牛樟芝非核糖體多肽合成酶基因(AcNRPS)的克隆與鑒定

原曉龍， 胡唐閣然， 趙 能, 陳 劍， 陳中華, 王 娟， 楊宇明， 王 毅 *

(1.云南省林業(yè)科學院 云南省森林植物培育與開發(fā)利用重點實驗室 國家林業(yè)局云南珍稀瀕特森林植物保護和繁育重點實驗室，云南昆明 650204；2.中國科學院昆明植物研究所 中國野生生物種質(zhì)資源庫，云南 昆明 650201;3.中國科學院大學,北京 100049)

牛樟芝非核糖體多肽合成酶基因(AcNRPS)的克隆與鑒定

原曉龍1， 胡唐閣然2，3， 趙 能1, 陳 劍1， 陳中華1, 王 娟1， 楊宇明1， 王 毅1*

(1.云南省林業(yè)科學院 云南省森林植物培育與開發(fā)利用重點實驗室 國家林業(yè)局云南珍稀瀕特森林植物保護和繁育重點實驗室，云南昆明 650204；2.中國科學院昆明植物研究所 中國野生生物種質(zhì)資源庫，云南 昆明 650201;3.中國科學院大學,北京 100049)

膠霉毒素屬于真菌天然次生代謝產(chǎn)物epipolythiodioxopiperazine (ETP)家族，具有免疫抑制劑、抗真菌等多種生物活性，是由非核糖體多肽合成酶(NRPSs)催化合成。從牛樟芝(Antrodiacamphorata)基因組中挖掘出非核糖體多肽合成酶基因(AcNRPS，NCBI登錄號為KX430967)，克隆獲取其全長cDNA，并對其進行生物信息學分析和表達譜分析。結果顯示AcNRPS基因cDNA全長6 687 bp；與其DNA序列比對發(fā)現(xiàn)AcNRPS基因含有12 個內(nèi)含子；其開放閱讀框編碼2 229 個氨基酸殘基，BLAST比對發(fā)現(xiàn)其含有2 個A-C-T結構域，底物需2 個氨基酸；系統(tǒng)發(fā)育樹結果顯示AcNRPS與其他合成產(chǎn)物為膠霉毒素的NRPS基因聚為一類，其可合成膠霉毒素類化合物；表達譜分析顯示，以葡萄糖和土豆蛋白胨作為碳、氮源的培養(yǎng)基能夠有效促進牛樟芝NRPS基因的表達。

牛樟芝； 非核糖體多肽合成酶(NRPSs)； 克隆； 表達

微……