ELISA定量檢測抗dsDNA抗體試劑盒性能驗證方法的探討

周暉 ，江楚文，方偉，梁敏文，黃錦維 ，侯鐵英

(廣東省人民醫(yī)院廣東省醫(yī)學科學院a.檢驗科，b.廣東省臨床檢驗中心，廣州 510080)

·質量管理研究·

ELISA定量檢測抗dsDNA抗體試劑盒性能驗證方法的探討

周暉a，江楚文b，方偉a，梁敏文a，黃錦維a，侯鐵英a

(廣東省人民醫(yī)院廣東省醫(yī)學科學院a.檢驗科，b.廣東省臨床檢驗中心，廣州 510080)

目的 探討ELISA定量檢測抗雙鏈DNA抗體(下簡稱抗dsDNA抗體)試劑盒的性能驗證方法。方法 依據美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)批準的EP15-A2文件方法驗證精密度。通過檢測過往室間質量評價(external quality assessment，EQA)質評物、與比較試劑進行比較、回收試驗等3種方法驗證準確度。通過檢測空白樣本驗證檢測低限(lower limit of detection, LLD)。通過《CNAS-CL39：醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床免疫學檢驗領域的應用說明》、CLSI C28-A3C文件提供的方法驗證臨界值。通過改良的Doumas法驗證線性范圍。結果 實測批內、批間變異系數均小于廠家聲稱的變異系數或按EP15-A2公式計算的驗證值。檢測EQA質評物陰性符合率為98.4%(63/64)，陽性符合率為100%(20/20)，總符合率為98.8%(83/84)。與比較試劑的陰性符合率為91.2%(52/57)，陽性符合率為87.0%(40/46)，總符合率為89.3%(92/103)，Kappa值為0.783(P=0.062)，兩種試劑具有優(yōu)秀的一致性。平均回收率為99.65%。3種方法驗證準確性均通過。實測LLD為0.5 IU/mL，低于廠家聲稱的1 IU/mL。按CNAS-CL39方法，實測的臨界值為18.51 IU/mL，與說明書建議的20 IU/mL接近。按C28-A3C方法，臨界值驗證也通過。線性回歸方程為Y=0.978 8X-3.125 4，r2為0.996 1，截距項-3.125 4與0差異無統(tǒng)計學意義(t=-0.772，P=0.483)。線性范圍是1.6～212.5 IU/mL，與廠家聲明一致，線性驗證通過。結論 候選抗ds-DNA抗體試劑盒的精密度、準確度、LLD、臨界值、線性范圍與廠家的聲明一致，能滿足臨床診斷與治療的需要。……