單核細胞增生性李斯特菌inlA和inlB基因缺失菌株的構建

劉武康， 李 森， 陳國薇， 羅 勤， 吳 嫚， 丁承超， 謝曼曼， 劉 箐 *

(1.上海理工大學 醫(yī)療器械與食品學院，上海 200093；2.華中師范大學 生命科學學院，湖北 武漢 430079)

單核細胞增生性李斯特菌inlA和inlB基因缺失菌株的構建

劉武康1， 李 森1， 陳國薇1， 羅 勤2， 吳 嫚1， 丁承超1， 謝曼曼1， 劉 箐1*

(1.上海理工大學 醫(yī)療器械與食品學院，上海 200093；2.華中師范大學 生命科學學院，湖北 武漢 430079)

單核細胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes，LM)是人畜共患的食源性致病菌，其對惡劣環(huán)境有較強的抵抗力，廣泛存在于各種食品加工環(huán)境，容易引起嚴重的食品安全問題。LM是一種胞內(nèi)寄生菌，其毒力因子內(nèi)化素A(internalin A，InlA)和內(nèi)化素B(internalin B，InlB)被認為在LM穿透宿主屏障、入侵宿主細胞以及胞間傳播等過程中起到重要作用。本文利用同源重組法將LM野生菌株EGDe的inlA和inlB基因的敲除，對inlA和inlB基因缺失菌株的基本生物學特性進行研究，并運用RealTime-PCR監(jiān)測LM的毒力基因表達。實驗結果表明，基因的缺失對突變菌株的生長以及對環(huán)境中的氯化鈉(NaCl)和乙醇(EtOH)的耐受能力沒有影響，但多個毒力基因的表達量明顯下降。該缺失菌株的構建為進一步研究InlA和InlB在LM入侵宿主細胞過程中的具體功能提供了重要材料。

單核細胞增生性李斯特菌；內(nèi)化素A；內(nèi)化素B；基因敲除；RealTime-PCR

單核細胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes，LM)是一種革蘭陽性、腐生的人畜共患食源性致病菌，在土壤和腐敗植被中大量分布[1]。感染LM的患者致死率可達20%～30%，死亡病例中以兒童、老人、孕婦等居多，因此LM是毒力最強的食源性致病菌之一[2]。LM對外界生存環(huán)境……