張 智 尹文哲 雅 男 馬建章
(1.東北林業大學林學院,哈爾濱150040;2.哈爾濱醫科大學附屬第二醫院,哈爾濱150086;3.東北林業大學野生動物資源學院,哈爾濱150040)
大熊貓糞便中纖維素降解菌的篩選及其產酶條件的優化
張 智1尹文哲2*雅 男1馬建章3**
(1.東北林業大學林學院,哈爾濱150040;2.哈爾濱醫科大學附屬第二醫院,哈爾濱150086;3.東北林業大學野生動物資源學院,哈爾濱150040)
本試驗旨在從大熊貓糞便中篩選出能夠降解纖維素的菌株,并對該菌株進行鑒定和產酶條件的優化。利用羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)為唯一碳源的培養基,結合碘液染色法、濾紙分解試驗和纖維素酶活力測定,從大熊貓糞便中篩選得到1株纖維素降解菌DL。結合形態學觀察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,初步鑒定該菌株為PaenibacilluscookiiLZ033,它是一種產芽孢且好氧的革蘭氏陽性菌。為確定菌株DL的最佳產酶條件,選取培養基初始pH、培養溫度、搖床轉速以及裝液量4個因素,在單因素試驗結果的基礎上,利用正交試驗,確定菌株DL的最佳產酶條件為培養基初始pH為6、培養溫度為35 ℃、搖床轉速為125 r/min、250 mL三角瓶裝液量為100 mL,在此條件下纖維素酶活力(以濾紙酶活力表示)為102.3 U/mL。
大熊貓糞便;纖維素降解菌;產酶條件
大熊貓是我國特有的珍稀動物,1984年被列入世界10種瀕危物種之一[1-2]。10月齡的亞成年大熊貓食性轉變為以竹子為主的高纖維食物[3],每只成年大熊貓每日進食竹子量可達12~38 kg[4],大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素[5]。大熊貓的消化系統屬……