多發性肌炎/皮肌炎患者血清中外泌體的分離鑒定*

張愛燕，陳程，吳曉丹，任天麗，顧兵，黃紅宇，韓志君，高明珠

(1.徐州醫科大學醫學技術學院，江蘇徐州 221004；2.南京醫科大學附屬無錫第二人民醫院a.檢驗科，b.風濕科，江蘇無錫 214002)

·液體活檢與臨床實驗研究·

多發性肌炎/皮肌炎患者血清中外泌體的分離鑒定*

張愛燕1，陳程1，吳曉丹2a，任天麗2b，顧兵1，黃紅宇2a，韓志君2a，高明珠2a

(1.徐州醫科大學醫學技術學院，江蘇徐州 221004；2.南京醫科大學附屬無錫第二人民醫院a.檢驗科，b.風濕科，江蘇無錫 214002)

目的 從多發性肌炎/皮肌炎(polymyositis/dermatomyositis，PM/DM)患者外周血血清中分離鑒定外泌體(exosome)，并進行初步的蛋白質研究。方法 用ExoQuickTM試劑盒分離純化PM/DM患者血清exosome；透射電鏡觀察其形態特征，Nanosight可視型納米顆粒分析儀檢測粒徑大小分布情況；western blot鑒定exosome的表面標志物CD9，CD81，Flotillin-2；BCA法對其所攜帶的蛋白質進行定量分析；十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)初步分析其蛋白質組分。結果 透射電鏡下患者血清exosome呈圓形或橢圓形膜性小囊泡，直徑分布范圍92±67 nm；western blot結果表明，PM/DM血清來源的exosome存在表面標志物CD9、CD81、Flotillin-2；BCA法測定PM/DM患者exosome總蛋白濃度為14.68(6.00，32.55)μg/μL，健康組exosome總蛋白濃度為14.09(8.00，23.28)μg/μL,SDS-PAGE顯示兩組血清exosome均在Mr(×103)為55～70處有高豐度蛋白質富集，在Mr(×103)為40～55處存在差異條帶。結論 成功從PM/DM患者的外周血中分離出血清exosome,并為尋找差異蛋白質提供實驗依據。

多發性肌炎/皮肌炎；外泌體；分離；鑒定

多發性肌炎/皮肌炎(polymyositis/dermatomyositis，PM/DM)是一種自身免疫性結締組織疾病，目前已知的肌炎自身抗體陽性率均不高，最具特異性的抗Jo-1抗體陽性率為20%～30%，其他抗合成酶抗體更低[1]。臨床上經常將早期DM誤診為接觸性皮炎或其他皮炎?！?br>