郭春利 丹 妮 曹琪娜 哈斯額爾頓 敖長金
(內蒙古農業大學動物科學學院,呼和浩特010018)
蛋氨酸三肽對奶牛乳腺上皮細胞酪蛋白和小肽轉運載體基因表達量的影響
郭春利 丹 妮 曹琪娜 哈斯額爾頓 敖長金*
(內蒙古農業大學動物科學學院,呼和浩特010018)
本試驗旨在研究蛋氨酸三肽(Met-Met-Met)對奶牛乳腺上皮細胞(BMECs)酪蛋白和小肽轉運載體基因表達量的影響。采用酶消化法培養的第3代奶牛乳腺上皮細胞為模型,各處理在培養基中分別添加0(對照)、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽,每個處理5個重復,每個重復1個培養孔,分別培養細胞24、48和72 h,檢測奶牛乳腺上皮細胞的相對增殖率,整體試驗重復2次,確定最佳培養時間;各處理在培養基中分別添加0(對照)、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽,每個處理3個重復,每個重復1個培養孔,以最佳培養時間培養,用實時定量PCR法檢測酪蛋白基因的表達量,確定適宜蛋氨酸三肽濃度,整體試驗重復3次;以最佳培養時間和適宜蛋氨酸三肽濃度培養細胞,以未添加蛋氨酸三肽的培養基為對照,每個處理3個重復,每個重復1個培養孔,測定小肽轉運載體基因的表達量,整體試驗重復3次。結果表明:在培養基中添加蛋氨酸三肽培養奶牛乳腺上皮細胞24 h時,相對增殖率最高;培養基中加入60 μg/mL的蛋氨酸三肽培養細胞24 h,αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的基因表達量最高,同時發現奶牛乳腺上皮細胞中小肽轉運載體1和小肽轉運載體2基因表達量顯著高于對照處理(P<0.05)。綜上所述,培養基中添加60 μg/mL的蛋氨酸三肽能夠提高奶牛乳腺上皮細胞酪蛋白和肽轉運載體基因的表達量。
蛋氨酸三肽;奶牛乳腺上皮細胞;……