胃癌及癌前病變黏膜組織中環氧化酶-2、p53的表達及其與幽門螺桿菌感染的相關性

路敏敏,劉京運,金世祿,屈冬冬

(1.濱州醫學院臨床學院,山東 濱州　256603;2.山東省濱州市人民醫院消化科,山東 濱州　256610)

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胃癌及癌前病變黏膜組織中環氧化酶-2、p53的表達及其與幽門螺桿菌感染的相關性

路敏敏1,劉京運1,金世祿2,屈冬冬1

(1.濱州醫學院臨床學院,山東 濱州256603;2.山東省濱州市人民醫院消化科,山東 濱州256610)

目的：探討胃癌及癌前病變組織中環氧化酶-2(COX-2)、p53的表達情況，分析其與幽門螺桿菌(Hp)感染的相關性。方法：選取慢性淺表性胃炎(CSG)、慢性萎縮性胃炎(CAG)、腸上皮化生(IM)、上皮內瘤變(IN)、胃癌患者各30例，采用免疫組化法檢測COX-2、p53的表達，組織學改良Giemsa染色聯合快速尿素酶試驗(HPUT)檢測Hp，分析各病變組COX-2、p53的表達情況及其與Hp感染的關系。結果：各組黏膜組織中COX-2、p53陽性表達率及Hp感染率差異顯著(P=0.000)，其中胃癌組各指標的陽性率均顯著高于其他各組(P<0.05)。Hp感染陽性組織中COX-2、p53陽性表達率分別為80.8%、60.3%，Hp感染陰性組織中COX-2、p53陽性表達率分別為13.9%、15.3%，差異有統計學意義(P<0.01)。Hp感染伴COX-2和/或p53表達陽性均為胃癌發病的危險因素(OR=12.366，25.394，22.516，P<0.05)。結論：Hp感染，COX-2、p53陽性表達等因素的相互作用可能在胃癌發生發展過程中發揮重要作用，臨床可對高危人群進行相關指標的聯合檢測。

胃癌;環氧化酶-2;p53;幽門螺桿菌

胃癌的發生通常經歷慢性淺表性胃炎(chronic superficial gastritis，CSG)、慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis，CAG)、腸上皮化生(intestinal metaplasia，IM)、上皮內瘤變(intraepithelial neoplasia，IN)等多階段過程[1]。幽門螺桿菌(helicobacter pylori，Hp)感染是慢性胃炎的主要病因，與胃癌的發生發展有密切關系。環氧化酶-2(cyclooxygenase -2，COX-2)參與多種病理生理過程，其表達與炎癥及腫瘤的發生發展有關[2]。p53是一種抑癌基因，它的突變可導致細胞惡性轉化，進一步促進腫瘤的發展[3]。本研究通過檢測胃癌及癌前病變黏膜組織中Hp、COX-2和p53的表達，分析其相關性，現報告如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2013年2月至2015年6月山東省濱州市人民醫院消化內科收治的CSG、CGA、IM、IN、胃癌患者各30例，分別設為CSG組、CGA組、IM組、IN組及胃癌組，所有患者均經胃鏡檢查和病理診斷確診。

1.2方法

1.2.1COX-2、p53檢測方法取胃竇距幽門約5 cm區域黏膜組織為標本，制成切片，運用鏈酶親和素-生物素-過氧化物酶復合物技術(SABC)免疫組化染色[4]。PBS代替一抗作陰性對照，已知陽性切片作陽性對照，陽性反應判定以細胞漿中呈現顆粒狀棕黃色染色者為COX-2、p53陽性細胞，陽性細胞在切片中的所占百分比超過10%為陽性(+)表達，其余為陰性(-)表達。

1.2.2胃黏膜Hp感染檢測方法[5]采用組織學改良Giemsa染色聯合快速尿素酶試驗(HPUT)檢測Hp，2項檢測方法均顯示陽性判為Hp陽性(+)，均顯示陰性判為Hp陰性(-)，2項結果不一致者不納入研究對象。

1.3統計學分析

采用SPSS 15.0軟件，計數資料以百分比表示，比較采用χ2檢驗，采用Spearman等級相關分析COX-2、p53表達與Hp感染的關系。P≤0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1各組基線資料比較

各組性別、年齡等基線資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　各組基線資料比較(n=30)

2.2各組黏膜組織中COX-2、p53表達及Hp感染的情況

各組COX-2、p53陽性表達率及Hp感染率差異有統計學意義(P=0.000)，其中胃癌組表達率顯著高于其他各組(P<0.05)；COX-2、p53陽性表達率隨病變程度的加重呈逐漸增高的趨勢(P=0.000，應用趨勢性卡方檢驗)。見表2。

表2　各組黏膜組織中COX-2、p53表達及Hp感染的情況[n(%)]

*P<0.05，**P<0.01，與胃癌組比較。

2.3各組黏膜組織中COX-2、p53表達與Hp感染的關系

Hp感染陽性組織中COX-2、p53陽性表達率分別為80.8%、60.3%，Hp感染陰性組織中COX-2、p53陽性表達率分別為13.9%、15.3%，差異有統計學意義(P<0.01)。各組表達詳情見表3。

表3　各組黏膜組織中COX-2、p53的表達與Hp感染的相關性[n(%)]

2.4COX-2、p53表達及Hp感染與胃癌發病的關系

對各組患者進行病理因素logistic回歸分析，結果表明，Hp感染伴COX-2和/或p53表達陽性均為胃癌發病的危險因素(OR=12.366，25.394，22.516，P<0.05)。

3　討論

胃癌的發生是一個多因素、多階段的復雜過程，其中Hp感染是胃癌發生過程中的主要生物因素。Hp主要寄居在胃竇部胃黏膜的黏液層和胃小凹內，此部位也是腸上皮化生和異型增生以及胃癌發生率最高的部位，持續Hp感染可導致胃黏膜萎縮和腸化生，最終發展為癌變[6-7]。本研究顯示，胃癌組Hp陽性率顯著高于其他各組(P<0.01)，可見Hp感染與胃癌的發生發展有著密切的關系。環氧酶(COX)是前列腺素(PGs)合成中關鍵性限速酶，COX-2是其誘導型異構體。研究[8-9]表明，在巨噬細胞、成纖維細胞、內皮細胞和單核細胞中COX-2均可被誘導表達，在炎癥、腫瘤等病理狀態下受物質刺激呈高表達趨勢，其催化出的PGs可能通過某種傳導途徑作用于鄰近上皮細胞，進而在上皮細胞惡變中發揮作用。本研究中胃癌組COX-2陽性率顯著高于其他各組。p53基因是一種抑癌基因，其突變和缺失可導致細胞增殖加速和凋亡受阻，促進腫瘤的發生[10]。研究[11]顯示，p53基因的突變是胃癌發生發展過程中最常見的變異基因，可刺激和促進惡性腫瘤細胞的生長。本研究結果顯示，胃癌中p53陽性率顯著高于其它病變組，同時，COX-2與p53陽性表達率隨病變程度的加重呈逐漸增高的趨勢，表明COX-2、p53的表達在胃癌的發生發展過程中起著重要作用。

研究[12-13]發現，Hp可誘導COX-2的表達，其原理可能是：一方面，胃黏膜受Hp感染的刺激表現出一種自我保護機制；另一方面，Hp的侵襲激活了某些細胞因子和生長因子，誘導了COX-2表達。本研究顯示，Hp表達陽性的胃黏膜病變組織中COX-2的陽性表達率顯著高于Hp表達陰性的胃黏膜病變組織，亦說明COX-2的表達與Hp有關。近年來研究[14-15]表明，Hp感染與p53的過度表達有關，可能是由于Hp感染使野生型p53轉變為突變體p53，導致p53喪失抑癌活性，進而促進細胞的惡性轉化。本研究結果顯示，Hp感染陽性的胃黏膜病變組織中p53的陽性表達率顯著高于Hp感染陰性的胃黏膜病變，提示Hp感染可能通過刺激p53突變降低其抑癌作用，增加了細胞惡性轉化的風險。此外，對30例胃癌患者的臨床病理因素進行Logistic回歸分析發現，Hp感染伴COX-2和/或p53表達陽性均為胃癌發病的危險因素，表明COX-2、p53陽性表達與Hp感染之間可能存在交互作用，增加胃癌發病風險，而COX-2、p53陽性表達，Hp感染陰性不是胃癌發病的獨立危險因素，也證實了Hp感染在胃癌發病中的關鍵作用。

綜上所述，Hp感染，COX-2、p53陽性表達等因素的相互作用可能在胃癌發生發展過程中發揮重要作用，在臨床中對高危人群進行相關指標的聯合檢測，對及早發現胃癌前病變及胃癌具有一定的意義。但本研究對Hp感染具體通過哪些途徑影響COX-2、p53的表達沒有闡述，這有待臨床進一步研究證實。

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(學術編輯：趙妍麗)

Expression of cyclooxygenase-2 and p53 in mucous tissues of gastric cancer and precancerous lesion and its relationship with helicobacter pylori infection

LU Min-min1,LIU Jing-yun1,JIN Shi-lu2,QU Dong-dong1

(1.SchoolofClinicalMedicine,BinzhouMedicalCollege,Binzhou256603;2.DepartmentofGastroenterology,BinzhouPeople′sHospital,Binzhou256610,Shandong,China)

Objective：To explore the expression of cyclooxygenase-2 (COX-2) and p53 in mucous tissues of gastric cancer and precancerous lesion,and to analyze its relationship with helicobacter pylori (Hp) infection.Methods：30 patients with chronic superficial gastritis (CSG),30 patients with chronic atrophic gastritis (CAG),30 patients with intestinal metaplasia (IM),30 patients with intraepithelial neoplasia (IN) and 30 with gastric cancer were selected as study subjects.The expression of COX-2 and p53 was detected by immunohistochemical method while Hp by histological modified Giemsa staining combined with rapid urease test (HPUT),and the relationship between the expression of COX-2 and p53 and Hp infection was analyzed.Results：There were significant differences among groups in the positive expression rates of COX-2 and p53 as well as Hp infection rate (P=0.000),and gastric cancer group was markedly higher than other groups in the positive expression rates of above indexes(P<0.05).The positive expression rates of COX-2 and p53 were 80.8% and 60.3% in tissues with positive Hp infection,and were 13.9% and 15.3% in tissues with negative Hp infection,respectively,and the differences were significant (P<0.01).Hp infection complicated with positive expression of COX-2 and/or p53 were the risk factors for the development of gastric cancer (OR=12.366,25.394,22.516,P<0.05).Conclusion：The interaction of Hp infection and positive expression of COX-2 and p53 plays an important role in the development and progression of gastric cancer,so the combined detection of corresponding indexes can be clinically conducted to the population with high risk.

Gastric cancer;Cyclooxygenase-2;p53;Helicobacter pylori

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.03.035

2016-01-21

路敏敏(1990-)，女，碩士研究生。通訊作者：劉京運，E-mail：1367323868@qq.com

時間：2016-6-1617∶46

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20160616.1746.070.html

1005-3697(2016)03-0410-03

R735.2

A