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上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究

2016-07-14 06:03:54羅海峰張雋開王洪江
大連醫科大學學報 2016年1期

羅海峰,杜 漸,張雋開,鞏 鵬,譚 廣,王洪江

(大連醫科大學附屬第一醫院 普外二科,遼寧 大連 116011)

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上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究

羅海峰,杜漸,張雋開,鞏鵬,譚廣,王洪江

(大連醫科大學附屬第一醫院 普外二科,遼寧 大連 116011)

[摘要]目的研究miR-125b在肝癌發生發展中的作用機制,及其表達對于肝細胞癌化療耐受性的影響。方法采用qPCR檢測肝癌患者癌組織、癌旁組織、Huh-7細胞系(對照組)及轉染miR-125b mimic的Huh-7細胞系(轉染組)中miR-125b表達情況。采用流式細胞儀及MTT法檢測對照組及轉染組細胞周期及增殖情況。Western blot 檢測Huh-7細胞系轉染后Mcl-1蛋白表達。設3組:對照組為正常培養細胞,miRNA control組轉染miRNA control,miR-125b mimic組轉染miR-125b mimic。Western blot 檢測Mcl-1特異性siRNA阻斷Mcl-1蛋白表達后,細胞凋亡相關蛋白caspase3的表達情況。設3組:對照組細胞正常培養;順鉑組加入順鉑,終濃度50 μg/mL培養;轉染+順鉑組轉染Mcl-1-siRNA,48 h后加入順鉑,終濃度50 μg/mL。結果肝癌組織miR-125b表達較癌旁組織明顯減低,為癌旁組織的(46.24±8.53)%,P<0.05。 miR-125b mimic 轉染 Huh-7細胞后,轉染組細胞G1/S比例較對照組明顯增高(P<0.05);Mcl-1蛋白表達較對照及miRNA control組下調(P<0.05);轉染+順鉑組中的Caspase3蛋白表達較對照組及順鉑組明顯增高(P<0.05)。結論上調miR-125b的表達可以抑制肝癌細胞增殖,抑制靶蛋白Mcl-1表達,促進順鉑誘導凋亡,具有抑癌基因的作用。

[關鍵詞]miRNA;肝細胞癌;化療耐藥性

[引用本文]羅海峰,杜漸,張雋開,等.上調miR-125b對肝癌Huh-7細胞系增殖及順鉑誘導凋亡的作用研究[J].大連醫科大學學報,2016,38(1):12-15.

肝細胞癌是威脅人們身體健康的重要惡性腫瘤之一,其發生、發展和化療耐藥性的研究對治療具有重要意義。miR-125b在肝細胞癌發生發展中所起到的作用越來越受到人們的重視。有研究表明miR-125b可能通過調控Mcl-1(myeloid cell leukemia-1),影響肝細胞癌的生物學特性。Mcl-l基因在許多正常組織中廣泛表達,對維持多種細胞的成熟與分化有重要的意義,而Mcl-l蛋白表達上調與許多腫瘤的發生相關?!?br>

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