納米金探針液相雜交法檢測(cè)核酸序列依賴擴(kuò)增產(chǎn)物診斷侵襲性曲霉病*

吳文耀,華若伊,杜麗,蒲清泉,嚴(yán)佳,楊蜜,何云燕,夏云

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400016；2.重慶市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400016)

·臨床檢驗(yàn)技術(shù)研究·

納米金探針液相雜交法檢測(cè)核酸序列依賴擴(kuò)增產(chǎn)物診斷侵襲性曲霉病*

吳文耀1,華若伊1,杜麗1,蒲清泉1,嚴(yán)佳1,楊蜜1,何云燕2,夏云1

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400016；2.重慶市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400016)

目的 建立納米金探針液相雜交法檢測(cè)核酸序列依賴擴(kuò)增(nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)產(chǎn)物，用于快速診斷侵襲性曲霉病(IA)。方法 采用NASBA擴(kuò)增曲霉菌屬特異性18S rRNA保守序列，擴(kuò)增產(chǎn)物與5′端經(jīng)巰基化俢飾的特異性納米金探針進(jìn)行液相雜交，用該法檢測(cè)106例臨床血液標(biāo)本(14例確診，32例擬診，60例未感染IA),并與GM試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行比較以評(píng)價(jià)該方法的準(zhǔn)確性。結(jié)果 納米金探針只與曲霉菌屬菌株的NASBA產(chǎn)物出現(xiàn)陽(yáng)性雜交反應(yīng)，而其他非曲霉菌均為陰性。NASBA-納米金液相雜交法檢測(cè)106例臨床標(biāo)本的敏感性和特異性分別為82.61%(38/46)、81.67%(49/60),ROC曲線下面積(AUCROC)為0.890。GM試驗(yàn)檢測(cè)的敏感性和特異性分別為56.52%(26/46)和83.33%(50/60)，AUCROC為0.723。結(jié)論 NASBA-納米金液相雜交技術(shù)檢測(cè)曲霉菌感染具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn)，適合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)開(kāi)展。

核酸序列依賴擴(kuò)增；侵襲性曲霉病；曲霉菌；納米金探針

侵襲性曲霉病(Invasive aspergillosis,IA)是一種嚴(yán)重的系統(tǒng)性真菌感染，特別是近年來(lái)臨床上廣泛使用免疫抑制劑、細(xì)胞毒藥物及化療藥物，使其在免疫抑制或者免疫低下患者中的發(fā)病率和病死率明顯上升[1-2]。分子生物學(xué)檢測(cè)較傳統(tǒng)的培養(yǎng)和涂片等方法具有更高的準(zhǔn)確性，但因人員和設(shè)備要求等原因臨床應(yīng)用較少。……