三葉青水提取物對(duì)NK細(xì)胞殺傷胃癌BGC-823細(xì)胞的影響

袁 雨，朱炳喜，劉軍權(quán)，周 燏，呂小婷，周忠海，陳永強(qiáng)，楊 陽(yáng)

1. 徐州醫(yī)科大學(xué)，江蘇 徐州 221002； 2. 中國(guó)人民解放軍第九七醫(yī)院

三葉青水提取物對(duì)NK細(xì)胞殺傷胃癌BGC-823細(xì)胞的影響

袁 雨1，朱炳喜1，劉軍權(quán)2，周 燏2，呂小婷2，周忠海2，陳永強(qiáng)2，楊 陽(yáng)2

1. 徐州醫(yī)科大學(xué)，江蘇 徐州 221002； 2. 中國(guó)人民解放軍第九七醫(yī)院

目的 探討三葉青水提取物對(duì)人NK細(xì)胞殺傷胃癌BGC-823細(xì)胞的影響及機(jī)制。方法 采用干細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(SCGM)體外擴(kuò)增人外周血NK細(xì)胞，不同濃度三葉青水提取物作用于NK細(xì)胞后，采用CCK8法檢測(cè)三葉青水提取物對(duì)NK細(xì)胞增殖率的影響，流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)NK細(xì)胞穿孔素(PFP)、顆粒酶B(GraB)及CD107a的表達(dá)，乳酸脫氫酶(LDH)釋放法檢測(cè)NK細(xì)胞對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞的殺傷活性。結(jié)果 三葉青水提取物作用人NK細(xì)胞48 h后，三葉青水提取物0.0003～78.125 μg/ml 濃度組的NK細(xì)胞增殖明顯(P<0.05)；三葉青水提取物0.305～4.883 μg/ml濃度組人NK細(xì)胞PFP、GraB及CD107a表達(dá)高于對(duì)照組(P<0.05)；三葉青水提取物0.305～19.531 μg/ml 濃度組人NK細(xì)胞對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞殺傷活性較對(duì)照組增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 三葉青水提取物能促進(jìn)NK細(xì)胞的增殖，能增強(qiáng)NK細(xì)胞對(duì)胃癌BGC-823細(xì)胞的殺傷活性，這可能與三葉青水提取物上調(diào)NK細(xì)胞PFP、GraB及CD107a表達(dá)有關(guān)。

三葉青；NK細(xì)胞；胃癌BGC-823細(xì)胞；殺傷活性

三葉青(Tetrastigma hemsleyani)為葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤，主要分布于我國(guó)西南及安徽、浙江、江西等地[1]。作用于機(jī)體后可發(fā)揮清熱解毒、活血止痛、祛風(fēng)化痰、調(diào)節(jié)免疫等作用，現(xiàn)在臨床上多采用三葉青治療哮喘、肺炎、肝炎、風(fēng)濕、咽痛、瘰疬等疾病，且具有很好的療效[2]。近幾年來， 三葉青的抗腫瘤作用成為研究熱點(diǎn)，許多文獻(xiàn)[3-4]報(bào)道三葉青提取物在體外具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)其凋亡的作用。自然殺傷細(xì)胞(natural killer cells,NK)是人體固有免疫的主要淋巴細(xì)胞之一，無(wú)需事先致敏和免疫即可識(shí)別腫瘤及病毒感染細(xì)胞，發(fā)揮細(xì)胞毒性無(wú)主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex，MHC)限制性[5]。NK細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞主要是通過Fas和FasL相互作用后釋放顆粒酶B(Granzyme B，GraB)和穿孔素(perforin，PFP)來實(shí)現(xiàn)[6]。……