普洱市兒童呼吸道感染病原體IgM抗體九聯檢臨床應用分析

羅　丹，張曉陽，高向陽，周春紅，文元幫

(昆明理工大學附屬普洱市人民醫院檢驗科，云南普洱 665000)

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·論著·

普洱市兒童呼吸道感染病原體IgM抗體九聯檢臨床應用分析

羅丹，張曉陽，高向陽△，周春紅，文元幫

(昆明理工大學附屬普洱市人民醫院檢驗科，云南普洱 665000)

摘要:目的通過對普洱市兒童呼吸道感染病原體IgM抗體九聯檢的檢測結果進行分析，掌握該地區兒童呼吸道感染的流行病學特點，為臨床診療提供參考。方法隨機采集普洱市人民醫院2014年1～12月兒科門診及住院的呼吸道感染患兒1 327例血液樣本，采用9項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒(間接免疫熒光法)進行檢測，并對檢測結果進行統計學分析。 結果在1 327例呼吸道感染患兒中，檢出IgM抗體陽性446例，總陽性率為33.6%。其中肺炎支原體(MP)陽性率最高(23.6%)，其次乙型流感病毒(INFB)為 18.5%，嗜肺軍團菌1型(LP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)和副流感病毒(HPIVs)的陽性率都比較低，依次為0.4%、1.1%、1.0%、1.1%、1.0%，Q熱立克次體(CB)和肺炎衣原體(CP)未檢出陽性。9種病原體檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)；6種主要病原體的月檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)；各年齡段患兒病原體檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論普洱市兒童呼吸道感染的主要病原體是MP和INFB，病原體的流行病學分布與年齡和季節有關，臨床醫生應根據檢測結果對患兒進行合理診療。

關鍵詞:兒童；呼吸道感染；九聯檢；間接免疫熒光法

急性呼吸道感染是兒童最為常見的疾病之一，其致病原包括細菌、病毒以及多種非典型致病原，臨床癥狀多相似，構成情況比較復雜，病原譜和感染率常因地區、人群、季節的不同而存在差異，臨床往往難以針對病原體進行治療，因此，病原體的檢測顯得尤為重要。而呼吸道感染病原體的快速檢測，能夠有效預防和控制兒童呼吸道感染，對臨床的快速診斷和合理治療提供重要依據。呼吸道感染病原體IgM抗體九聯檢(簡稱呼吸道九聯檢)與微生物培養相比較，具有檢測周期短的特點，能夠快速，準確檢測9種呼吸道感染病原體的IgM抗體。本研究就1 327例門診及住院患兒呼吸道九聯檢檢測結果進行比較分析，進而探討普洱市兒童呼吸道感染的流行病學特征，為兒童呼吸道感染性疾病的防治提供參考。

1資料與方法

1.1一般資料2014年1～12月普洱市人民醫院兒科門診及住院的呼吸道感染兒童患者1 327例，其中男性752例，女性575例，年齡0～14歲，按年齡分為0～<1歲569例，1～<3歲329例，3～<6歲270例，6～≤14歲159例，均存在呼吸道感染的臨床癥狀。

1.2方法采集患兒空腹靜脈血2～3 mL,3 500 r/min離心15 min分離提取血清標本。9項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑購自鄭州安圖生物工程股份有限公司，采用間接免疫熒光法檢測嗜肺軍團菌1型(LP)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(CB)、肺炎衣原體(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)和副流感病毒(HPIVs)123型病原體的IgM抗體。嚴格按照試劑說明書進行操作，用熒光顯微鏡觀察結果。本實驗所用試劑及質控品均為原廠配套產品，所有試劑及質控品均在使用有效期內，所有檢驗項目室內質控在實驗期間均顯示實驗結果有效。

1.3結果判斷陽性結果：可以觀察到ADV、流感病毒、RSV或HPIVs的整個包被孔中有1%～15%細胞的細胞核、胞漿或包膜出現蘋果綠色熒光(在HPIVs和RSV中能同時觀察到著色的合胞)；軍團菌、衣原體或立克次體中所有的菌體呈現出蘋果綠色熒光；支原體出現細胞外圍蘋果綠色熒光。陰性結果：可觀察到軍團菌、CP和立克次體無熒光，支原體、ADV、INFA和INFB、RSV和HPIVs細胞呈現紅色。

1.4統計學處理根據觀察到的結果，統計9種病原體IgM抗體的檢測陽性率，采用SPSS17.0統計軟件進行數據分析，數據間比較采用卡方檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.19種病原體檢測陽性率在1 327例呼吸道感染患兒中，檢出446例IgM抗體陽性，總陽性率為33.6%。其中MP陽性率最高(23.6%)，其次為INFB(18.5%),LP、ADV、RSV、INFA和 HPIVs陽性率都比較低，依次為0.4%、1.1%、1.0%、1.1%、1.0%,CB和CP未檢出陽性。9種病原體檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。

2.26種主要病原體的月檢測陽性率剔除未檢出陽性的兩種病原體CB和CP及檢出率較低的LP，其余6種主要病原體的月檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1　6種主要呼吸道病原體IgM抗體的月檢測陽性率[n(%)]

2.3不同年齡段患兒主要呼吸道病原體檢測的陽性率比較各年齡段患兒檢測呼吸道病原體總陽性率依次為16.3%、45.0%、48.1%、47.1%。各年齡段患兒呼吸道感染的病原體均以MP陽性率最高，其次為INFB。0～<1歲患兒MP和INFB的檢測陽性率明顯低于其他3個年齡段患兒。不同年齡段患兒病原體檢測陽性率比較差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2　不同年齡段患兒主要呼吸道病原體IgM

3討論

呼吸道感染是兒童的常見病和多發病，由于兒童呼吸系統及免疫系統尚未發育完全，機體抵抗力差，易發生呼吸道感染。然而，引起兒童呼吸道感染的病原體較為復雜，且臨床表現多相似，很容易被誤診和忽視，導致抗菌藥物濫用，延誤病情。因此，對兒童呼吸道病原體的正確診斷是預防和控制兒童呼吸道感染的關鍵所在。呼吸道病原體的檢測方法包括病原體分離培養及組織細胞培養法、血清學檢測法、分子生物學法、免疫學法等。病原體分離培養及組織細胞培養法是病原學診斷的金標準，但檢測周期長、技術要求高，而分子生物學法靈敏度高，但多種病原體同時檢測成本過高，對實驗室的條件要求也非常嚴格，兩者都不適合作為臨床常規項目開展[1]。呼吸道九聯檢采用間接免疫熒光法，一塊載玻片可同時檢測9種呼吸道病原體IgM抗體。此方法特異度和敏感度高、操作簡便、快速，所需標本量少，便于兒童呼吸道感染的病原體篩查。

在本研究中，1327例呼吸道感染患兒，陽性例數為446例，總陽性率為33.6%，與國內部分省份報道的結果基本一致[2-4]。本研究中，9種呼吸道病原體IgM抗體只檢測出了MP等7種病原體的IgM抗體，CB、CP沒有

檢出，這與國內其他省份的報道存在不同[1，5-6]，表明兒童呼吸道感染的病原譜可能存在地區差異。在檢出的病原體中，以MP陽性率最高(23.6%)，其次為INFB(18.5%)，LP、ADV、RSV、INFA和HPIVs陽性率都較低，與文獻[7]報道結果相符。

本研究顯示，不同月份呼吸道病原體的檢測陽性率有所不同，說明呼吸道病原體的流行有一定的季節性。MP和INFB全年均有檢出，在9、10月兩者陽性率均為最高,ADV、INFA、HPIVs和RSV全年陽性率都較低，但8～12月份陽性率相對其他月份較高；MP、INFB、ADV、INFA、HPIVs和RSV 這6種主要病原體秋冬兩季的陽性率明顯高于春夏兩季，而以秋季的陽性率為最高。由此可見，引起普洱市兒童呼吸道感染的主要病原體存在季節流行的趨勢，以MP和INFB最為明顯，并且秋季存在爆發流行的趨勢。

不同年齡段患兒呼吸道病原體的檢測陽性率也存在一定差異，本研究顯示，各年齡段患兒的病原譜不完全一致，但各組中MP感染率均最高，INFB感染率居第2位。1～<3歲、3～<6歲和6～≤14歲這3個年齡段均是MP和INFB高峰發病年齡。而MP陽性率在0～14歲的患兒中隨年齡增加而升高，原因可能是學齡前和學齡期兒童戶外活動增加，大多集中在人群密集的學校，增加了交叉感染的概率。0～<1歲年齡段中病原體檢測陽性率明顯低于其他3個年齡段，該年齡段為嬰兒期，可能與嬰兒從母體中獲取了相當數量的免疫球蛋白，以保護其免受病原微生物的侵襲有一定關系，但也有可能嬰兒免疫功能低下，體內有感染但抗體滴度較低，導致檢測結果呈假陰性[6]。

綜上所述，本研究通過對普洱市兒童呼吸道九聯檢結果進行綜合分析，從而了解到本地區兒童呼吸道感染不同病原體的檢出率、構成等相關流行病學特征，為臨床的診斷和合理治療提供了重要依據和參考，臨床醫生應參考檢測結果，合理使用抗菌藥物，防止因濫用抗菌藥物引起的耐藥。

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The analysis of clinical application on children′s respiratory tract infection pathogens IgM antibody nine-combined detection in Pu′er

LuoDan,ZhangXiaoyang,GaoXiangyang△,ZhouChunhong,WenYuanbang

(DepartmentofClinicalLaboratory,Pu′erPeople′sHospitalAffiliatedtoKunmingUniversityofScienceandTechnology,Pu′er,Yunnan665000,China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the results of children′s respiratory tract infection pathogens IgM antibody nine-combined detection in Pu′er and grasp the epidemiological characteristics of respiratory tract infection of local children for providing reference for clinical diagnosis and treatment.Methods1 327 cases of children′s blood sample with respiratory tract infection were randomly sampled from in Pu′er People′s Hospital in 2014.All the samples were tested with nine respiratory tract infection pathogens IgM antibody detection reagent kit(indirect immunofluorescence),and the test results were adopted for statistical analysis.ResultsThere were 446 cases positive for IgM antibody in 1 327 cases of respiratory tract infection children,the total positive rate was 33.6%.The Positive rate of mycoplasma pneumonia(MP) was the highest,for 23.6%.The second was influenza B virus(INFB),for 18.5%.The eosinophilic lung legionella type 1(LP),adenovirus(ADV),respiratory syncytial virus(RSV),influenza A(INFA) and parainfluenza virus(HPIVs) were all much lower:respectively for 0.4%,1.1%,1.0%,1.1% and 1.0%.It was showed that no positive results were found in Q fever rickettsia(CB) and chlamydia pneumonia(CP).There was significant difference of the positive rate among 9 kinds of pathogens(P<0.05).There was significant difference of the monthly positive rate among the main six pathogens(P<0.05).There was significant difference of the positive rate in the different age groups(P<0.05).ConclusionThe respiratory tract infection pathogens of children in Pu′er are mainly mycoplasma pneumoniae and influenza B virus.The epidemiological distribution of the pathogens is related to the age and season,the clinician should reasonably diagnose and treat according to the test results for children.

Key words:children;respiratory tract infection;nine-combined detection;indirect immunofluorescence

(收稿日期：2015-12-22)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.020

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)09-1205-03

作者簡介：羅丹，女，檢驗技師，主要從事臨床免疫檢驗工作研究。△通訊作者，E-mail：gxxyy68@163.com。