凝血4項指標生物參考區間的實驗室驗證

戴慶忠，覃　瑜，靳元英

(四川省達州市中心醫院，四川達州 635000)

?

·論著·

凝血4項指標生物參考區間的實驗室驗證

戴慶忠，覃瑜，靳元英

(四川省達州市中心醫院，四川達州 635000)

摘要:目的該實驗室使用sysmex CA-7000全自動血凝儀驗證廠家推薦的凝血指標參考區間，并建立適用于該實驗室的生物參考區間。方法運用日本sysmexCA-7000全自動血凝儀對120例健康體檢者進行凝血4項的檢測。結果經驗證廠家提供的凝血4項參考值范圍，凝血酶原時間(PT)、國際標準化比率(INR)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)的r值均大于0.95，表明廠家推薦的參考區間適用于該實驗室，可以繼續使用。FIB r<0.95，需要重新制定本室的FIB參考區間。不同性別間凝血4項結果男性與女性差異無統計學意義(P>0.05)。不同年齡間凝血4項結果差異無統計學意義(P>0.05)。結論凝血4項的測定受特定條件影響較大，為了提高質量控制和規范管理。應該建立該實驗室特定條件下測定的正常參考區間，為臨床提供更精準的檢驗結果。

關鍵詞:凝血酶原時間；活化部分凝血活酶時間；凝血酶時間；纖維蛋白原；參考區間；驗證

凝血4項檢測是臨床上最常規的凝血系統的篩選試驗，凝血4項檢測包括凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)及纖維蛋白原(FIB)，是臨床診斷出血性或血栓性疾病，抗凝血藥物用量監測，療效評估和手術前預測凝血功能的重要指標。對于凝血4項指標的參考值區間，據原衛生部臨床檢驗中心調查約20%的實驗室自行確定參考區間上下限，其他80%的實驗室中大部分是使用檢測試劑或儀器廠家、全國操作規程等提供的參考區間[1]。美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS) C28-A2文件推薦臨床實驗室生物參考區間確立的方法，除建立生物參考區間外，另一個途徑是引用權威書刊、廠家試劑說明書或轉移其他醫院實驗室的生物參考區間并通過驗證。參考范圍是解釋檢驗結果正常與否的重要依據，由于年齡、性別、民族、居住地域、檢驗方法不同等眾多原因引起的差異，因此各實驗室有必要建立自己的參考范圍，簡單地引用文獻或直接采用廠商給定的參考范圍是不合理的[2]。因此，對本科2013年12月新近購買的sysmex CA-7000全自動血凝分析儀，采用NCCLS C28-A2[3]推薦方法先引用權威書刊或廠家提供的生物參考區間，并進行實驗的驗證，對實驗驗證不通過的項目建立新的生物參考區間。

1材料與方法

1.1儀器與試劑本科于2013年底新近購買了1臺sysmex CA-7000全自動血凝分析儀，裝機時，檢測系統由廠家校準及性能驗證后，每天做正常值和高值兩個水平質控均在控。并參加了原衛生部2014年室間質評成績均為優秀；所有試劑均為德國Dade Behring公司配套試劑。

1.2標本來源收集達州市120例健康成人血漿標本，其中男60例，女60例。年齡18～85歲。均為2014年6～12月來本院體檢中心進行體檢的健康體檢者，所選擇研究經查看最終體檢報告篩選各項指標均未見異常改變。按年齡分為3組：(1)Ⅰ組：18～30歲；(2)Ⅱ組31～50歲；(3)Ⅲ組：51～85歲。

1.3標本采集受檢者空腹抽取靜脈血1.8 mL，注入含0．109 mmol/L枸椽酸鈉0．2 mL抗凝管內迅速混勻，以3 000 r/min離心10 min，2 h內完成檢測。

1.4參考范圍驗證用CA-7000全自動血凝分析儀對120例健康體檢者進行PT、APTT、TT、FIB檢測，計算R值(落在參考范圍內的標本數/總的試驗標本數)，要求R>0.95[4]。

2結果

結果見表1～4。

表1　　凝血4項指標男女間性別比較

表2　　凝血4項指標各年齡組比較

表3　　凝血4項指標生物參考區間的確立

表4　　CA-7000全自動血凝儀參考區間驗證結果

3討論

生物參考區間是臨床判斷分析異常與否的標準，也是臨床用來觀察療效的重要依據，實驗室必須保證給臨床提供的生物參考區間正確適用,否則會導致誤診誤治。生物參考區間是解釋檢驗結果是正常還是異常的依據，按照國際化學委員會提出的建立實驗室生物參考區間的方法，要求嚴格，程序復雜，實驗室現行條件自行制定生物參考區間存在難度，尤其是中小型醫院，合格的健康個體來源非常困難。許多實驗室建立的參考區間方法使用《全國檢驗操作規程》提供的參考值，或引用試劑說明書、儀器廠家提供的參考值。據原衛生部臨檢中心調查的結果顯示，約20%的實驗室自行確定參考區間上下限，其他80%的實驗室中大部分是使用檢測試劑或儀器廠家、全國操作規程等提供的參考區間。試劑或儀器廠家提供的參考區間對應的人群可能與各醫院的就醫人群間存在差異，實驗室在使用廠家提供的參考區間之前，有必要進行驗證或評估該區間是否適用。本文通過對達州市120例健康成年人凝血指標檢測結果分析表明，PT、INR、APTT、TT的R值均大于0.95，表明廠家推薦的參考區間可適用于本實驗室。FIB的R值小于0.95，需要重新制定本室的FIB參考區間。對120例健康體檢者的FIB測定結果，采用正態分布法，求FIB的95%參考值的上、下限：FIB的下限值為：平均值-1.96s=2.73-0.494×1.96=1.80；FIB的上限值為：平均值+1.96s=2.73+0.494×1.96=3.70，本實驗室FIB參考區間為1.80～3.70 g/L。達州市120例健康成年人凝血指標檢測結果與試劑廠商提供的參考區間比較，結合本院實際確定本室的參考區間為：PT 9.6 s～12.8 s，INR 0.87～1.15，APTT 21.0～33.3 s，TT 14.9～19.3 s，FIB 1.80～3.70 g/L。此外，性別分組的檢測結果表明男女之間凝血指標各參數值差異無統計學意義(P>0.05)，各年齡組的檢測結果表明各年齡組之間的參數差異亦無統計學意義(P>0.05)，這和相關文獻報道一致[5]。

臨床檢驗對象來源于動態的生物體，生物屬性的差異會帶來生物參考區間的差異，主要是由于年齡、性別、民族、居住地或妊娠等原因引起的差異；檢驗方法的差異，同一項目采用不同的檢測系統/方法也會導致結果的不一致；或統一檢測方法，儀器試劑來源不同，檢驗結果也會產生系統誤差。這可能由于不同的實驗室所用儀器的檢測原理、試劑、地區等因素的不同，其檢測的參考區間亦不同。也可能與各地區所處的地理環境、生活習慣、人群所食用的食物種類及飲用水的水質、工作精神壓力等諸多因素的不同有關。由于凝血4項的測定受特定條件影響較大，為了提高質量控制和規范管理。各實驗室均應根據自己實驗室條件的不同建立自己實驗室的參考區間[6]。因此，在報告結果的同時，應提供本實驗室正常參考區間。

參考文獻

[1]王薇，鐘堃，何法霖，等.2012年全國凝血試驗檢驗項目參考區間現狀調查分析[J]．中華血液學雜志，2015，36(1)：39-42.

[2]中華人民共和國衛生部．臨床實驗室管理辦法[Z]．衛醫發(2006)73號：2006．

[3]National Committeefor Clinical Laboratory.C28-A2 How to Define and Reference Intervals in the Clinical Laboratory[S]．PA,USA:NCCLS，2000．

[4]孔建新，姚麗娟，李潔.CA-7000血凝分析儀性能評估及臨床參考范圍建立[J]．臨床輸血與檢驗，2011，13(3)：240-244.

[5]張德慶.凝血指標正常參考值測定的探討[J]．泰山醫學院學報，2009，30(2)：117-118．

[6]馮厚梅，孫德華，鄭磊，等．Sysmex CA-7000全自動凝血儀性能評價[J]．檢驗醫學，2011，26(1)：58-62.

Laboratory verification of biology reference ranges in four coagulation indexes

DaiQingzhong,QinYu,JinYuanying

(DazhouMunicipalCentralHospital,Dazhou,Sichuan635000,China)

Abstract:ObjectiveTo use the sysmex CA-700 full automatic coagulometer to verify the reference ranges of coagulation index recommended by the manufacturer and to establish the biology reference range suitable for our laboratory.MethodsThe Japanese Sysmex CA-700 full automatic coagulometer was used to detect the four coagulation indicators in 120 individuals undergoing the healthy physical examination.ResultsAfter verifying the reference ranges of four coagulation indexes,the r values of prothrombin time(PT),international standardization ratio(INR),activeated partial prothrombin time(APTT) and thrombin time(TT) all were >0.95,the FIB reference range of our laboratory was needed to establish.The results of four coagulation indicators had no statistical difference between different genders and among different ages(P>0.05).ConclusionThe detection of four coagulation indicators is greatly affected by some specific condition.We should establish normal reference range after testing under specific conditions In order to improve the quality control and standardize the management,the normal reference ranges under the specific condition of our laboratory should be established to provide more accurate detection results.

Key words:prothrombin time;activeated partial prothrombin time;thrombin time;fibrinogen;reference range;verification

(收稿日期：2015-08-12)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.021

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)01-0049-02

作者簡介：戴慶忠，男，研究員，主要從事臨床血液學與檢驗研究。