重組鵝β-防御素7蛋白的原核表達及其生物學特性分析

高夢瑩 徐倩倩 張婷婷 陳玉秋 趙文鈞 齊甜銘 馬得瑩

(東北農業大學動物科學技術學院，哈爾濱150030)

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重組鵝β-防御素7蛋白的原核表達及其生物學特性分析

高夢瑩 徐倩倩 張婷婷 陳玉秋 趙文鈞 齊甜銘 馬得瑩*

(東北農業大學動物科學技術學院，哈爾濱150030)

為探討鵝β-防御素7(AvBD7)的生物學特性，將鵝AvBD7基因亞克隆到大腸桿菌原核表達載體pProEX HTa的EcoRⅠ和XhoⅠ雙酶切位點上，構建重組表達質粒pProEX-AvBD7，將重組質粒轉化到大腸桿菌Rosetta感受態細胞中，用異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)對其菌液進行誘導表達。經N-三(羥甲基)甲基甘氨酸十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(Tricine-SDS-PAGE)分析，該重組蛋白大小為10～15ku，與預期大小結果一致。重組鵝AvBD7蛋白純化后，通過菌落計數的方法測定其體外抗大腸桿菌、雞白痢沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、四聯球菌、枯草芽孢桿菌等抑菌活性，鹽離子濃度對其抗菌活性的影響及其對雞紅細胞的溶血活性。結果顯示，重組鵝AvBD7蛋白對所測定的5種細菌均有顯著抗菌活性(P<0.05)，且其抑菌活性隨蛋白濃度的增加而增強。高濃度鹽離子(150mmol/L)顯著抑制重組鵝AvBD7蛋白的抗菌活性(P<0.05)。重組鵝AvBD7蛋白對雞紅細胞沒有溶血活性(P>0.05)。由此可見，重組鵝AvBD7蛋白具有廣譜抗菌活性，高濃度鹽離子顯著降低其抗菌活性，且該重組蛋白不具有溶血活性。

鵝β-防御素7；重組蛋白；抗菌活性

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