山羊毛囊外根鞘細胞系的建立

崔志峰　于會國*　張　忠　王　慧　曾勇慶

(1.山東科技職業學院，濰坊261053；2.山東農業大學動物科技學院，泰安271018)

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山羊毛囊外根鞘細胞系的建立

崔志峰1于會國1*張忠1王慧2曾勇慶2

(1.山東科技職業學院，濰坊261053；2.山東農業大學動物科技學院，泰安271018)

本試驗旨在建立純一、穩定的山羊毛囊外根鞘細胞系。活體采集濟寧青山羊羔羊背部皮膚，采用機械分離與酶消化相結合的方法，分離外根鞘細胞，培養于含有表皮生長因子(EGF)、類胰島素生長因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和氫化可的松的無血清角質細胞培養液中，置5% CO2濃度的37 ℃培養箱中啟動原代培養。待原代細胞長成良好的單層后即可進行傳代培養，細胞經傳代培養至第8～10代時，更換含EGF、IGF-Ⅰ、氫化可的松和FBS的DMEM/F12培養液進行長期培養。選取傳至第40代的外根鞘細胞進行生長特性研究與染色體分析。結果表明：體外培養的細胞倍增時間為51.9 h，培養細胞的染色體數仍以2n=60為主，但是出現了非整倍體性染色體特征；免疫細胞化學鑒定結果表明，該細胞系角蛋白19表達呈陽性。結果提示，本試驗分離培養的細胞確為由山羊毛囊干細胞分化來的外根鞘細胞，體外培養的山羊毛囊外根鞘細胞系得到了成功建立。

毛囊外根鞘細胞；細胞系；濟寧青山羊；生長特性；染色體數目

毛囊(hair follicle)是表皮向真皮凹陷后形成的能控制毛發生長的皮膚附屬器官，具有獨特的結構、合成多種特異角質蛋白的功能以及周期性再生的能力。毛囊在形成與分化過程中至少涉及到20余種不同的細胞群，主要由毛乳頭、毛母質、內根鞘和外根鞘等細胞組成[1-2]。……