肺癌組織中胞漿型磷脂酶A2和前列腺素E2合酶-1的表達及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

帥　萍　肖秋香

(贛南醫(yī)學院病理學教研室，江西　贛州　341000)

肺癌組織中胞漿型磷脂酶A2和前列腺素E2合酶-1的表達及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

帥萍肖秋香

(贛南醫(yī)學院病理學教研室，江西贛州341000)

〔摘要〕目的探討肺癌組織中胞漿型磷脂酶(cPL)A2和前列腺素E2合酶(mPGES)-1的表達及其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。方法選擇58份肺癌組織標本(肺癌組)及其周邊正常組織(距離所切肺癌組織超過5 cm，癌旁組)，采用RT-PCR和免疫組化方法檢測樣本中cPLA2和mPGES-1 mRNA和蛋白的表達，分析其在肺癌組及不同臨床病理參數(shù)中的差異。結(jié)果肺癌組mPGES-1 和cPLA2 mRNA表達水平顯著高于癌旁組(P<0.05)；肺癌組mPGES-1和cPLA2蛋白的總表達陽性率，均顯著高于癌旁組(P<0.05)。腫瘤分化程度較低、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期越高，mPGES-1蛋白表達陽性率越高(P<0.05)，而不同腫瘤直徑、病理類型、分化程度、臨床分期以及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肺癌組織的cPLA2蛋白的表達陽性率無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論肺癌組織中cPLA2和mPGES-1呈現(xiàn)高表達，cPLA2表達與臨床病理參數(shù)無關(guān)，而mPGES-1表達與分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及不同臨床分期有關(guān)，兩者檢測對肺癌的早期診斷和靶向治療有一定的臨床意義。

〔關(guān)鍵詞〕肺癌；胞漿型磷脂酶A2；前列腺素E2合酶-1

目前肺癌的治療主要采用手術(shù)切除為主、化療為輔的綜合治療方法，但治療效果較差。近年來隨著肺癌分子學機制和靶向治療研究的不斷深入，尋找特異性的分子靶點開展靶向治療成為肺癌治療新的契機〔1〕。本研究探討胞漿型磷脂酶(cPL)A2和前列腺素E2合酶(mPGES)-1在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1資料和方法

1.1一般資料隨機選取我院2013年1月至2014年12月58例肺癌患者手術(shù)切除的肺癌組織標本(肺癌組)及其周邊正常組織(距離所切肺癌組織超過5 cm〔2〕，癌旁組)，所有肺癌組織均經(jīng)病理學檢查確診，且組織切除前患者均未接受放療和化療等任何治療。標本在手術(shù)切除后1 h內(nèi)放置于液氮中保存待檢。其中女21例，男37例，年齡34～76〔平均(57.62±10.47)〕歲；腺癌26例，鱗癌32例；低分化型28例，高-中分化型30例；TNM分期〔3〕：Ⅰ期12例、Ⅱ期25例、Ⅲ期21例；轉(zhuǎn)移程度：局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例、無轉(zhuǎn)移27例。

1.2指標檢測

1.2.1mPGES-1和cPLA2的mRNA表達水平〔4〕參照RNA提取試劑盒的操作說明進行所有組織RNA提取，從所提取的RNA中提取一部分進行電泳，觀察RNA的完整性(完整即出現(xiàn)5 s、18 s和28 s三條清晰條帶)。隨即通過反轉(zhuǎn)錄途徑將所有樣本的RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，最后通過PCR方法將所有樣本進行cDNA擴增，引物序列：mPGES-1：正義：5′-CTTCCCGATCAAACACATAAGG-3′；反義：5′-CAGTGGGCTCACATTTAACCT-3′；cPLA2：正義：5′-ACCTTGAAGGAGTCAGGCATGAG-3′；反義：5′-TGGAGACCATCTACCCCTT-3′；β-actin：正義：5′-CGTCATACTCCTGCTTGCTGATCCACATCTG-3′；反義：5′-ATCTGGCACCACACCTTCTACAATGAGCTGCG-3′。分別從每份肺癌組織和癌旁組織中獲得mPGES-1、cPLA2和內(nèi)參β-actin基因片段，序列長度分別為860 bp、620 bp和400 bp。所得基因片段置于1%瓊脂糖凝膠內(nèi)進行電泳，獲得mPGES-1、cPLA2和內(nèi)參β-actin電泳帶。采用凝膠成像分析系統(tǒng)檢測所有樣本中三條條帶的吸光度，最終以mPGES-1、cPLA2條帶與內(nèi)參β-actin吸光度值的比值作為mPGES-1、cPLA2的表達水平。

1.2.2mPGES-1和cPLA2蛋白表達水平采用免疫組化SP方法〔5〕對組織樣本分別進行染色以檢測其中mPGES-1和cPLA2蛋白的表達。每張切片中隨機選取高倍鏡下4個不同的視野，觀察每個高倍視野內(nèi)100個細胞，記錄其中細胞質(zhì)被染成棕黃色的陽性細胞數(shù)，取4次讀數(shù)的平均值為最終值，最后計算陽性細胞百分比(陽性細胞數(shù)/細胞總數(shù)×100%)。

1.3臨床資料收集分別收集并記錄其一般資料(年齡、性別等)、腫瘤直徑、病理類型、分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期。

1.4統(tǒng)計學方法采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行t檢驗、χ2檢驗。

2結(jié)果

2.1兩組mPGES-1和cPLA2的mRNA表達水平對比肺癌組mPGES-1 和cPLA2 mRNA表達水平〔(0.81±0.23)和(0.56±0.08)〕顯著高于癌旁組〔(0.07±0.02)和(0.09±0.02)〕(P<0.05)。

2.2mPGES-1和cPLA2蛋白表達水平與臨床病理特征關(guān)系肺癌組mPGES-1和cPLA2蛋白的總表達陽性率〔67.24%(39/58)、79.31%(46/58)〕顯著高于癌旁組〔8.62%(5/58)、0.00%(0/58)〕(P<0.05)。不同腫瘤直徑和病理類型肺癌組織的mPGES-1蛋白表達陽性率差異無統(tǒng)計意義(P>0.05)，而不同分化程度、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及不同臨床分期的肺癌組織間mPGES-1蛋白表達陽性率差異顯著(P<0.05)，而不同臨床病理特征肺癌組織中的cPLA2蛋白的表達陽性率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　mPGES-1和cPLA2蛋白表達水平與

3討論

Cox-2在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中主要參與腫瘤血管的誘導(dǎo)產(chǎn)生、細胞凋亡和免疫功能的抑制以及腫瘤侵襲浸潤過程〔6〕。在Cox-2介導(dǎo)產(chǎn)生前列腺素E2的過程中，需要上游cPLA2和下游mPGES-1的參與才能正常進行。其中cPLA2的主要作用是將胞膜磷脂轉(zhuǎn)化為PEG E2合成所需的花生四烯酸，cPLA2的表達和活性可決定PEG E2合成的速率和利用率〔7〕。本研究提示肺癌中cPLA2呈現(xiàn)高表達。但是cPLA2表達與臨床病理特征無相關(guān)性，對肺癌的發(fā)展無明顯作用，可能是由于cPLA2在肺癌的發(fā)生發(fā)展機制中僅通過產(chǎn)生花生四烯酸提供給Cox-2，僅是與Cox-2協(xié)同作用，而無炎癥因子刺激作用。Cox-2介導(dǎo)PEG E2合成的過程中也少不了下游mPGES-1的參與。在PEG E2的合成過程中，cPLA2介導(dǎo)合成花生四烯酸后，Cox-2將花生四烯酸催化并轉(zhuǎn)化為PEGH2，PEGH2經(jīng)mPGES-1催化最終生成PEG E2〔8〕。因此mPGES-1在PEG E2的合成過程中起著重要作用。本研究提示肺癌組織中存在mPGES-1高表達，與臨床既往研究結(jié)果相似〔9〕。另外mPGES-1表達可預(yù)測肺癌的進展程度和后期預(yù)后情況。

4參考文獻

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9王靜媛，賈海琴.肺癌中mPGES-1的表達及生物學意義〔J〕.內(nèi)蒙古醫(yī)學雜志，2014；46(1)：8-11.

〔2015-07-10修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

〔中圖分類號〕R73

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2016)10-2415-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.10.047

第一作者：帥萍(1979-)，女，講師，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤病理學方面的研究。