高血壓腦出血術(shù)后痰瘀腑實(shí)證血漿代謝組學(xué)的檢測分析

劉 琪 劉建仁

1)廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東 廣州 510405 2)廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405

高血壓腦出血術(shù)后痰瘀腑實(shí)證血漿代謝組學(xué)的檢測分析

劉 琪1)劉建仁2)△

1)廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣東 廣州 510405 2)廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405

目的從代謝組學(xué)層面尋找高血壓腦出血術(shù)后痰瘀腑實(shí)證的本質(zhì)以及通腑瀉熱活血合劑治療作用機(jī)制。方法采用氫譜磁共振(1H-NMR)CPMG脈沖序列檢測12例高血壓腦出血患者的術(shù)前及術(shù)后第1、3、7、12天血漿樣本，每例患者采集5個(gè)血漿樣本，本實(shí)驗(yàn)共收集60個(gè)血樣本，所有患者的術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第3天、術(shù)后第7天、術(shù)后第12天各為1組，分為5組，所有患者術(shù)后第3天開始服用通腑瀉熱合劑。對不同組之間代謝產(chǎn)物含量的變化，采用主成分分析(principal components analysis，PCA)、偏最小二乘判別分析(PLS-discriminant analysis，PLSDA)，對比觀察5組血漿中的磁共振波譜差異情況，分析相應(yīng)的代謝產(chǎn)物積分值變化情況。最終選擇對本次實(shí)驗(yàn)貢獻(xiàn)值最大的代謝物，將此代謝物和自身前后進(jìn)行比對，隨后運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)，對比不同組別之間的血漿代謝物變化差異。結(jié)果患者術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第3天、術(shù)后第7天、術(shù)后第12天中5組血漿代謝譜在對比中出現(xiàn)差異，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，在模式識別和主成份進(jìn)行分析中，結(jié)果表明高血壓腦出血術(shù)后第3天痰瘀腑實(shí)證形成，服用通腑瀉熱合劑前后具有可區(qū)分性、可比較性；術(shù)前組和術(shù)后第1天組患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：丙氨酸、異亮氨酸、α-酮戊二酸、糖蛋白、前列腺素、極低密度脂蛋白。術(shù)后第1天組和術(shù)后第3天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：γ-氨基丁酸、α-酮戊二酸、甜菜堿、絲氨酸、前列腺素E1、脂蛋白；術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：N-乙酰糖蛋白、α-葡糖糖、膽堿、肌醇、亮氨酸、谷氨酰胺。術(shù)后第7天組和術(shù)后第12天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物2個(gè)：N-乙酰糖蛋白、乳酸。結(jié)論當(dāng)高血壓腦出血術(shù)后痰瘀腑實(shí)證形成，服用通腑瀉熱活血合劑可以改善腦出血后患者體內(nèi)脂肪含量，更可以改善血糖代謝，穩(wěn)定細(xì)胞膜等，促進(jìn)已損傷細(xì)胞修復(fù)。

高血壓腦出血；術(shù)后痰瘀腑實(shí)證；代謝組學(xué)

高血壓腦出血痰瘀腑實(shí)證是一種西醫(yī)病與證的結(jié)合模式。代謝組學(xué)在整體研究的同時(shí)可以進(jìn)行精細(xì)測量，這是中醫(yī)證候概念不能從微觀上進(jìn)行解讀且難以突破的關(guān)鍵問題[1]。代謝組學(xué)研究方法為中醫(yī)證候的微觀解釋提供了一種可能的方法。

1 資料與方法

1．1一般資料選取廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院顱腦科2015-07-01—2016-07-01住院病人12例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合高血壓腦出血的西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)(參考《王忠誠神經(jīng)外科學(xué)》“高血壓腦出血”診斷標(biāo)準(zhǔn))；(2)符合中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)(中風(fēng)-中臟腑痰瘀腑實(shí)證)；(3)年齡18～60歲；(4)發(fā)病后24 h入院。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)不符合診斷標(biāo)準(zhǔn)者；(2)外傷性顱內(nèi)血腫；(3)腦血管畸形、動(dòng)脈瘤破裂所致顱內(nèi)血腫；(4)出血量<30 mL或>70 mL；(5)小腦、腦干血腫；(6)凝血機(jī)制障礙；(7)患者入院時(shí)出現(xiàn)生命體征不穩(wěn)定，呼吸功能變緩等癥狀；(8)年齡16～60歲；(9)因個(gè)人原因中途退出者。

1．2研究方法

1．2．1 治療方法：每例患者于術(shù)后第3天在西醫(yī)常規(guī)治療的基礎(chǔ)上鼻飼或口服通腑活血中藥，采用自身前后對比，分析血漿代謝產(chǎn)物的變化。每例患者采血5次(分別為術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第3天、術(shù)后第7天、術(shù)后第12天)。通腑瀉熱活血合劑(廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院顱腦科經(jīng)驗(yàn)方，主要組方：大黃12 g(后下)，芒硝8 g(沖服)，厚樸14 g，黃連12 g，枳殼12 g，黃柏12 g，牛膝10 g，川芎10 g，當(dāng)歸15 g，桃仁15 g，地龍12 g，赤芍15 g，紅花6 g等，加水150 mL，熬制成濃縮液60 mL左右，經(jīng)鼻飼給藥，1次/d，術(shù)后第3天給藥。

1．2．2 試劑和儀器：(1)試劑：氧化氘別例：氘代水重水(Sigma-Aldrichgon公司)，磷酸鹽緩沖液溶液(Sigma-Aldrichgon公司)；(2)所選儀器為BrukerAvance-500 MHz氫譜磁共振波譜檢測儀(由Bruker公司生產(chǎn))和MiniSpinPlus微型高速度離心機(jī)(由德國Eppendorf公司生產(chǎn))。

1．2．3 血漿代謝組學(xué)檢測：12例患者分別于術(shù)前30 min，術(shù)后第1天、第3天、第7天、第15天，抽取肘靜脈血3 mL，肝素鈉抗凝，在4 ℃下4 000 r/min離心10 min。取上清血漿1.5 mL轉(zhuǎn)移至2 mL抗凝EP管中，-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｔ趯?H-NMR譜進(jìn)行采選樣本前，將每一管冷凍儲存的血漿進(jìn)行解凍，隨后各取每一管血漿中的300 μL血漿，將其放置在磁共振測試管(5 mm直徑)中，隨后分別在12支磁共振測試管中添加磷酸溶液，劑量為每0.2 mol/L，pH值為7.4，隨后再添加200 μL和重水50 μL至磁共振管血漿樣品中，充分振蕩混勻。30 min后，行氫譜磁共振檢測(HNMR)，得到1H-NMR譜圖。

1．3數(shù)據(jù)處理磁共振數(shù)據(jù)處理：磁共振圖譜采用MestReNova 5.3.1 進(jìn)行自動(dòng)基線及相位調(diào)整后，以0.02 ppm積分段對化學(xué)位移區(qū)間δ 0.5～8.5 ppm進(jìn)行分段積分，其中δ 4.7～5.15(殘余水峰)不積分。整張譜圖的峰面積歸一到100，最后得到二維數(shù)據(jù)矩陣。多元統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用R語言和SPSS 20.0軟件，通過t-test的P值和PLSDA的VIP值找出相對應(yīng)的差異化學(xué)位移(ppm)。

2 結(jié)果

2．1各組血漿代謝輪廓比較高血壓腦出血術(shù)前、術(shù)后第1天、術(shù)后第3天、術(shù)后第7天、術(shù)后第12天的磁共振波譜分別如圖1所示，其中橫坐標(biāo)是化學(xué)位移，縱坐標(biāo)是圖譜積分值，經(jīng)過對比每一組的波譜代謝物，可以分析每一組波譜代謝物的差異，最終得出對本次實(shí)驗(yàn)影響最大的代謝物。

2．2波譜的主成分分析將以上5組磁共振波譜進(jìn)行主成份分析(即PCA分析)。圖2是對12例患者HICH術(shù)前和術(shù)后第一天所得波譜中第一、二主成份顯示的Sore圖，上圖中的每一個(gè)小點(diǎn)代表的是進(jìn)行測試的血漿樣品。如1-1表示編號為1的一個(gè)患者的術(shù)后第1天血漿樣品，1-0表示編號為1的患者，術(shù)前的血漿樣品。結(jié)果示，主成分分析積分值集中分布于橢圓得分圖的2個(gè)區(qū)域，術(shù)前組位于左邊，術(shù)后第1天位于右邊。2組區(qū)域完全分開，說明術(shù)前和術(shù)后第1天2組血漿在代謝組學(xué)成分上有明顯差異。說明手術(shù)打擊影響代謝物的變化。PLSDA對應(yīng)的第一、二主成分的 Loading 圖，圖中PLSDA的點(diǎn)大部分落坐標(biāo)(0，0)附近，易于發(fā)現(xiàn)差異代謝物。離(0，0)越遠(yuǎn)的點(diǎn)表明其對分類貢獻(xiàn)較大，表明其主成分的相關(guān)性越好，越有可能是實(shí)驗(yàn)研究所需，越集中的點(diǎn)差異越小。PCA-Loding圖中，3.748 12、2.625 31、2.525 06、2.505 01、3.788 22、2.665 41、3.647 87等7個(gè)數(shù)據(jù)化學(xué)位移對應(yīng)的化學(xué)成分對本次實(shí)驗(yàn)影響最大，貢獻(xiàn)值也最大。本研究根據(jù)兩兩t檢驗(yàn)的P值和PLSDA的值在主成分1上的VIP值進(jìn)一步篩選差異標(biāo)記物。如果出現(xiàn)P<0.05，在主成分1上的VIP值>1，也就是我們選出來的差異性位移，就在那個(gè)離(0，0)點(diǎn)比較遠(yuǎn)位置的點(diǎn)，那就很理想。

圖1 各組1H-NMR波譜疊加圖

術(shù)后第1天和術(shù)后第3天2組完全分開，一個(gè)位于左上區(qū)域，一個(gè)位于右下區(qū)域，說明術(shù)后第1天和術(shù)后第3天2組血漿在代謝組學(xué)成分上有明顯差異。PCA-Loding圖中，1.221 8、4.690 48、4.670 43、3.788 22、1.261 9等化學(xué)位移對應(yīng)化學(xué)成分可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果貢獻(xiàn)值最大。

術(shù)后第3天組和術(shù)后第7天組2組區(qū)域不能完全分開，通過P值和VIP值不能篩選出差異性代謝產(chǎn)物，2組血漿在代謝組學(xué)成分上無明顯差異。因是凌晨采血，術(shù)后第7天為服用通腑瀉熱合劑后第4天，受術(shù)后控制出入量、脫水等影響，中藥藥效對血漿代謝物的改變不明顯。見圖4。

圖2 術(shù)前組和術(shù)后第1天組患者血漿PLSDA分析的Score圖、Loading圖

圖3 術(shù)后第1天和術(shù)后第3天患者血漿PLSDA分析的Score圖、Loading圖

術(shù)后第7天組和術(shù)后第7天組2組區(qū)域完全分開，2組血漿在代謝組學(xué)成分上有明顯差異，PCA-Loding圖中，1.302 01、1.261 9、0.860 92、3.788 22、3.748 12等5個(gè)數(shù)據(jù)對本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的貢獻(xiàn)值最大。見圖5。

術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組的主成分的Score圖如圖6所示，術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組2組區(qū)域完全分開，服用通腑瀉熱中藥和服藥后第10天2組血漿在代謝組學(xué)成分上有明顯差異，PCA-Loding圖中，1.302 01、3.768 17、4.670 43、3.788 22、1.261 9等化學(xué)位移對應(yīng)化學(xué)成分可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果貢獻(xiàn)值最大。

圖4 術(shù)后第3天和術(shù)后第7天患者血漿PLSDA分析的Score圖

圖5 術(shù)后第7天和術(shù)后第12天患者血漿PLSDA分析的Score圖、Loading圖

2．3代謝物的含量變化對本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)合代謝物的VIP值和歸一化積分值運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，鑒定歸一化積分和其化學(xué)位移值代表的代謝物差異情況。本次實(shí)驗(yàn)中的代謝物成分鑒定采用人類代謝產(chǎn)物數(shù)據(jù)庫進(jìn)行查閱。從表4中可見，術(shù)前組和術(shù)后第1天組pH患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：丙氨酸、異亮氨酸、α-酮戊二酸、糖蛋白、前列腺素、極低密度脂蛋白。在有效治療的12例患者術(shù)后第1天和術(shù)前相比：丙氨酸水平下降，異亮氨酸、α-酮戊二酸、糖蛋白、前列腺素、極低密度脂蛋白水平上升。

圖6 術(shù)后第3天和術(shù)后第12天患者血漿PLSDA分析的Score圖、Loading圖

表4 術(shù)前組和術(shù)后第1天組差異性代謝物

從表5中可見，術(shù)后第1天組和術(shù)后第3天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：γ-氨基丁酸、α-酮戊二酸、甜菜堿、絲氨酸、前列腺素E1、脂蛋白。12例患者術(shù)后第3天和術(shù)后第1天相比：γ-氨基丁酸水平上升，α-酮戊二酸、甜菜堿、絲氨酸、前列腺素E1、脂蛋白水平下降。

表5 術(shù)后第1天組和術(shù)后第3天組差異性代謝物

從表6中可見，術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物6個(gè)：N-乙酰糖蛋白、α-葡糖糖、膽堿、肌醇、亮氨酸、谷氨酰胺。服用中藥后(術(shù)后第3天至術(shù)后第12天)血漿代謝物變化可見，中藥通腑瀉熱活血合劑的早期應(yīng)用可使得血漿中亮氨酸、肌醇、膽堿(Cho)、谷氨酰胺、α-葡糖糖水平下降、N-乙酰蛋白水平上升。

表6 術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組差異性代謝物

從表7中可見，術(shù)后第7天組和術(shù)后第12天組中患者血漿中差異較大的特異性代謝物2個(gè)：N-乙酰糖蛋白、乳酸。12例患者術(shù)后第12天和術(shù)后第7天相比，乳酸、N-乙酰糖蛋白水平上升。

表7 術(shù)后第7天組和術(shù)后第12天組差異性代謝物

3 討論

本研究所采用的通腑泄熱活血合劑是廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院顱腦科經(jīng)驗(yàn)方，此方生大黃為其主藥，功效：(1)通腑瀉熱消痞：大黃其性大苦大寒，有瀉下攻積、清熱瀉火、蕩漆腸胃之功用。其有效成分蒽醌衍生物，雙蒽醌中有番瀉苷，具有瀉下的功效。(2)瀉熱破結(jié)逐瘀：大黃氣香走竄，入血能通瘀破結(jié)，使瘀、熱、結(jié)一舉而去，大黃中的有效成分大黃素具有明顯的抗水腫作用；大黃多糖可抑制 Ca2+內(nèi)流，阻斷神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi) Ca2+超載，降顱壓作用較為顯著[2]。芒硝具有瀉下攻積、軟散結(jié)之功，配生大黃可增強(qiáng)瀉下通便、通腑降氣的作用。佐以厚樸下氣除滿、枳實(shí)行氣消痞，合而用之，既能消痞除滿又能使胃腸氣機(jī)通降下行以助瀉下通便。活血化瘀中藥在中風(fēng)急性期的應(yīng)用得到了諸多學(xué)者的高度認(rèn)可，認(rèn)為其有促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)、持續(xù)穩(wěn)定降壓、改善血液高黏滯狀態(tài)的作用。因此，本方在大承氣湯的基礎(chǔ)上，加用活血化瘀中藥：桃仁、紅花、牛膝，當(dāng)歸、川芎，辛香溫潤，能養(yǎng)血而行血中之氣而流動(dòng)之，赤芍清熱涼血。風(fēng)邪也是屮風(fēng)的致病及發(fā)展過程中的重要因素，因此加以蟲類藥地龍息風(fēng)通絡(luò)。黃連、黃柏清熱瀉火。此方中諸藥合藥，則可達(dá)上下通利之效。

術(shù)前組和術(shù)后第1天組：丙氨酸參與了機(jī)體的免疫功能，丙氨酸的含量相對減少，說明高血壓腦出血術(shù)后，免疫力相對較低下，推測葡萄糖-丙氨酸循環(huán)存在循環(huán)障礙。異亮氨酸夠更快分解轉(zhuǎn)化為葡萄糖，前列腺素廣泛分布于人腦組織，其能增強(qiáng)腎上腺交感活動(dòng)，通過興奮中樞交感系統(tǒng)對腎上腺的作用使血糖濃度升高。而大腦主要是利用血液提供的葡萄糖供能，異亮氨酸、前列腺素水平的增加，表明手術(shù)應(yīng)激使腦組織處于一種高能耗狀態(tài)。α-酮戊二酸是三羧酸循環(huán)中的另一種關(guān)鍵物質(zhì)，這一結(jié)果提示機(jī)體能量消耗較大，為了滿足機(jī)體需要三羧酸循環(huán)處于較高水平，是一種能量代謝紊亂的狀態(tài)。同時(shí)VLDL水平升高，這些差異代謝物與脂肪酸、糖異生、丙氨酸循環(huán)等多個(gè)代謝通路相關(guān)。

術(shù)后第1天組和術(shù)后第3天組：前列腺素E1是人體血管內(nèi)皮組織上產(chǎn)生的血管舒張劑，它可以刺激腺苷酸環(huán)化酶系統(tǒng)使血管內(nèi)的平滑肌松弛[3]。此外，前列腺素E1更可以改善血管血液循環(huán)，抑制血小板聚集，防止血塊形成。術(shù)后第3天前列腺素E1水平下降，說明腦血管收縮，腦組織處于缺血缺氧狀態(tài)，處于水腫高峰期。谷氨酸是由氨和人體腦細(xì)胞中的α-酮戊二酸結(jié)合而成，而在合成谷氨酸的過程中，需要大量的消耗α-酮戊二酸。α-酮戊二酸主要是三羧酸經(jīng)過循環(huán)后得到的產(chǎn)物，如果α-酮戊二酸減少，那么三羧酸就不能維持正常的循環(huán)代謝運(yùn)行，隨著ATP的減少，也就不能維持人腦正常運(yùn)行，最終會導(dǎo)致人發(fā)生昏迷。術(shù)后第3天患者處于水腫高峰期，出現(xiàn)意識障礙或意識水平下降可能與血液中氨濃度過高、氧利用率下降、產(chǎn)能減少有關(guān)。研究表明，絲氨酸可以提高人的認(rèn)知能力，特別是在學(xué)習(xí)和記憶這一方面，可以提高學(xué)習(xí)能力和記憶力。人大腦中包含著大量的脂質(zhì)組織，磷脂是脂質(zhì)組織的一種，磷脂酰絲氨酸作為磷脂的一種尤其重要，除可提升人的記憶力，更可以提高人的思維分析能力。絲氨酸水平下降，表明患者認(rèn)知能力下降。γ-氨基丁酸有突觸后抑制的作用，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性遞質(zhì)，能夠?qū)构劝彼岬呐d奮性毒性，術(shù)后第3天服用通腑泄熱合劑后γ-氨基丁酸水平上升。

術(shù)后第3天組和術(shù)后第12天組(服用通腑泄熱活血合劑后)：在人腦缺血和再次灌注的環(huán)節(jié)中，神經(jīng)細(xì)胞的死亡是關(guān)鍵環(huán)節(jié)，這一環(huán)節(jié)直接影響患者的預(yù)后。不少研究表明，當(dāng)人腦出現(xiàn)缺血時(shí)，就會出現(xiàn)神經(jīng)功能異常，而伴隨著神經(jīng)功能的異常，人腦釋放的氨基酸谷氨酸就會隨之增多，腦細(xì)胞外的Glu 濃度也隨之上升[4]，Glu 濃度上升之后會導(dǎo)致腦組織進(jìn)一步損傷，由此可知，在腦損傷的這一環(huán)節(jié)中，主要由Glu發(fā)生作用，Glu產(chǎn)生的持久性興奮突觸后電位，最終導(dǎo)致腦神經(jīng)細(xì)胞的死亡[5]。Glu形成的前提物質(zhì)是Glu-谷氨酰胺[6]，而這一前提物質(zhì)主要存在星形膠質(zhì)細(xì)胞中，當(dāng)Glu-谷氨酰胺進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞線粒體后參與氮自由基的合成，最終就形成了Glu[7]。Glu的增加會促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞損傷，因此，過度的水解Glu使腦神經(jīng)細(xì)胞損傷[8]。術(shù)后12 d，服用中藥后9 d，谷氨酰胺水平下降，說明通腑泄熱活血中藥在一定程度上可以阻止星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi) Glu-Gln的形成循環(huán)，最終發(fā)揮保護(hù)腦組織的作用。大量研究表明[9]，下丘腦上的腎上腺皮質(zhì)激素循環(huán)釋放的激素會受到亮氨酸水平控制，研究表明亮氨酸是決定外周脂質(zhì)和能量代謝變化的最終因子。亮氨酸水平下降說明脂質(zhì)代謝水平下降，加之α-葡糖糖水平也下降，說明服用通腑泄熱活血中藥后，能量代謝紊亂狀態(tài)得到有效糾正。

術(shù)后7 d組和術(shù)后12 d組(服用通腑泄熱活血合劑后)：許多年來，乳酸的堆積被認(rèn)為是腦缺血缺氧下下腦組織損傷的主要原因之一，然而近年的研究發(fā)現(xiàn)[10]：乳酸是聯(lián)系腦能量代謝和功能活動(dòng)的重要物質(zhì)，是神經(jīng)元低氧后功能恢復(fù)的必需底物，在腦缺血情況下抑制神經(jīng)元的乳酸攝取導(dǎo)致神經(jīng)元損傷加重。有研究發(fā)現(xiàn)，乳酸在興奮毒性模型中對神經(jīng)元具有重要的保護(hù)作用，與僅有葡萄糖的情況相比，神經(jīng)元在乳酸存在的條件下能夠相對較快地恢復(fù)功能[11-12]。服用通腑泄熱活血中藥后乳酸水平升高，表明中藥可能對神經(jīng)元的能量代謝穩(wěn)態(tài)的維持及神經(jīng)元的生存具有重要意義。

代謝組學(xué)是一種新興的疾病診斷方法，對疾病狀態(tài)下生物化學(xué)途徑的改變有著深入的認(rèn)識。代謝產(chǎn)物在腦血管疾病中起關(guān)鍵作用。本研究中，使用NMR光譜分析患者血清以鑒定潛在的高血壓腦出血繼發(fā)性損害及通腑瀉熱活血合劑的作用標(biāo)記物存在診斷意義。

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(收稿2017-07-07)

責(zé)任編輯：張喜民

DetectionanalysisofPhlegmandStasisFu-organSyndromeaftertreatmentofhypertensivecerebralhemorrhagethroughmetabonomics

LiuQi*，LiuJianren

*GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine，Guangzhou510405，China

ObjectiveTo find out the essence of Phlegm and Stasis Fu-organ Syndrome and the function of mixture for purging diarrhea and activating blood circulation through metabonomics after treatment of hypertensive cerebral hemorrhage．MethodsCPMG sequential detection of hydrogennuclear magnetic resonance(1H-NMR) was applied to test the plasma samples of patients before treatment and one day，seven days and twelve days after treatment of hypertensive cerebral hemorrhage．Five plasma samples were collected from each patient．Sixty plasma samples were collected for this research in total．There were five groups：plasma samples before treatment，one day，three days，seven days and twelve days after treatment．All the patients were asked to take the mixture for purging diarrhea and activating blood circulation．Content changes of metabolite in different groups were analyzed through principal components analysis(PCA) and PLS-discriminant analysis (PLSDA)．NMR difference of the five groups of plasma samples and integral value of relevant metabolite were also analyzed．Metabolite with the greatest contribution for the research was chosen at last．ResultsDifference of plasma metabolization profiling in the five groups was statistically significant with(P<0.05)．During the analysis process of pattern recognition and principal components，it was found that Phlegm and Stasis Fu-organ Syndrome formed three days after treatment．The results were distinguishable and comparable before and after taking mixture for purging diarrhea and activating blood circulation．There were six specific metabolites in the pre-operation group and the group one day after operation．They were alanine，isoleucine，α-oxoglutarate，glycoprotein，prostaglandin and very low density lipoprotein．There were six specific metabolites in the groups one day and three days after operation．They were γ-aminobutyric acid，α-oxoglutarate，betaine，serine，prostaglandin-E1 and lipoprotein．There were also six specific metabolites in the groups three days and twelve days after operation．They were N-glycoprotein，α-glucose，choline，inositol，leucine and glutamine．There were two specific metabolites in the groups seven days and twelve days after operation．They were N-glycoprotein and lactate．ConclusionWhen Phlegm and Stasis Fu-organ Syndrome forms after treatment of hypertensive cerebral hemorrhage，taking mixture for purging diarrhea and activating blood circulation can improve fat content and metabolism of the patients．It can also stabilize patients’ cytomembrane and help injured cells recover．

Hypertension brain hemorrhage；Postoperative Phlegm Stasis；Metabolomics；detection

R743.34

A

1673-5110(2017)19-0010-08

10.3969/j.issn.1673-5110.2017.19.003

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目，編號：2013B021800166

△通信作者，劉建仁(1972—)， 男，醫(yī)學(xué)博士，主任中醫(yī)師。 研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療腦血管疾病的基礎(chǔ)和臨床。Email：liujianren999@163.com