miR-21在人骨肉瘤細胞系U2OS體外侵襲中的作用及其機制

呂晨，陳鑫，朱雄白，林文軍，王路，黃正湘，楊勝武

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 骨科，浙江 溫州 325015）

·論 著·

miR-21在人骨肉瘤細胞系U2OS體外侵襲中的作用及其機制

呂晨，陳鑫，朱雄白，林文軍，王路，黃正湘，楊勝武

（溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 骨科，浙江 溫州 325015）

目的：探討miR-21在人骨肉瘤細胞系U2OS體外侵襲中的作用及其機制。方法：培養(yǎng)人正常成骨細胞系hFOB 1.19和人骨肉瘤細胞系U2OS，通過實時熒光定量PCR（qRT-PCR）比較2組細胞miR-21的表達差異。通過miR-21-up慢病毒感染U2OS細胞，qRT-PCR檢測感染前后U2OS細胞中miR-21的表達變化。Transwell侵襲實驗檢測miR-21對U2OS細胞侵襲的影響，并通過Western blot檢測驗證在U2OS細胞中miR-21對于靶基因PTEN是否具有調(diào)控作用及miR-21對U2OS細胞中侵襲相關(guān)蛋白基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-2、MMP-9表達的影響。結(jié)果：qRT-PCR結(jié)果表明miR-21在骨肉瘤細胞系U2OS中高表達（P＜0.05）。Transwell檢測結(jié)果表明上調(diào)miR-21的表達能夠明顯促進U2OS細胞的侵襲（P＜0.05）。Western blot檢測表明PTEN在骨肉瘤細胞中低表達，且與miR-21表達呈負相關(guān)（P＜0.05）。miR-21可促進侵襲相關(guān)蛋白MMP-2、MMP-9的表達（P＜0.05）。結(jié)論：miR-21可通過抑制PTEN蛋白的表達，進而促進侵襲相關(guān)蛋白MMP-2、MMP-9的表達，促進人骨肉瘤細胞系U2OS的侵襲。

miR-21；骨肉瘤；PTEN；基質(zhì)金屬蛋白酶；侵襲

骨肉瘤是一種好發(fā)于兒童和青少年的骨原發(fā)性惡性腫瘤，約占兒科腫瘤的5%[1]，男性發(fā)病率略高于女性。骨肉瘤好發(fā)于長管狀骨的干骺端，以股骨遠端和脛骨近端最多見。骨肉瘤惡性程度高，預(yù)后極差。近年來，隨著輔助檢查和手術(shù)技術(shù)的提高，特別是新的化療藥物的使用，骨肉瘤5年生存率從20%提高到70%。然而，由于骨肉瘤早期就可出現(xiàn)肺部轉(zhuǎn)移，臨床單純骨肉瘤截肢術(shù)后患者的5年生存率仍然不容樂觀[2-3]。……