高效液相色譜法測(cè)定心肌肽中組胺含量的可行性分析

矯　建，張婷婷, 杜　娟，劉進(jìn)朋，魯　軍

(1. 大連市藥品檢驗(yàn)所，遼寧 大連 116021；2. 大連市第二人民醫(yī)院，遼寧 大連 116011 )

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高效液相色譜法測(cè)定心肌肽中組胺含量的可行性分析

矯建1，張婷婷1, 杜娟2，劉進(jìn)朋1，魯軍1

(1. 大連市藥品檢驗(yàn)所，遼寧 大連 116021；2. 大連市第二人民醫(yī)院，遼寧 大連 116011 )

[摘要]目的建立和驗(yàn)證高效液相色譜(HPLC)測(cè)定心肌肽中組胺含量的方法。方法采用多道生理記錄儀記錄受試樣品致貓血壓下降情況。用丹磺酰氯柱前衍生化高效液相色譜法測(cè)定心肌肽中組胺含量，心肌肽溶液經(jīng)三氯乙酸沉淀后，取上清液以丹磺酰氯丙酮溶液為衍生化試劑，衍生化后進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定。色譜條件為：色譜柱C18柱(250 mm×4.6 mm，i.d.,5 μm)，以水-乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，并對(duì)此方法進(jìn)行方法學(xué)考察(標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、加標(biāo)、回收率、精密度重復(fù)性、專屬性)。分析樣品中組胺含量與致貓血壓下降值之間的相關(guān)性。結(jié)果1～5號(hào)樣品dT/dS值分別為(0.22±0.07,0.74±0.07,0.91±0.03,0.93±0.10,1.16±0.05)均為合格產(chǎn)品。組胺對(duì)照品在0.1～10 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)(r)>0.996，檢出限為0.03 μg/mL，平均加標(biāo)回收率>91.1%。日內(nèi)與日間精密度RSD均<1.0%,重復(fù)性及專屬性均符合生物樣品分析要求。SPSS軟件分析心肌肽中組胺的含量與降壓物質(zhì)檢查法中降壓反應(yīng)比值(dT/dS)成良好的線性相關(guān)(r=0.974，P=0.036)。結(jié)論采用HPLC法測(cè)定心肌肽溶液中組胺的含量，并結(jié)合降壓反應(yīng)比值(dT/dS)設(shè)定組胺含量的限值可能成為控制心肌肽原料藥質(zhì)量的良好方法。

[關(guān)鍵詞]降壓物質(zhì)；心肌肽；組胺；高效液相色譜法；丹磺酰氯柱前衍生法

[引用本文]矯建,張婷婷，杜娟,等.高效液相色譜法測(cè)定心肌肽中組胺含量的可行性分析[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016,38(3)：228-231.

組胺屬于一種生物胺，由組氨酸脫羧酶(HDC)以組氨酸為底物合成，由組氨酸脫羧形成，作為生物活性物質(zhì)存在于大多數(shù)活的生物中。組胺被公認(rèn)為是一種過(guò)敏反應(yīng)介質(zhì)，是免疫性刺激或非免疫性刺激生物反應(yīng)的介質(zhì)[1]，同時(shí)，單胺氧化酶抑制劑可以增加含組胺類物質(zhì)的毒性[2]。魚類……