賴氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內乳脂肪合成相關基因和蛋白表達的影響

陳 璐 趙艷麗 郭曉宇 史彬林 閆素梅

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

賴氨酸對奶牛乳腺上皮細胞內乳脂肪合成相關基因和蛋白表達的影響

陳 璐 趙艷麗 郭曉宇 史彬林 閆素梅*

(內蒙古農業大學動物科學學院，呼和浩特010018)

本試驗旨在研究賴氨酸(Lys)對奶牛乳腺上皮細胞(BMECs)內乳脂肪合成相關基因和蛋白表達的影響，探討Lys影響乳脂肪合成的機理。將第3代BMECs隨機分為6組，每組6個重復,每個重復1個培養孔。各組培養基中Lys的濃度分別為0.5(基礎培養基，對照)、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，37 ℃、5% CO2培養48 h后測定BMECs甘油三酯(TAG)含量、乳脂肪合成相關基因和蛋白的表達量。結果表明：BMECs內TAG含量(P=0.013)以及脂肪酸結合蛋白3(FABP3，P=0.001)、脂蛋白脂酶(LPL，P=0.096)、脂肪酸合成酶(FASN，P=0.003)、乙酰甘油磷酸脂酰轉移酶6(AGPAT6，P=0.038)和甘油-3-磷酸酰基轉移酶(GPAM，P=0.022)基因表達量對Lys呈顯著或趨于顯著的濃度依賴效應。FABP3基因表達量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L組和LPL基因表達量以1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L組顯著高于0.5 mmol/L組(P<0.05)；FASN基因表達量以2.0 mmol/L組最高，顯著高于16.0 mmol/L組(P<0.05)；硬脂酰輔酶A去飽和酶1(SCD1)基因表達量以2.0、4.0 mmol/L組顯著高于其他組(P<0.05)；磷脂酸磷酸酯酶1(LPIN1)、嗜乳脂蛋白亞家族1成員1(BTN1A1)和黃嘌呤脫氫酶(XDH)基因表達量均以1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L組顯著高于0.5 mmol/L組(P<0.05)；過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)基因及蛋白表達量均以2.0、4.0 mmol/L組顯著高于0.5和8.0、16.0 mmol/L組(P<0.05)；固醇調節元件結合蛋白1(SREBP1)基因表達量以1.0、2.0、4.0 mmol/L組顯著高于其他組(P<0.05)，蛋白表達量以1.0 mmol/L組顯著高于其他組(P<0.05)。但高濃度Lys抑制AGPAT6和GPAM的基因表達，AGPAT6基因表達量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L組顯著低于0.5、1.0 mmol/L組(P<0.05)，GPAM基因表達量以16.0 mmol/L組顯著低于0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L組(P<0.05)。可見，Lys對BMECs的乳脂肪合成具有顯著的促進效果，但高濃度的Lys抑制了乳脂肪合成相關基因的表達。本試驗條件下，培養基中Lys適宜濃度為2.0～4.0 mmol/L。

奶牛；乳腺上皮細胞；賴氨酸；乳脂肪

乳脂肪是牛奶的主要成分，是評價牛奶質量的重要指標之一。氨基酸(AA)是乳蛋白合成的重要前體物，但AA在影響乳蛋白合成的同時，也影響著乳脂肪合成與組成[1]。因此，深入研究AA對乳脂肪合成的影響及機理，對調控乳腺內乳成分的合成和改善乳品質具有重要意義。賴氨酸(Lys)是動物的必需氨基酸，Giallongo等[2]向奶牛灌注過瘤胃賴氨酸(RPLys)后發現，Lys在促進乳蛋白合成的同時，對乳脂肪的合成具有促進效果。Xu等[3]研究發現，向泌乳母豬飼喂Lys和纈氨酸(Val)后，適宜的Lys和Val比例能夠使母豬背部脂肪損失降到最低，說明Lys和Val能夠影響乳脂肪的合成。……