148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)檢查診斷分析

余清　聶佳　吳寧　楊清平

(德陽(yáng)市人民醫(yī)院病理科，四川 德陽(yáng)　618000)

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148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)檢查診斷分析

余清聶佳吳寧楊清平

(德陽(yáng)市人民醫(yī)院病理科，四川 德陽(yáng)618000)

【摘要】目的探討體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)檢查診斷的準(zhǔn)確率。方法用7號(hào)穿刺針獲取148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)標(biāo)本，制備細(xì)胞涂片及細(xì)胞塊并作出細(xì)胞學(xué)診斷，對(duì)148例中無(wú)法直接明確診斷的10例可疑惡性腫瘤(黑色素瘤、鱗狀細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌、甲狀腺乳頭狀癌及非霍奇金淋巴瘤)加做免疫細(xì)胞化學(xué)(immunocytochemistry，ICC)標(biāo)記后再做出細(xì)胞學(xué)診斷；148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)與活檢結(jié)果對(duì)照，分析針吸細(xì)胞學(xué)與活檢結(jié)果的符合率并總結(jié)細(xì)胞學(xué)特點(diǎn)。結(jié)果148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)與活檢結(jié)果符合率為95.95%，細(xì)胞塊鏡下特點(diǎn)與組織學(xué)相似；148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)中的10例可疑惡性腫瘤通過(guò)ICC標(biāo)記后明確診斷。結(jié)論體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)診斷準(zhǔn)確率較高，細(xì)胞涂片結(jié)合細(xì)胞塊、ICC可對(duì)淋巴結(jié)惡性腫瘤作出較準(zhǔn)確的定性及分類診斷。

【關(guān)鍵詞】針吸細(xì)胞學(xué)；體表淋巴結(jié)；細(xì)胞塊；免疫細(xì)胞化學(xué)

體表淋巴結(jié)腫大是臨床常見(jiàn)病癥，本文通過(guò)針吸細(xì)胞學(xué)(fine needle aspiration cytology，F(xiàn)NAC)這種安全、經(jīng)濟(jì)、微創(chuàng)、快速的病理學(xué)診斷技術(shù)對(duì)我院2014年1月～2015年8月148例針吸細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果進(jìn)行分析，同時(shí)取活檢對(duì)照，探討體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確率。

1材料和方法

1.1材料收集我院2014年1月～2015年8月淋巴結(jié)穿刺患者148例，均有活檢對(duì)照，其中男性91例，女性57例，男女比例1.61∶1,年齡1～91歲，平均年齡43.5歲，腫大淋巴結(jié)部位：頸側(cè)(包括胸鎖乳突肌處)102例、腋窩5例、鎖骨上26例、腹股溝區(qū)15例。

1.2方法

1.2.1細(xì)胞涂片及細(xì)胞塊制備使用10ml注射器(7號(hào)針頭)，患者取坐位或臥位，充分暴露腫物，局部碘伏消毒皮膚，左手固定腫塊并繃緊皮膚，右手持針刺入腫塊，保持注射器持續(xù)負(fù)壓約2～4ml抽吸2～3次(穿刺過(guò)程中可改變方向多點(diǎn)穿刺)，穿刺結(jié)束解除負(fù)壓迅速拔出針頭，壓迫止血5min。如果穿出物較少時(shí)將穿出物從針尖推出到載玻片上直接涂片，涂片完成后將載玻片立即用95%乙醇固定30min進(jìn)行蘇木素-伊紅染色；如果涂片完成后穿刺針內(nèi)仍有較多細(xì)胞成分時(shí)將穿刺針?lè)胖眉s5min，待針筒內(nèi)剩余穿出物稍凝固后用4%中性甲醛涮洗出來(lái)進(jìn)行固定、石蠟包埋(細(xì)胞塊制作)、切片、常規(guī)HE染色。

1.2.2免疫細(xì)胞化學(xué)對(duì)148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)中的10例無(wú)法直接明確診斷的可疑惡性腫瘤用4um厚的細(xì)胞塊石蠟切片加作ICC染色：一抗CK5/6、Melan-A、S-100、CD79a、CD20、Ki-67購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)公司，CK、CD56、Syn、CgA、TTT-1、HMB45、LCA購(gòu)自北京中杉公司；二抗顯色系統(tǒng)購(gòu)自丹麥Dako公司，采用EnVision二步法，具體操作步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，用已知陽(yáng)性標(biāo)本作對(duì)照，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.2.3免疫細(xì)胞化學(xué)結(jié)果判斷CK5/6、CK、Syn、CgA、Melan-A、HMB45、S-100以腫瘤細(xì)胞胞漿出現(xiàn)棕黃色或深棕色顆粒為陽(yáng)性(+)，CD56、LCA、CD79a以腫瘤細(xì)胞胞膜出現(xiàn)棕黃色或深棕色顆粒為陽(yáng)性(+)，TTT-1、Ki-67以腫瘤細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色或深棕色顆粒為陽(yáng)性(+)，CD20以腫瘤細(xì)胞胞膜/胞漿出現(xiàn)棕黃色或深棕色顆粒為陽(yáng)性(+)。結(jié)合顯微鏡下細(xì)胞特點(diǎn)、ICC結(jié)果及臨床資料綜合分析對(duì)148例體表淋巴結(jié)做出準(zhǔn)確的針吸細(xì)胞學(xué)報(bào)告。

2結(jié)果

2.1細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)中，炎性疾病89例，腫瘤59例。炎性疾病包括慢性淋巴結(jié)炎51例、化膿性淋巴結(jié)炎13例、壞死性淋巴結(jié)炎25例；腫瘤包括轉(zhuǎn)移癌51例、惡性黑色素瘤2例、淋巴瘤6例，其中51例轉(zhuǎn)移癌中角化性鱗狀細(xì)胞癌18例、腺癌12例、非角化性鱗狀細(xì)胞癌10例、甲狀腺乳頭狀癌2例、小細(xì)胞癌2例、不能明確類型的惡性腫瘤7例；6例淋巴瘤中非霍奇金淋巴瘤(Non-Hodgkin lymphoma,NHL)5例、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma,HL)1例。

2.2細(xì)胞涂片、細(xì)胞塊形態(tài)及ICC結(jié)果，見(jiàn)表1，圖1～10。

表1　細(xì)胞涂片、細(xì)胞塊形態(tài)及ICC結(jié)果

圖1角化性鱗狀細(xì)胞癌 HE×200

Figure 1Keratinizing squamous cell carcinoma HE×200

圖2角化性鱗狀細(xì)胞癌CK5/6(+)×100

Figure 2CK5/6 was positive in keratinizing squamous cell carcinoma (×100)

圖3非角化性鱗狀細(xì)胞癌 HE×400

Figure 3Nonkeratinizing squamous cell carcinoma (HE×400)

圖4甲狀腺乳頭狀癌 HE×200

Figure 4Papillary carcinoma of the thyroid (HE×200)

圖5小細(xì)胞癌 HE×200

Figure 5Small cell carcinoma (HE×200)

圖6小細(xì)胞癌TTT-1(+)×200

Figure 6 TTT-1 was positive in Small cell carcinoma (×200)

圖7NHL HE×400

Figure 7NHL (HE×400)

圖8NHL HEv400

Figure 8NHL (HE×400)

圖9NHLCD20(+)×200

Figure 9CD20 was positive in NHL (×200)

圖10NHLCD79a(+)×200

Figure 10CD79a was positive in NHL (×200)

2.3針吸細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)檢查對(duì)照結(jié)果148例體表淋巴結(jié)針吸細(xì)胞學(xué)檢查中，與組織學(xué)對(duì)照正確142例，正確率95.95%(142/148)。針吸細(xì)胞學(xué)及組織學(xué)檢查結(jié)果，見(jiàn)表2。

3討論

體表淋巴結(jié)腫大是臨床常見(jiàn)病，是多種疾病的共同表現(xiàn)。引起淋巴結(jié)腫大的病因很多，主要分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩種。FNAC檢查是常用的快捷、損傷小、經(jīng)濟(jì)、可靠的體表腫塊診斷技術(shù)，幾乎涉及全身所有的器官[1-2]。國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道淋巴結(jié)疾病FNAC診斷總準(zhǔn)確率為88.2%～94.4%[3-4]，國(guó)外報(bào)道總準(zhǔn)確率為82%～96%[5-7]，我們總結(jié)的148例FNAC與活檢對(duì)照，準(zhǔn)確率為95.95%，較國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道略高。我們總結(jié)認(rèn)為6例誤診的主要原因有以下三方面：①壞死嚴(yán)重未查見(jiàn)有效成分：1例鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移僅查見(jiàn)凝固性壞死；2例壞死性淋巴結(jié)炎壞死徹底并伴感染、未見(jiàn)上皮及肉芽腫成分。②漏穿或腫瘤細(xì)胞少未查見(jiàn)典型病變:1例壞死性淋巴結(jié)炎未穿刺到干酪樣壞死物質(zhì)；1例HL查見(jiàn)大量反應(yīng)性淋巴細(xì)胞而忽視了極少量的R-S細(xì)胞。③腫瘤細(xì)胞異型性?。?例T細(xì)胞來(lái)源的NHL一致的小淋巴細(xì)胞被誤診為慢性淋巴結(jié)炎。

表2　148例針吸細(xì)胞學(xué)及組織學(xué)結(jié)果對(duì)照

FNAC通常依據(jù)單個(gè)細(xì)胞形態(tài)的異性性來(lái)診斷，缺乏組織學(xué)結(jié)構(gòu)，對(duì)于一些低分化腫瘤細(xì)胞的診斷很困難，我們?cè)诖┐掏科髮⑨樛矁?nèi)剩余標(biāo)本進(jìn)行4%中性甲醛固定制備細(xì)胞塊，操作簡(jiǎn)單效果較好，余小蒙等[8]介紹的一種凝血酶與血清黏集法適用于穿出物較少的細(xì)胞塊制備。細(xì)胞塊切片背景清晰、細(xì)胞聚集、可連續(xù)切片與組織學(xué)形態(tài)相似并可在此基礎(chǔ)上做ICC。我們報(bào)道的病例中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞塊中查見(jiàn)的癌巢結(jié)構(gòu)，與組織學(xué)形態(tài)十分相似，角化性鱗狀細(xì)胞癌中也查見(jiàn)了角化珠結(jié)構(gòu)。值得注意的是在未分化型非角化性鼻咽癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的FNAC診斷中，細(xì)胞學(xué)涂片往往僅見(jiàn)少量散在的泡狀核及明顯核仁的腫瘤細(xì)胞，與Reed-Sternber細(xì)胞相似容易造成誤診或漏診，此時(shí)細(xì)胞塊的制備顯得尤為重要，不僅可以顯示出癌巢結(jié)構(gòu)必要時(shí)還可在其基礎(chǔ)上做CK等上皮性標(biāo)記輔助診斷。細(xì)胞涂片結(jié)合細(xì)胞塊及ICC檢測(cè)可以明確疾病的類型，提高FNAC的診斷準(zhǔn)確率，對(duì)部分有典型形態(tài)學(xué)特征的轉(zhuǎn)移癌還可以起到提示原發(fā)灶的作用，如淋巴結(jié)穿刺細(xì)胞塊中出現(xiàn)分枝乳頭狀結(jié)構(gòu)提示來(lái)源于甲狀腺乳頭狀癌的轉(zhuǎn)移，可做TTF-1、CK19、HBME-1、Galectin等ICC標(biāo)記進(jìn)一步印證；FNAC形態(tài)與腫大淋巴結(jié)的部位相結(jié)合也可提示原發(fā)灶，如癌巢結(jié)構(gòu)出現(xiàn)在胸鎖乳突肌下腫大淋巴結(jié)中可以提示腫瘤來(lái)源于鼻咽部的可能，Kollur SM等[9]也認(rèn)為頸部腫大淋巴結(jié)FNAC檢查對(duì)確定轉(zhuǎn)移性鼻咽癌，包括早期診斷和分期非常有用。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移性腺癌FNAC診斷中Koss[10]指出一些細(xì)微結(jié)構(gòu)的線索可以提示其來(lái)源部位：胞漿內(nèi)有黏蛋白的大的印戒細(xì)胞常與胃腸道腫瘤有關(guān)，有長(zhǎng)長(zhǎng)的、柵欄狀的細(xì)胞核的柱狀腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)在壞死碎屑中提示結(jié)腸原發(fā)的腫瘤。

以往單從FNAC形態(tài)學(xué)很難對(duì)淋巴瘤類型進(jìn)行分類，我們?cè)谌粘Ｔ\斷工作中總結(jié)認(rèn)為細(xì)胞涂片中B細(xì)胞來(lái)源的NHL顯示出大小一致的幼稚淋巴細(xì)胞，細(xì)胞染色質(zhì)細(xì)顆粒狀、核膜增厚、核仁明顯等鏡下特點(diǎn)較細(xì)胞塊鏡下顯著，根據(jù)細(xì)胞涂片的形態(tài)特點(diǎn)在細(xì)胞塊基礎(chǔ)上做CD79a、LCA、CD20等相關(guān)ICC標(biāo)記可以對(duì)NHL來(lái)源于B或是T進(jìn)行簡(jiǎn)單的分型，但對(duì)進(jìn)一步亞型的分類有困難。雖然目前對(duì)淋巴瘤診治領(lǐng)域內(nèi)FNAC的臨床用途以及是否有助于臨床治療方案決策等仍存爭(zhēng)議[11]，但因?yàn)镕NAC吸出的細(xì)胞新鮮，非常適合各種分子病理檢測(cè)，現(xiàn)國(guó)內(nèi)外有較多相關(guān)方面的文獻(xiàn)報(bào)道[12-14]?；顧z標(biāo)本通過(guò)甲醛固定可使結(jié)核桿菌死亡，F(xiàn)NAC無(wú)需甲醛固定，不僅減少開(kāi)放活檢數(shù)量、減輕患者的損傷，也可以提高結(jié)核桿菌的陽(yáng)性檢出率。Bruijnesteijn等[15]報(bào)道102例穿刺標(biāo)本FQ-PCR檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的敏感性和特異性分別為71.6%和100%。我們科室對(duì)FNAC形態(tài)學(xué)支持結(jié)核16例患者行FQ-PCR檢測(cè)結(jié)核桿菌陽(yáng)性率為62.5%，與文獻(xiàn)報(bào)道有差距，可能是由于我們統(tǒng)計(jì)的病例數(shù)較少或采用不同廠家試劑的緣故。

4結(jié)論

本文結(jié)果顯示，在行FNAC檢查時(shí)應(yīng)盡可能的制備細(xì)胞塊，在彌補(bǔ)單靠細(xì)胞涂片診斷不足的同時(shí)還可以加做相關(guān)ICC及分子檢測(cè)，可以對(duì)一些淋巴結(jié)惡性腫瘤做出定性及分類的診斷并判斷其來(lái)源，提高FNAC診斷準(zhǔn)確率，將為腫瘤患者的診斷、分型及治

療方案的制定發(fā)揮更大的作用。

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通訊作者：吳寧，主任醫(yī)師，Tel：08382418446

【中圖分類號(hào)】R730.49

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A

doi：10.3969/j.issn.1672-3511.2016.07.030

(收稿日期：2015-11-16；編輯：陳舟貴)

Diagnostic accuracy of fine needle aspiration biopsy of surface lymph node：a study of 148 cases

YU qing,NIE jia,WU Ning,et al

(Department of Pathology,The People’s Hospital of Deyang,Deyang 618000,Scihuan,China)

【Abstract】ObjectiveTo study the diagnostic accuracy of fine needle aspiration biopsy of surface lymph nodes.Methods148 patients with surface lymph node obtained by 7 fine needle aspiration were collected to make cell smear and cell block.10 cases of suspicious for malignancy such as Lymph node metastatic melanoma,squamous cell carcinoma,small cell carcinoma,papillary thyroid carcinoma and non-hodgkin lymphoma were diagnosed by immunocytochemistry,which based on cell block.Then,the agreement rate of needle aspiration cytology with the histology diagnosis and cytological characteristics were observed.ResultsThe concordance rate between the cytologic and corresponding histologic diagnoses was 95.95%.10 cases of suspicious for malignancy were confirmed by immunocytochemistry.ConclusionsFine needle aspiration biopsy of surface lymph node carries a high diagnostic accuracy.For detailed subtyping of certain disease entities,cell block combined with Immunocytochemistry is required.

【Key words】Fine needle aspiration cytology; Surface lymph node; Cell block; Immunocytochemistry