MGMT不同表達水平的惡性膠質瘤患者術后采用不同化療方案的療效分析*

袁江偉,楊 潔,宋玉芝,王玉祥

(河北醫科大學第四醫院：1.神經外科；2.放療科，石家莊 050000)

?

論著·臨床研究 doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2016.30.024

MGMT不同表達水平的惡性膠質瘤患者術后采用不同化療方案的療效分析*

袁江偉1,楊 潔2,宋玉芝2,王玉祥2

(河北醫科大學第四醫院：1.神經外科；2.放療科，石家莊 050000)

目的 探討不同六氧甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉移酶(MGMT)表達水平惡性膠質瘤患者術后采用不同化療方案的臨床療效及不良反應的差異，為臨床更有效地進行化療提供參考。方法 選取該院腫瘤科2011年1月至2013年1月收治的90例惡性膠質瘤術后患者，將其中64例MGMT表達陰性的患者分為A組和B組(各32例)，26例MGMT表達陽性患者納入C組。A組采用放療加替尼泊苷加尼莫司汀的治療方案，B組采用放療加替莫唑胺的治療方案，C組采用放療加替尼泊苷加尼莫司汀的治療方案。比較3組患者的不良反應發生情況，并隨訪觀察1年后生存率的差異。結果 3組患者的血紅蛋白、白細胞、粒細胞、血小板、出血、丙氨酸氨基轉移酶、肌酐、尿素氮、周圍神經炎不良反應比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；3組患者惡心嘔吐、腹瀉、便秘的發生率比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，且C組明顯高于A、B組(P<0.05)。隨訪觀察1年，僅C組有1例患者失訪。A、B、C組的中位生存時間分別為10、10、7個月，C組中位生存期明顯低于A、B組(χ2=7.673，P=0.006；χ2=6.395，P=0.011)，A、B組比較差異無統計學意義(χ2=0.063，P=0.802)。結論 MGMT表達陽性的膠質瘤患者長期預后效果明顯較MGMT表達陰性者差。

六氧甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉移酶；膠質瘤；化療；不良反應

惡性膠質瘤是臨床上常見的一種原發性顱內腫瘤，具有較強的侵襲性，病死率極高。目前，臨床上主要采用經驗性化療方法治療該腫瘤，但大部分膠質瘤患者的預后較差。替莫唑胺(TMZ)和烷化劑是臨床上治療惡性膠質瘤的常用化療藥物[1]。近年來臨床研究顯示，六氧甲基鳥嘌呤-DNA甲基轉移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase，MGMT)能較好地修復化療造成的DNA損傷[1]。本研究主要以2011年1月至2013年1月于本院腫瘤科治療的90例惡性膠質瘤術后患者為研究對象，分析了不同MGMT表達水平的惡性膠質瘤患者采用不同術后化療方案的臨床療效及其不良反應表現的差異，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2013年1月本院腫瘤科治療的惡性膠質瘤術后患者，納入標準：所有患者均經肉眼全切或次全切除，病理診斷為腦膠質瘤Ⅲ、Ⅳ級，均簽署知情同意書接受放化療，無其他惡性腫瘤病史，Karnofsky功能狀態評分(KPS評分)60分以上，無明顯放化療禁忌證；排除標準：預計生存時間小于3個月的患者，不能夠耐受化療藥物的患者。本研究共納入90例患者，將其分為3組：A組32例，男19例、女13例，年齡20～67歲，平均(39.1±5.9)歲，其中星形細胞瘤Ⅲ級14例、多形性膠質母細胞瘤16例、間變少枝膠質細胞瘤Ⅲ級2例，KPS評分(75.1±5.8)分；B組32例，男18例、女14例，年齡19～68歲，平均(41.6±6.1)歲，其中星形細胞瘤Ⅲ級17例、多形性膠質母細胞瘤14例、間變少枝膠質細胞瘤Ⅲ級1例，KPS評分(75.8±6.4)分；C組26例，男15例、女11例，年齡22～64歲，平均(39.4±5.6)歲，其中星形細胞瘤Ⅲ級12例、多形性膠質母細胞瘤12例、間變少枝膠質細胞瘤Ⅲ級2例，KPS評分(73.4±5.9)分。3組患者的年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 MGMT的檢測 取患者腦膠質瘤組織做成切片，石蠟包埋備用，將組織切片進行常規脫水，并放置在濃度為3%的過氧化氫溶液中持續孵育10 min，使內源性過氧化物的活性阻斷，取出切片，進行梯度乙醇脫水，采用二甲苯透明，最后用中性樹膠封片，選擇甲基轉移酶診斷試劑盒(由四川宇康生物技術有限公司生產)對腫瘤組織中的 MGMT 蛋白表達進行測定，操作步驟嚴格按照試劑盒說明書進行。于鏡檢下分析，細胞質內或腫瘤細胞內有棕褐色著色顆粒判為陽性，著色程度較弱的判為弱陽性，無色的判為陰性。

1.2.2 治療方法 A組采用“放療+替尼泊苷(由北京雙鶴現代醫藥技術有限責任公司生產，國藥準字H19990044 )+尼莫司汀(由揚子江藥業集團有限公司生產，國藥準字H20044292)”方案，選用60 mg/m2替尼泊苷加500 mL生理鹽水對患者進行靜脈滴注30 min，每日1次，連續5 d，同時靜脈滴注3 mg/kg尼莫司汀，之后根據血常規檢查結果停藥3～4周，再次給藥，劑量時間同前。B組采用“放療+替莫唑胺(由浙江杭康藥業有限公司生產，國藥準字H20010509 )”方案，放療同步口服替莫唑胺75 mg/m2，共42 d，放療結束后4周輔助替莫唑胺治療，第1周劑量為150 mg/m2，連續5 d，28 d為1個療程；從第2周期開始增至每日200 mg/m2，連續5 d，28 d為1個療程。化療6個療程。C組采用“放療+替尼泊苷+尼莫司汀”方案，具體用藥方法同A組。放療方案均為全腦照射DT36～40 Gy，連續照射4周，后縮野補量至每2.0～2.5周DT20～24 Gy，每周5次。上述患者均為4周1個療程。

1.2.3 隨訪及不良反應發生的監測 化療期間對兩組患者進行隨訪觀察，隨訪時間4～12個月，平均(7.1±2.2)個月，隨訪方式主要為電話、門診復查、登門檢查等方式。不良反應的監測：詢問患者用藥的不適癥狀，每個用藥療程中進行2次血常規及肝腎功能檢查，以每次檢查指標或癥狀最為嚴重的一次作為標準不良反應，判定標準參見世界衛生組織5級國際標準，見表1。為方便統計，本研究將統計標準分為0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ度。

2 結 果

2.1 3組不良反應的發生情況 對3組患者的血紅蛋白、白細胞、粒細胞、血小板、出血、丙氨酸氨基轉移酶、肌酐、尿素氮、周圍神經炎不良反應進行比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；3組惡心嘔吐、腹瀉、便秘的發生率比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，且C組患者明顯高于A、B組(P<0.05)，見表2。

表1 不良反應分級標準

N:正常值上限。

表2 3組化療不良反應比較[n(%)]

續表2 3組化療不良反應比較[n(%)]

2.2 3組患者1年生存情況分析 對3組患者隨訪觀察1年，僅C組有1例患者失訪。A組中位生存時間為10個月，B組為10個月，C組為7個月，C組中位生存時間明顯低于A、B組(χ2=7.673，P=0.006；χ2=6.395，P=0.011)，A、B兩組患者的生存時間比較差異無統計學意義(χ2=0.063，P=0.802)。3組生存曲線見圖1。

圖1 3組患者生存率估計圖

3 討 論

目前，臨床上主要通過化療方法治療膠質瘤，而腫瘤對化療藥物的耐受性可直接影響化療效果[2]。其中，烷化劑具有較強的脂溶性，對血腦屏障具有較強的通透性，在腦膠質瘤的臨床治療中被廣泛應用。TMZ屬于咪唑并四嗪類新型烷化劑，具有較強的抗腫瘤活性，應用于膠質瘤的治療中，可以有效提高患者的平均存活時間，減輕水腫癥狀，減少腫瘤體積，且不會發生明顯的不良反應[3]。但隨著TMZ的廣泛應用，其抗藥性的產生極大程度上限制了烷化劑的臨床治療效果，成為膠質瘤化療失敗的重要因素。MGMT是腫瘤細胞產生烷化劑抗藥性的主要影響物質。臨床研究表明，MGMT對烷化劑所造成的DNA損傷具有較好的修復作用[4-6]。因此，檢測膠質瘤患者MGMT的活性高低可以對烷化劑治療腫瘤的效果進行預見性判斷。

MGMT的相對分子質量為22×103，是一種普遍存在的DNA修復酶，能有效保護染色體免受化療藥物的損傷[7-8]。其主要作用機制是通過不可逆地將烷化基團轉移到MGMT蛋白第145位半胱氨酸殘基上，使細胞免受烷化劑的損傷。MGMT的合成速率和含量直接決定了細胞修復DNA鳥嘌呤第6位氧原子上烷化基團的能力，腦組織中MGMT處于低水平狀態，而在腦膠質瘤細胞當中，MGMT水平在星形膠質瘤中最高。TMZ是腦膠質瘤化療中的常用藥，作用于機體，可釋放活性的氯乙基氮離子，使DNA上六氧鳥嘌呤烷基化，從而影響DNA的復制，消滅膠質瘤細胞[9-11]。而MGMT可以修復化療藥物烷基化的鳥嘌呤，阻止DNA形成交鏈，降低此類藥物的細胞毒作用。因此，對于有MGMT高表達的膠質瘤患者應當避免選用TMZ等烷化劑化療藥物，以減少耐藥性的產生，從而提高臨床療效[12]。

本研究結果顯示，3組患者的血紅蛋白、白細胞、粒細胞、血小板、出血、丙氨酸氨基轉移酶、肌酐、尿素氮、周圍神經炎等不良反應比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，3組患者隨訪觀察1年，僅C組有1例患者失訪。A組的中位生存時間為10個月，B組為10個月，C組為7個月，C組中位生存期明顯低于A、B組，表明MGMT表達陽性的膠質瘤患者長期化療效果明顯較MGMT陰性表達者差，且不同表達的患者化療不良反應無明顯差異，這一結果和相關文獻報道相吻合[13]。因此，筆者認為不同MGMT表達水平的惡性膠質瘤患者采用不同術后化療方案的臨床療效差異明顯。

[1]季列，周范民．6-氧-甲基鳥平嘌呤-DNA甲基轉移酶和P53在人腦膠質瘤中的表達和預后關系的研究[J]．中國臨床神經科學，2011，19(6)：588-593．

[2]曹秀娟，郝俊芳．高分級腦膠質瘤術后放射治療[J]．國際腫瘤學雜志，2011，38(1):27-29.

[3]Stupp R，Hegi ME，Mason WP，et al．Effects of radiotherapy with concomitant and adjuvant temozolomide versus radiotherapy alone on survival in glioblastoma in a randomized phase Ⅲ study:5-year analysis of the EORTC-NCIC trial[J]．Lancet Oncol，2009，10(5)：459-466．

[4]戴宜武，王振光，秦家振．腦膠質瘤治療進展[J/CD]．中華臨床醫師雜志(電子版)，2013，7(14)：675-677．

[5]Singh SK，Hawkins C，Terasaki M，et al．Identification of a cancer stem cell in human brain tumors[J]．Cancer Res，2012，72(54)：1853-1864．

[6]邵建永，陳忠平．膠質瘤1p/19q聯合缺失特征分析[J]．中國神經精神疾病雜志，2011，37(8)：54-57．

[7]張哲，林松．間變星形細胞少枝膠質細胞腫瘤分子病理亞型分類研究[J]．中華外科雜志，2013，51(12)：54-55．

[8]張磊，袁江偉．HIF-1、MGMT、CD133在人膠質母細胞瘤中表達的相關性研究[J]．中國神經精神疾病雜志，2013，39(9)：33-36．

[9]張鵬．腦惡性膠質瘤術后單純放療與放化療聯合療效比較[J]．中國實用醫藥，2014，9(23)：556-558．

[10]陳曉，田曉嬌，涂漢軍．惡性膠質瘤術后放療聯合化療預后分析[J]．浙江臨床醫學，2013，10(22)：67-69．

[11]孫健，楊學軍，楊樹源．替莫唑胺與司莫司汀治療復發性惡性膠質瘤的隨機、對照、多中心研究[J]．中華醫學雜志，2013，93(3)：55-57．

[12]馮富強，冀培剛，高國棟．貝伐單抗聯合化療治療復發性惡性膠質瘤:附12例經驗[J]．中國神經腫瘤雜志，2012，10(3)：23-26．

[13]黃潔棱，顏曉慧．惡性膠質瘤耐藥細胞通過Beclin1上調自噬抵抗替莫唑胺化療[J]．中華神經醫學雜志，2013，12(8)：52-54．

Efficacy of different chemotherapy regimens for patients with malignant glioma on different expression levels of MGMT*

Yuan Jiangwei1，Yang Jie2，Song Yuzhi2，Wang Yuxiang2

(1.DepartmentofNeurosurgery;2.DepartmentofRadiotherapy,theFourthHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shijiazhuang,Hebei050000,China)

Objective To investigate the differences of clinical efficacy and untoward reaction of different chemotherapy regimens for patients with malignant glioma on different expression levels of O6-methylguanine-DNA-methyltransferase(MGMT),in order to provide

for clinical treatment.Methods Totally 90 cases of patients with malignant glioma in our hospital from January 2011 to January 2013 were selected,among them,64 cases of MGMT negative expressing patients were divided into group A and group B with 32 cases in each group,and 26 cases of MGMT positive expressing patients were enrolled into the group C.Group A was treated with combination of radiotherapy,teniposide and nimustine,group B was treated with radiotherapy-temozolomide combination regimen,group C was treated with combination of radiotherapy,teniposide and nimustine.The untoward reactions of the three groups were compared,and the survival rate was observed after one year follow-up.Results The hemoglobin,leukocyte,granulocyte,platelet,bleeding,alanine aminotransferase,creatinine,urea nitrogen,peripheral neuritis,untoward reactions among the three groups had no statistically significant differences (P>0.05);the incidence rates of nausea and vomiting,diarrhea,constipation among the three groups had statistically significant differences(P<0.05),in which group C was significantly higher than that of group A and group B(P<0.05).Only one case in the group C was lost in the one year follow-up.The median survival time was 10 months in group A and group B,and was 7 months in group C.The median survival time in group C was significantly lower when compared with that in group A and group B(χ2=7.673,P=0.006;χ2=6.395,P=0.011),while there was no significant difference of median survival time between group A and group B(χ2=0.063.P=0.802).Conclusion The long-term prognosis of patients with negative MGMT expression might be significantly worse than that of patients with negative MGMT expression in glioma.

O6-methylguanine-DNA-methyltransferase；glioma；chemotherapy；untoward reaction

河北省衛生廳青年科技項目(20130245)。 作者簡介：袁江偉(1981-)，主治醫師，碩士，主要從事膠質瘤的臨床與基礎研究。

R739.4

A

1671-8348(2016)30-4252-03

2016-03-20

2016-06-29)