大鼠原代腦微血管內皮細胞氧糖剝奪/復氧模型中內參基因的選擇*

朱紅艷，牛華，符浩，鄭永欽，孟強

(1.昆明理工大學附屬醫院檢驗科，昆明 650032；2.云南省第一人民醫院 a.檢驗科，b.神經內科，c.臨床基礎研究所，昆明 650032；3.昆明理工大學醫學院，昆明 650032)

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大鼠原代腦微血管內皮細胞氧糖剝奪/復氧模型中內參基因的選擇*

朱紅艷1,2a,3，牛華2a，符浩2b，鄭永欽2c，孟強2b

(1.昆明理工大學附屬醫院檢驗科，昆明 650032；2.云南省第一人民醫院 a.檢驗科，b.神經內科，c.臨床基礎研究所，昆明 650032；3.昆明理工大學醫學院，昆明 650032)

目的 篩選大鼠原代腦微血管內皮細胞氧糖剝奪/復氧(OGD/R)模型中合適的內參基因。方法 實時熒光定量-聚合酶鏈反應(qRT-PCR)檢測3種常用管家基因：3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)、β-肌動蛋白(ACTB)、核糖體蛋白L13A(RPL13A)在大鼠原代腦微血管內皮細胞中的表達水平；并采用GeNorm程序分析得到最穩定的內參基因。結果RPL13A、GAPDH、ACTB基因表達穩定度的平均值(M值)分別為0.590、0.570、0.397。結論 在大鼠原代腦微血管內皮細胞OGD/R模型中表達最不穩定的內參基因是RPL13A，最穩定內參基因是ACTB。

內參基因；GeNorm程序；實時熒光定量PCR；氧糖剝奪/復氧模型；腦微血管內皮細胞

實時熒光定量PCR技術(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)是分子生物學和細胞生物學中廣泛用來檢測基因表達的一種常用方法。但是在實際研究過程中，由于易受到細胞數量、標本大小、不同實驗條件的影響，必須使用內參基因進行校正才能獲得更為真實可信的結果。由于管家基因在不同的物種，不同組織和不同實驗條件下的表達也具有特異性，其表達的穩定性是相對的。因此，研究者需要根據自己的樣品類型和實驗條件選擇合適的管家基因作為內參基因。……