意后，采用ABBOTT Architect i2000SR全自動免疫檢測系統(美國Abbott公司)及配套試劑[化學發光微粒子免疫分析法(chemiluminescence microparticle immunoassay，CMIA)]測定血清維生素B12和葉酸。使用北京九強公司的循環酶法試劑盒由生化全自動分析儀測血漿同型半胱氨酸水平。

1．3認知功能測定簡明精神狀態量表(MMSE)涵蓋了時間和空間定向力、即刻記憶、注意和計算力、語言復述、視空間能力。評分者不知受試者的血清維生素B12和葉酸水平。

2 結果

2．1正常對照組和AD組比較對171例研究對象人口學特征、認知功能評估及血清維生素B12、葉酸水平以及同型半胱氨酸進行分析顯示，正常對照組和AD組MMSE評分、血清維生素B12水平、葉酸水平及同型半胱氨酸水平差異均有統計學意義(P<0.05)，而2組年齡、性別、受教育年限差異均無統計學意義(P>0.05)。兩兩比較顯示，AD組血清維生素B12水平明顯低于正常對照組(P<0.05)。正常對照組MMSE評分高于AD組(P<0.05)。AD組中血清維生素B12水平、同型半胱氨酸水平與MMSE得分呈正相關，見表1。171例中153例葉酸正常，對照組79例(51.63%)，實驗組74例(43.27%)；124例B12正常，對照組60例(48.39%)，實驗組64例(51.61%)；101例Hcy正常，對照組51例(50.50%)，實驗組50例(49.50%)。所有研究對象的人口學特征和臨床特征見表2。

表1 正常對照組和AD組基線特征分析

表2 正常對照組和AD組基線特征

2．2血清維生素B12和葉酸水平與認知功能的相關性分析采用Pearson相關分析評估各組認知功能測試評分與維生素B12、葉酸、年齡、受教育年限的相關性。作年齡、性別、受教育年限的調整后，AD患者血清維生素B12水平、同型半胱氨酸水平以及葉酸與認知功能測試評分無相關性(P>0.05)。正常對照組血清維生素B12水平同型半胱氨酸水平以及葉酸與認知功能測試評分無相關性(P>0.05)。見表3、表4。

表3 實驗組MMSE評分與年齡、BMI及血清維生素B12、葉酸的相關性

表4 正常對照組MMSE評分與年齡、血清維生素B12、葉酸以及同型半胱氨酸的相關性

2．3血清維生素B12、葉酸以及同型半胱氨酸與老年癡呆患病風險的關系采用Logistic回歸分析評價血清維生素B12、葉酸以及同型半胱氨酸與AD的相關性，所有線性回歸模型均進行年齡、性別、受教育年限調整，AD患者中的結果顯示，1/2/3組的葉酸可作為發病的危險因素(OR>1)，2/3組維生素B12可作為危險因素(OR>1)，2組Hcy(極低含量)可作為保護因素(OR=0.245<1)。見表5、表6。

表5 AD組Logistic回歸分析

表6 AD組3個因素Logistic回歸分析結果

3 討論

AD是最常見的老年癡呆之一，全球有240萬AD患者[5]。流行病學調查顯示，65歲以上老年人AD患者患病率在發達國家為4%～8%，我國為3%～7%，女性高于男性。老年癡呆成為加重國家的養老負擔，縱使世界很多研究所在研究針對性的治療藥物，但至今仍無特效藥物。因此，及時檢測以及預防成為重中之重。有研究表明[6-7]，葉酸、維生素B12、維生素B6對于認知功能是必不可少的[8-9]。葉酸、維生素B12與同型半胱氨酸代謝含量呈負相關。研究表明，同型半胱氨酸的增加可能會引起認知功能障礙[10-11]。同型半胱氨酸在體內的代謝途徑有3條，其中1條是同型半胱氨酸在蛋氨酸合成酶(methionine synthase，MS)及輔酶維生素B12參與下，與5-甲基四氫葉酸合成蛋氨酸和四氫葉酸，而5-甲基四氫葉酸是在亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)催化下還原而來。由于維生素B12是蛋氨酸合成酶的輔酶，葉酸是體內甲基的供體，當兩者缺乏時可導致MTHFR及CBS活性的降低，阻礙蛋氨酸的再生成，從而造成Hcy在體內的蓄積。血清葉酸和維生素B12水平與血漿Hcy水平呈負相關，葉酸和維生素B12水平越低，血漿Hcy水平越高。由于老年人胃酸分泌逐漸減少，吸收維生素B12的能力也逐漸降低，加上其他原因，營養狀況較差也較為常見，且有大量數據顯示維生素B12隨著年齡的增長而減少[12]。因此，有相當比例的老年癡呆患者血清維生素B12水平較低。 本研究顯示，171例對象中7例(4.1%)血清葉酸降低，而AD患者血清葉酸平最低(P<0.05)，171例對象中30例(17.5%)血清維生素B12降低，而AD患者血清維生素B12水平最低(P<0.05)。將線性回歸模型進行年齡、性別、受教育年限和BMI調整，結果顯示，血清維生素B12以及葉酸可作為AD發生的危險因素。本研究結果表明，血清維生素B12和葉酸水平以及同型半胱氨酸與AD的認知功能無明顯相關性，但低水平維生素B12以及低水平葉酸可能會增加老年人群患AD的風險。研究還顯示，維持較低水平同型半胱氨酸水平對延緩認知功能的減退有可能有益。原因可能是由于Hcy的神經毒性作用或是減少了SAM(s-腺苷甲硫氨酸合成酶)的可用性導致大腦組織的低甲基化作用。因此可以適當補充葉酸、維生素B12。葉酸可以從綠葉蔬菜(如花椰菜、甘藍、菠菜)、大豆、豌豆、柑橘類水果和香瓜中攝取。成年人葉酸推薦攝人量(RDA)為400 μg/d，相當于一碗強化早餐。維生素B12可以服用維生素B12補充劑或攝人維生素B12強化食品(包括植物乳或麥片)可補充維生素B12。成年人每天需要維生素B122.4 μg。維生素B12還可以從奶及肉制品中獲取，但由于老年吸收的較少，因此，美國政府推薦，所有50歲以上的中老年人都要服用維生素B12補充劑，素食者或有維生素B12吸收障礙者，不分年齡，都應該服用維生素B12補充劑。然而，由于本研究結果只是回顧性病例對照研究，并不能說明葉酸、維生素B12及同型半胱氨酸與癡呆因果關系，只能說明低劑量葉酸、維生素B12是癡呆發生的危險因素，以及體內較低含量的同型半胱氨酸對于延緩癡呆的進展有可能有用，因此還需更多的前瞻性研究予以證實。

[1] 吳江，賈建平．阿爾茨海默病[M]//神經病學．3版．北京：人民衛生出版社，2016：364．

[2] Shen L，Ji HF．Associations between homocysteine，folicacid，vitamin B12and Alzheimer’s Disease：in sights from meta analyses[J]．J Alzheimer Dis，2015，46(3)：777-790．

[3] Wang HX，Wahlin A，Basun H，et al．Vitamin B(12) and folate in relation to the development of Alzheimer's disease[J]．Neurology，2001，56(9)：1 188-1 194．

[4] Shen L，Ji HF．Associations between Homocysteine，Folic Acid，Vitamin B12and Alzheimer's Disease：Insights from Meta-Analyses[J]．J Alzheimers Dis，2015，46(3)：777-790．

[5] Ballard C，Gauthier S，Corbett A，et al．Alzheimer's disease[J]．Lancet，2011，377(9770)：1 019-1 031．

[6] 蔣莉君，況偉宏．中國老年癡呆患者照料及照料者負擔的研究現狀[J]．四川醫學，2016，37(12)：1 417-1 418．

[7] 封婷，鄭真真．老年人養老負擔和家庭承載力指數研究[J]．人口研究，2015，39(1)：50-62．

[8] De Jager CA，Oulhaj A，Jacoby R，et al．Cognitive and clinical outcomes of lowering homocysteine-lowering B-vitamin treatment in mild cognitive impairment：A randomized controlled trial[J]．Int J Geriatr Psychiatry，2012，27(6)：592-600．

[9] Douaud G，Refsum H，de Jager CA，et al．Preventing Alzheimer's disease—related gray matter atrophy by B-vitamin treatment[J]．Proc Natl Acad Sci USA，2013，110(23)：9 523-9 528．

[10] Seshadri S，Beiser A，Selhub J．Plasma homocysteine as a risk factor for dementia[J]．New Engl J Med，2002，346(7)：476-483．

[11] 李梁蜜，方芳，曹文英，等．血漿同型半胱氨酸水平與老年癡呆的關系及葉酸、維生素B12的干預效果研究[J]．實用臨床醫藥雜志，2016，20(1)：42-44．

[12] Wahlin A，Backman L，Hultdin J，et al．Reference values for serum levels of vitamin B12 and folic acid in a population-based sample of aduils between 35 and 80 years of age[J]．Public Health Nutr，2002，5(3)：505-511．

(收稿 2017-06-27)

責任編輯：夏保軍

CorrelationofcognitiveimpairmentwithvitaminB12andfolicacidandHomocysteineinelderlydementiapatients

WangCong，ZhangJiewen

ThePeople’sHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou450003，China

ObjectiveTo investigate the correlations of vitamin B12and folic acid and homocysteine with Alzheimer’s disease (AD)．MethodsSerum vitamin B12and folic acid levels were determined by chemiluminescence microparticle immunoassay in 95 elderly dementia patients ≥ 50 years old and 76 cognitive normal subjects (normal control group)．The low levels of vitamin B12and folic acid and homocysteine as high-risk factors for AD were analyzed．Cognitive function was evaluated with comprehensive neuropsychological tests，such as Chinese Version of Mini Mental State Examination (CMMSE)．Pearson’s correlation analysis was performed to evaluate the relationship among serum vitamin B12，folic acid，homocysteine，age，education year，and cognitive function in all groups．Logistic regression was used to evaluate the association of vitamin B12，folic acid and homocysteine with AD．ResultsA total 96 patients with AD were determined．There were 153 cases of folic acid in the 171 cases，including 79 in normal group (51.63%)and 74 cases in the experimental group (43.27%)．The normal number of vitamin B12was found in 124 cases，including 60 in normal group (48.39%)，and 64 cases in the experimental group (51.61%)．101 homocysteine was normal．Among them，51 cases (50.50%)and 50 cases (49.50%)were normal．Vitamin B12，folic acid or homocysteine level had no correlation with CMMSE scores after covariates’ adjustments (P>0.05)．Low vitamin B12level and folic acid was correlated with the risk of AD．ConclusionVitamin B12，folic acid and homocysteine are not correlated with cognitive impairment．However，low vitamin B12level and folic acid may be correlated with an increased risk for AD；Low levels of homocysteine may reduce AD risk by some mechanism．

Vitamin B12；Folic acid；Homocysteine；Alzheimer’s disease；Cognitive impairment

R749.1+6

A

1673-5110(2017)19-0043-05

10.3969/j.issn.1673-5110.2017.19.010

△通信作者：張杰文(1965—)，男，教授，主任醫師，碩士、博士生導師。研究方向：癡呆與認知障礙。Email：2864048621@qq.com