腸道病毒71型激活人橫紋肌肉瘤細胞中JNK1/2信號轉導通路*

許超，彭陽，史偉峰

(蘇州大學附屬第三醫(yī)院檢驗科，江蘇常州 213003)

·研究生園地·

腸道病毒71型激活人橫紋肌肉瘤細胞中JNK1/2信號轉導通路*

許超，彭陽，史偉峰

(蘇州大學附屬第三醫(yī)院檢驗科，江蘇常州 213003)

目的 探討c-Jun N端激酶(JNK)信號轉導通路在腸道病毒71型(EV71)感染中的作用。方法 臺盼藍染色法檢測不同濃度抑制劑SP600125對人橫紋肌肉瘤細胞(RD)活性的影響；實時熒光定量PCR及western blot檢測EV71感染RD細胞后VP1 mRNA及蛋白質(zhì)的表達水平；western blot檢測JNK1/2、c-Fos、c-Jun蛋白及其磷酸化水平，并分析JNK1/2抑制劑SP600125對EV71復制及JNK1/2信號通路的影響。結果 臺盼藍染色結果表明，與空白對照組比較，5和10 μmol/L實驗組存活率差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)，而20 μmol/L抑制劑組細胞存活率明顯降低(P<0.05)；實時熒光定量PCR及western blot結果表明，與對照組相比，實驗組在EV71感染RD細胞8 h后，其VP1 mRNA及蛋白質(zhì)的表達水平均明顯下降(P均<0.01)。此外，western blot檢測結果證實EV71感染RD細胞后，其JNK1/2、c-Fos和c-Jun的蛋白質(zhì)磷酸化水平均明顯升高(P均<0.05)。而經(jīng)抑制劑SP600125處理可明顯下調(diào)其JNK1/2、c-Fos、c-Jun磷酸化水平(P均<0.05)。結論 JNK1/2信號通路可被 EV71感染有效激活，并與EV71復制有關。

JNK1/2信號通路；腸道病毒71型；人橫紋肌肉瘤細胞

腸道病毒71型(EV71)感染嚴重者可引起無菌性腦炎、腦膜腦炎、腦干腦炎、脊髓灰質(zhì)炎樣麻痹、心肌炎和肺水腫等多種與神經(jīng)系統(tǒng)相關的疾病，重癥患者常導致死亡[1]。研究發(fā)現(xiàn)[2]，JNK信號通路在介導多種胞外刺激誘導的細胞炎癥、應激、凋亡、周期和生長等多種生理和病理過程中具有重要作用。EV71感染細胞后可誘導細胞凋亡，但是在不同的宿主細胞中，其誘導細胞凋亡的機制各不相同[3]。人橫紋肌肉瘤(RD)細胞是EV71的易感細胞，主要用于EV71病毒的擴增。目前，JNK信號通路激活與EV71感染性疾病的發(fā)生關系密切，但其機制仍不清楚。本研究通過用JNK特異性抑制劑SP600125阻斷細胞信號通路，觀察JNK信號通路中蛋白質(zhì)分子的活性變化及VP1蛋白(病毒復制指標)在RD細胞中的表達水平，進一步探討RD細胞中JNK信號通路活化在EV71復制中的作用，以期為相關的臨床應用提供實驗依據(jù)。