α-硫辛酸聯合青霉胺對TX乳鼠神經元P38 M APK通路的調控作用研究☆

徐陳陳 董健健 程楠 王訓 喻緒恩○☆

α-硫辛酸聯合青霉胺對TX乳鼠神經元P38 M APK通路的調控作用研究☆

徐陳陳*董健健*程楠*王訓*喻緒恩*○☆

目的研究α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)聯合青霉胺(Penicillamine,PCA)對Wilson病(Wilson disease,WD)模型TX乳鼠神經元P38 MAPK通路的調控機制。方法本實驗乳鼠神經元通過原代方法分離培養所得，分為正常對照組、模型組、ALA組、PCA組及聯合組。采用流式細胞儀檢測藥物治療前后活性氧釋放量及JC-I熒光強度的變化；Western blot法檢測經藥物作用后P38絲裂原活化蛋白激酶、細胞色素C、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3蛋白的表達。結果經流式細胞儀檢測結果可知ALA、PCA及聯合用藥均能減少神經元內ROS釋放量且其MFI分別為59.29±1.22、53.19±1.34及52.46±1.23，增進JC-1的熒光強度(P＜0.01)，且同ALA組和PCA組比，聯合組ROS釋放量明顯降低，JC-1的熒光強度顯著增強。 Western blot檢測發現與正常組相比，模型組乳鼠神經元內P38MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白含量顯著增加(P＜0.01)；與模型組相比，LA組、PCA組及聯合組乳鼠神經元內P38 MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白表達水平明顯下降；聯合組P38 MAPK，Cyt C，Caspase 9，Caspase 3蛋白含量較LA組及PCA組減少。結論ALA聯合PCA可促進銅排出，降低高銅誘導的線粒體損傷，降低高銅神經毒性，延緩神經元凋亡，改善WD神經系統損傷癥狀。

細胞凋亡 Wilson病氧化應激 神經毒性

Wilson病(Wilson disease,WD)是一種表現為銅沉積于肝腦等器官和組織的遺傳性疾病。本課題單位2015年在對2695例WD患者統計中發現以神經系統癥狀首發的占56.33%，且多數患者在病程后期都會出現一定程度的神經損害，給患者生活的各個方面帶來了非常不利的影響[1]。本研究通過流式細胞儀及Western blot技術觀察線……