鹿茸的心肌保護作用與M受體的相關性研究

劉克敏，孫藝平，王珂萌，張冬梅，戴淑芳，朱 亮，傅 雷

(大連醫科大學基礎醫學院，遼寧大連 116044)

?

·經驗交流·

鹿茸的心肌保護作用與M受體的相關性研究

劉克敏，孫藝平，王珂萌，張冬梅，戴淑芳，朱 亮，傅 雷△

(大連醫科大學基礎醫學院，遼寧大連 116044)

目的 應用阿托品工具藥觀察鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮雙向調節的保護作用。方法 采用斯氏法制備離體蟾蜍心臟灌流標本,在低鈣或高鈣狀態下，在灌流鹿茸溶液前或后灌流阿托品溶液，應用B-420F生物機能實驗系統記錄離體蟾蜍心肌收縮曲線，并進行心肌收縮力的統計學分析。結果 在低鈣條件下,灌流阿托品(濃度為10 mg/L)時的心肌收縮力與低鈣時比較明顯增加(P<0.05)，先灌流阿托品溶液再灌流鹿茸溶液(濃度為2 g/L)離體蟾蜍的心肌收縮力和在先灌流鹿茸溶液再灌阿托品溶液離體蟾蜍的心肌收縮力均明顯增加(P<0.05)。在高鈣狀態下，灌流阿托品時的心肌收縮力與高鈣時比較明顯降低(P<0.01)，先灌流阿托品溶液再灌流鹿茸溶液離體蟾蜍的心肌收縮力和先灌流鹿茸溶液再灌流阿托品溶液離體蟾蜍的心肌收縮力亦明顯增加(P<0.05)。結論 在低鈣M受體被部分激活情況下，鹿茸能使M受體進一步激活，而在高鈣M受體被失活情況下，鹿茸能使M受體激活。

鹿茸；保護作用；M受體；心肌收縮力

鹿茸是梅花鹿或馬鹿的密生茸毛未骨化的幼角，是藥食兩用的珍品。現代研究表明，鹿茸有抗衰老，抗腫瘤，保護心血管功能等作用[1]。馬英淇等[2]和于德欽等[3]研究發現：鹿茸在低鈣和高鈣條件下對離體蟾蜍心肌收縮具有雙向調節作用，而人在低鈣和高鈣條件下對心血管極其不利。研究發現，鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力的雙向調節保護作用與心肌細胞膜上β受體興奮有關[4]，而這種保護作用是否與心肌細胞膜上M受體相關？本文旨在應用阿托品工具藥探討鹿茸作用與M受體的相關性，為臨床合理用藥提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 中華蟾蜍40只，體質量80～100 g，由大連醫科大學動物實驗中心提供，隨機分為低鈣組和高鈣組，低鈣組又分為低鈣條件下鹿茸+阿托品組(A組)和低鈣條件下阿托品+鹿茸組(B組)；高鈣組又分為高鈣條件下鹿茸+阿托品組(C組)和高鈣條件下阿托品+鹿茸組(D組)，每組10只蟾蜍。

1.2 儀器與試劑 鹿茸凍干粉由美國德州大學圣安東尼奧健康中心霍玉書教授提供[5]，以純凈蒸餾水稀釋。阿托品為鄭州羚銳制藥股份有限公司生產，批號1410081，任氏液、低鈣任氏液和高鈣任氏液按標準配方配制，BL-420F生物機能實驗系統和FT-100張力換能器由成都泰盟公司生產。

1.3 方法 模型制備和檢測指標參照文獻[6-7]。給藥方法以任氏液+低鈣任氏液+鹿茸+阿托品組為例，離體蟾蜍心臟灌流任氏液，穩定后將心室內任氏液吸出改為低鈣任氏液，在該基礎上加入鹿茸稀釋液后再加入阿托品觀察40 min。其余組給藥方法與上述基本相同，每次在加個20 μL阿托品或鹿茸前要先吸出20 μL灌流液，記錄心搏曲線。

2 結 果

2.1 低鈣條件下鹿茸對心肌收縮力保護作用與M受體的相關性 在低鈣狀態下心室外鹿茸濃度為2g/L時，心肌收縮力與低鈣任氏液組比較明顯增強(P<0.05)，而在加鹿茸之后再加阿托品心肌收縮力與加阿托品前比較，心肌收縮力明顯增強(P<0.05)。在低鈣狀態下灌流液阿托品濃度為10mg/L時，心肌收縮力與低鈣任氏液組比較明顯增強(P<0.05)，之后心室外灌流鹿茸濃度為2g/L時，心肌收縮力與加鹿茸溶液前比較，心肌收縮力再次明顯增加(P<0.05)，見表1。即在低鈣狀態下無論是在灌流鹿茸凍干粉溶液前或后灌流阿托品溶液，心肌收縮力均明顯增強，而在離體蟾蜍心肌收縮力下降狀態下，只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力就會保護性增強。

表1 低鈣狀態下鹿茸對心肌收縮力的保護作用與阿托品的關系

表2 高鈣狀態下鹿茸對心肌收縮力的保護作用與M受體的關系

2.2 高鈣條件下鹿茸對心肌收縮力保護作用與M受體的相關性 在高鈣狀態下心室外鹿茸濃度為2g/L時，心肌收縮力與高鈣任氏液組比較明顯降低(P<0.01)，而在先加鹿茸之后再加阿托品心肌收縮力與加藥前后比較，在加鹿茸后心肌收縮力被抑制后再明顯增強(P<0.05)；在高鈣狀態下先灌流阿托品液濃度為10mg/L時，心肌收縮力與高鈣任氏液組比較，心肌收縮力明顯減弱(P<0.01)，之后加鹿茸后心肌收縮力與加鹿茸溶液前心肌收縮力比較，心肌收縮力在相對較弱的狀態下明顯增加(P<0.01)，見表2。即在高鈣狀態下灌流阿托品溶液，心肌收縮力均明顯下降，而在離體蟾蜍心肌收縮力下降或升高的狀態下，只要灌流鹿茸凍干粉溶液，心肌收縮力就會保護性負反饋調節，使心肌收縮力得以恢復正常。

3 討 論

鹿茸是一種藥食同源的滋補中藥材，功效作用有很多，而且沒有什么毒副作用，一般來說對于大多數人都是適用的。鹿茸具有較強的保健作用，是良好的全身強壯藥材。鹿茸化學成分比較復雜，有激素類如雌二醇、雌酮、表皮生長因子、轉化生長因子、神經生長因子等[8]，無機成分如人體必需常量元素鈣、鈉、鉀和11種微量元素[9]。現代研究發現：鹿茸在低鈣和高鈣條件下對離體蟾蜍心肌收縮具有雙向調節保護作用，并且鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力的雙向調節保護作用可能與心肌細胞膜上β受體興奮有關[2-4]。本實驗結果顯示，鹿茸在低鈣條件下M受體處于激活狀態，而在高鈣條件下M受體處于失活狀態，提示鹿茸對離體蟾蜍心肌收縮力的雙向調節保護作用與M受體相關。研究發現，雌激素可以通過抑制ICaL，降低心肌細胞的鈣瞬變，可能雌激素與G蛋白耦聯受體結合，釋放與內質網或肌質膜受體結合的IP3，引起內質網或肌質膜鈣離子釋放，促使Tnc與鈣離子的結合引起心肌收縮力增強[10]。于向沉[11]報道：雌激素可以通過基因組效應機制或非基因組效應機制快速激活或抑制多種鈣通道的活性，并且多呈現一種非單調的量效關系。周玉文等[12]報道，較高濃度的睪酮或其慢性作用可以提高T型、L型鈣離子通道的密度，較低濃度或急性作用可以阻滯T型、L型鈣離子通道的密度，睪酮還可上調鈣調蛋白、β2受體的表達，在提高細胞內鈣離子濃度的情況下，可以增加鈣瞬變的幅度，減少鈣超載，即雌激素或睪酮對鈣離子都有調控作用，而鹿茸中含有雌激素和睪酮等物質，并且在灌流鹿茸前后灌流阿托品溶液，即在M受體激活或失活狀態下，鹿茸仍能發揮雙向調節作用，推測鹿茸在低鈣和高鈣條件下對離體蟾蜍心肌收縮力的雙向調節保護作用是通過鹿茸中的雌激素或睪酮的多少來調節心肌細胞膜上M受體通道的開放或關閉，進一步控制鈣離子釋放的多少，從而調節蟾蜍的心肌收縮力，鹿茸更精細成分對離體蟾蜍心肌收縮力的影響的具體作用機制涉及更微觀的領域，尚待進一步研究。

[1]傅雷，孫藝平，趙心宇，等．鹿茸的化學成分以及藥理作用研究進展[J]．時珍國醫國藥，2007，18(4)：805-806．

[2]馬英淇，張冬梅，李壯，等．鹿茸在正常和低鈣條件下對離體蟾蜍心肌收縮力和心率影響[J]．遼寧中醫藥大學學報，2014，16(7)：40-42．

[3]于德欽，馬英淇，劉克敏，等．鹿茸在正常、高鈣和低鈣條件下對蟾蜍離體心肌收縮力雙向調節作用的研究[J]．中國藥房，2015，26(13)：1755-1758．

[4]傅雷，王珂萌，孫藝平，等．鹿茸對離體蟾蜍心肌保護作用的影響[J]．中國老年學雜志，2015，35(14)：3797-3798．

[5]柯李晶，林冬云，黃曉南，等．不同加工工藝鹿茸的蛋白成分和活性比較[J]．中藥材，2008，31(1)：11-14．

[6]汪洋，唐澤耀，王珂萌，等．茶色素對離體蟾蜍心肌收縮力的保護作用[J]．中國實驗方劑學雜志，2015，21(12)：90-94．

[7]董帥，唐澤耀，張冬梅，等．茶色素在低鈣及高鈣濃度下對離體蟾蜍心肌收縮力的影響[J]．中藥新藥與臨床藥理，2013，24(6)：561-564．

[8]凌云，羅方成，李秋俠，等．中藥鹿茸性激素的含量測定[J]．中草藥，1999，30(7)：499-500．

[9]董萬超，劉春華，趙立波，等．馬鹿茸、梅花鹿茸不同部位無機元素含量測定分析[J]．特產研究，2004，26(3)：32-36．

[10]高瞻，朱秒章，周士勝，等．雌激素對大鼠心肌細胞鈣的調控作用研究[J]．第四軍醫大學學報，2001，22(23)：2194．

[11]于向沉．雌激素對鈣通道作用的研究進展[J]．臨床與病理雜志，2015，35(2)：289-295．

[12]周玉文，曹雪濱，徐鵬，等．睪酮對鈣離子通道和心臟功能的影響[J]．心臟雜志，2012，24(2)：275-278,280．

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.31.028

國家自然科學基金資助項目(No.81200155)。

劉克敏(1972-),碩士，講師,主要從事循環和神經生理研究。△

，E-mail:shiren382@qq.com。

R732

B

1671-8348(2016)31-4404-03

2016-04-11

2016-07-01)