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泌尿生殖道支原體感染的優(yōu)化檢測方案研究

2016-01-26 01:02:17周運恒陳向明王國江唐群力汪瑞忠周春妹黃聲雷唐振華陸庭嫣瑾0王堅鏹0韓立中肖淑珍胡偉忠顧偉鳴
檢驗醫(yī)學 2015年12期
關(guān)鍵詞:標準化培養(yǎng)

吳 磊, 周運恒, 陳向明, 王國江, 劉 瑛, 陳 峰, 馮 景,唐群力, 汪瑞忠, 房 華, 趙 虎, 方 毅, 周春妹, 黃聲雷, 唐振華,陸庭嫣, 湯 瑾0, 王堅鏹0, 韓立中, 肖淑珍, 胡偉忠, 楊 陽, 顧偉鳴

(1.海市皮膚病醫(yī)院檢驗科,上海 200443;2.武警上海市總隊醫(yī)院檢驗科,上海 201103;3.上海市嘉定區(qū)南翔醫(yī)院性病科,上海 201802;4.上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院檢驗科,上海 200092;5.上海市奉賢區(qū)中心醫(yī)院檢驗科,上海 201499;6.浦東新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,上海 201299; 7.復(fù)旦大學附屬華東醫(yī)院檢驗科,上海 200040;8.復(fù)旦大學附屬中山醫(yī)院檢驗科,上海 200032;9.上海交通大學醫(yī)學院附屬中國福利會國際和平婦幼保健院檢驗科,上海 200030;10.上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院檢驗科,上海 200233;

11.上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院臨床微生物科,上海 200025)

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泌尿生殖道支原體感染的優(yōu)化檢測方案研究

吳磊1,周運恒2,陳向明3,王國江3,劉瑛4,陳峰4,馮景5,唐群力5,汪瑞忠6,房華6,趙虎7,方毅7,周春妹8,黃聲雷8,唐振華9,陸庭嫣9,湯瑾10,王堅鏹10,韓立中11,肖淑珍11,胡偉忠1,楊陽1,顧偉鳴1

(1.海市皮膚病醫(yī)院檢驗科,上海 200443;2.武警上海市總隊醫(yī)院檢驗科,上海 201103;3.上海市嘉定區(qū)南翔醫(yī)院性病科,上海 201802;4.上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院檢驗科,上海 200092;5.上海市奉賢區(qū)中心醫(yī)院檢驗科,上海 201499;6.浦東新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,上海 201299; 7.復(fù)旦大學附屬華東醫(yī)院檢驗科,上海 200040;8.復(fù)旦大學附屬中山醫(yī)院檢驗科,上海 200032;9.上海交通大學醫(yī)學院附屬中國福利會國際和平婦幼保健院檢驗科,上海 200030;10.上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院檢驗科,上海 200233;

11.上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院臨床微生物科,上海 200025)

摘要:目的通過優(yōu)化支原體培養(yǎng)的方法和流程建立新的檢查方案,提高檢測解脲脲原體(Uu)和人型支原體(Mh)感染的準確性。方法優(yōu)化支原體固體和液體組合培養(yǎng)的檢測模式,制定了一套可操作性的標準化實驗方案,遴選11家二級以上醫(yī)療機構(gòu),對隨機入選病例的泌尿生殖道分泌物樣本開展聯(lián)合研究。相關(guān)的實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,評價臨床應(yīng)用前景。結(jié)果747例樣本總體陽性率45.1%(337/747),其中Uu陽性率41.1%(307/747),Mh陽性率13.9%(104/747)。Uu和Mh原始樣本接種的陽性符合率分別為92.6%和94.0%(P均<0.01)。Uu和Mh轉(zhuǎn)種后的陽性符合率分別為97.5%和96.1%(P均>0.05)。液體培養(yǎng)變色后轉(zhuǎn)種提高了固體培養(yǎng)的敏感性。有17例液體培養(yǎng)陽性的樣本經(jīng)過原代和轉(zhuǎn)種2次固體培養(yǎng),均沒有觀察到菌落。固體培養(yǎng)降低了液體培養(yǎng)的假陽性。固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)同時接種樣本,明顯縮短了固體培養(yǎng)的檢測周期。超過85%的支原體在24 h以內(nèi)觀察到菌落,而48 h以內(nèi)固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)的陽性率幾乎沒有差別。結(jié)論以固體和液體組合培養(yǎng)的檢測模式,盡管增加了檢驗成本,但對泌尿生殖道支原體感染的檢測具有更高的敏感性和特異性,新檢測方案可以在臨床推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞:支原體;解脲脲原體;人型支原體;培養(yǎng);檢測方法;標準化

支原體是一種能在無生命培養(yǎng)基上繁殖的最小原核細胞型微生物[1]。解脲脲原體(ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原體(mycoplasma hominis,Mh)是引起泌尿生殖道感染的常見病原體[1-3],可以在性伴之間傳播,孕婦通過產(chǎn)道傳染給后代[1,3]。

全國醫(yī)院普遍開展Uu和Mh的常規(guī)檢測,幾乎均采用液體培養(yǎng)方法[4-6]。其檢測原理基于Uu和Mh分別利用液體培養(yǎng)基中的尿素和精氨酸,分解后產(chǎn)氨和二氧化碳,含酚紅指示劑的培養(yǎng)液隨著pH值升高而由黃色變紅色,據(jù)此來判斷是否有支原體生長[1,7]。實際上,這是利用微生物生物化學反應(yīng)來達到檢測目的。這種檢測方法和程序違反微生物生化實驗的基本原則:必須分純菌株。泌尿生殖道內(nèi)含有多種定植微生物,呈優(yōu)勢生長的條件致病菌或分泌物由于受外用藥物污染等因素影響,樣本接種到液體培養(yǎng)基內(nèi)會導(dǎo)致pH值增高或降低,前者造成假陽性,后者造成假陰性。當單獨使用Uu-Mh混合液體培養(yǎng)基,無法僅通過液體培養(yǎng)瓶的顏色變化來分辨Uu和Mh。當將液化的精液樣本直接加入液體培養(yǎng)瓶,可立刻看到顏色變紅。另外,液體培養(yǎng)方法微孔鑒定藥物敏感性的結(jié)果存在較大爭議:當Uu和Mh合并感染時,無法區(qū)分是哪種支原體的藥物敏感性結(jié)果。

經(jīng)典的固體培養(yǎng)法通過低倍顯微鏡直接觀察到支原體形態(tài),是實驗診斷的金標準方法。但是固體培養(yǎng)也存在檢測周期長、不宜觀察結(jié)果等因素[5],國內(nèi)僅少數(shù)實驗室開展檢測[4-6]。實驗方法學研究發(fā)現(xiàn),雖然固體培養(yǎng)法特異性較高,一些操作技術(shù)和檢測流程等原因也可降低敏感性[5]。單獨進行固體或液體培養(yǎng)的缺陷問題已成為影響檢測質(zhì)量的重要因素。

本研究旨在通過固體和液體的組合培養(yǎng)觀察Uu和Mh的生長規(guī)律,評估聯(lián)合培養(yǎng)在檢測中的價值,改善泌尿生殖道Uu和Mh感染的實驗室檢測方法和流程,同時對優(yōu)化方案進行應(yīng)用性推廣研究。

材料和方法

一、參與機構(gòu)

上海市二級及以上地方和部隊的11家醫(yī)院:上海市皮膚病醫(yī)院、武警上海市總隊醫(yī)院、上海市嘉定區(qū)南翔醫(yī)院、上海交通大學醫(yī)學院附屬新華醫(yī)院、上海市奉賢區(qū)中心醫(yī)院、浦東新區(qū)人民醫(yī)院、復(fù)旦大學附屬華東醫(yī)院、復(fù)旦大學附屬中山醫(yī)院、上海交通大學醫(yī)學院附屬中國福利會國際和平婦幼保健院、上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院和上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院聯(lián)合參與研究,各醫(yī)院均參加了歷年上海市支原體培養(yǎng)的室間質(zhì)評,成績均為優(yōu)秀。本研究按照固體和液體組合培養(yǎng)的實驗方法和檢測程序,對泌尿生殖道分泌物樣本進行支原體檢測。

二、研究對象和排除標準

選擇2015年7至8月在11家醫(yī)院性病門診和不孕不育門診的就診者為研究對象,排除無性行為能力的人群,采樣前2周內(nèi)無抗菌藥物使用史,女性在非懷孕和月經(jīng)期。

三、檢測試劑

眾愛生河北生物科技有限公司生產(chǎn)的Uu和Mh選擇分離培養(yǎng)、鑒定、藥物敏感性試劑盒(冀食藥監(jiān)械2012第2400018號,批號1506103)。Uu和Mh的選擇分離培養(yǎng)固體培養(yǎng)基(冀邢食藥監(jiān)械2013第1400002號,批號1506205)。

四、方法

1. 樣本采集男性采集尿道分泌物樣本,采集樣本前2 h禁尿,用尿道專用無菌棉拭子伸入男性尿道口2 cm,輕輕轉(zhuǎn)動并停留30 s后取出備用。女性采集宮頸分泌物樣本,先用無菌拭子擦去宮頸口外溢的黏液后,用1根新的女性采樣拭子插入宮頸口1~2 cm,輕輕轉(zhuǎn)動并停留30 s后取出備用。

2. 樣本接種(1)原始樣本的固體培養(yǎng)基接種:拭子頂端輕輕地在固體培養(yǎng)基表面按照曲線方式進行劃種。(2)轉(zhuǎn)種樣本的固體培養(yǎng)基接種:從剛剛變色液體培養(yǎng)基中吸取約10 μL,滴種在固體培養(yǎng)基上。(3)原始樣本的液體培養(yǎng)基接種:將剛剛劃種固體培養(yǎng)基的拭子投入液體培養(yǎng)基中,充分攪拌20 s,靜置15 min后,按照說明書接種到微孔鑒定板,再滴加液狀石蠟油。

3. 培養(yǎng)條件使用 CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng),培養(yǎng)溫度(36±1 ℃),培養(yǎng)箱底部有水盒保持濕度。待固體培養(yǎng)基表面無液體流動后翻轉(zhuǎn)接種面,隨液體培養(yǎng)基同時放入培養(yǎng)箱。

4. 觀察和處理接種樣本后,從次日起每天8∶30和16∶00 2次觀察培養(yǎng)情況,每次觀察結(jié)果都在實驗記錄表中逐項填寫記錄,至72 h,避免滯后生長菌株漏檢。首先觀察液體/微孔板/固體培養(yǎng)后顏色是否改變;其次觀察液體/微孔板培養(yǎng)的濁度和沉淀狀態(tài);最后用10倍物鏡觀察固體培養(yǎng)基上菌落,沿著劃種/滴種痕跡至少連續(xù)觀察5個視野。當液體瓶/微孔板培養(yǎng)物發(fā)生變色,固體培養(yǎng)基中沒有菌落生長和/或顏色改變,立即取10 μL液體培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種1塊新的固體培養(yǎng)基。

5. 結(jié)果判斷以固體培養(yǎng)基菌落生長特征為主要診斷依據(jù),參考液體/微孔板培養(yǎng)顏色變化,給出Uu和/或Mh生長報告。顯微鏡下觀察到典型菌落:棕褐色顆粒/褐色海膽樣菌落為Uu;煎蛋樣菌落為Mh。培養(yǎng)液體由黃色變?yōu)榧t色且澄清透明者為疑似支原體陽性。

6. 質(zhì)量控制所有參與研究的人員進行實驗操作和數(shù)據(jù)記錄的培訓,并且共同探討和決定最終的可行性研究方案。

五、統(tǒng)計學方法

患者信息及實驗記錄輸入Excel表,導(dǎo)入SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計分析,采用配對χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié)果

一、 一般情況

共計入選病例747例,年齡17~72歲(平均33歲)。其中男305例,女442例(男女比為1∶1.45)。

二、總體檢出情況

按照研究方案確定的判斷標準,固體培養(yǎng)支原體總體陽性率45.1%(337/747),其中Uu陽性率41.1%(307/747),Mh陽性率13.9%(104/747)。液體培養(yǎng)瓶和微孔鑒定板顏色改變疑似陽性率45.7%(342/747),其中Uu疑似陽性率42.2%(315/747),Mh疑似陽性率15.0%(112/747),Uu+Mh疑似陽性率11.5%(86/747)。

三、固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)檢測比較

按照研究方案遇到固體未見菌落生長而液體培養(yǎng)發(fā)生顏色改變的情況,需要將液體及時轉(zhuǎn)種1塊新的固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)原始樣本接種Uu和Mh陽性符合率分別為92.6%和94.0%,二者差異有統(tǒng)計學意義(χ2=43.65、13.89,P均<0.01)。固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)Uu和Mh轉(zhuǎn)種后的陽性符合率分別為97.5%和96.1%,二者差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.89、1.24,P均>0.05)。

四、固體培養(yǎng)基、液體瓶和液體微孔鑒定板檢測的結(jié)果比較

檢測發(fā)現(xiàn)共有22例樣本液體瓶發(fā)生顏色改變,而微孔鑒定板沒有發(fā)生顏色變化,其中有17例(男4例,女13例)樣本固體培養(yǎng)未見菌落,5例樣本在轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)后看到菌落,2例在原始固體培養(yǎng)和轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)看到菌落。見表1。培養(yǎng)現(xiàn)象見圖1~圖3。

表1 固體培養(yǎng)基、液體瓶和液體微孔鑒定板檢測不一致結(jié)果

注:(a)為陰性對照;(b)為觀察到Uu、Mh菌落的固體培養(yǎng);(c)為液體瓶疑似陽性(培養(yǎng)時間短,剛剛變色);(d)為微孔鑒定板條

圖1固體和液體培養(yǎng)24 h的外觀

注:(a)為陰性對照;(b)為觀察到Uu、Mh菌落的固體培養(yǎng);(c)為液體瓶疑似陽性(培養(yǎng)時間長,變色變深);(d)為微孔鑒定板條

圖2固體和液體培養(yǎng)48 h的外觀

五、支原體檢測周期

按照研究方案所有檢測應(yīng)觀察至72 h。固體培養(yǎng)生長菌落的樣本中,在24 h以內(nèi)生長的Uu和Mh分別是93.1%和85.4%,在24~48 h生長的分別是6.9%和12.5%,在48 h后生長的分別是0.0%和2.0%。液體培養(yǎng)的樣本中,在24 h以內(nèi)發(fā)生顏色改變的Uu和Mh分別是97.9%和93.8%,在24~48 h變色的分別是21.4%和5.3%,在48 h后生長的分別是0.6%和0.9%。

注:10倍物鏡下Uu和Mh觀察結(jié)果;固體瓊脂從淺黃色變成淺紅色提示有支原體生長,背景有雜質(zhì)提示是原始樣本接種

圖3原始樣本接種固體培養(yǎng)基顯微鏡下結(jié)果

討論

泌尿生殖道支原體感染的常規(guī)檢測存在不夠完善的問題[4-8]。我們依靠上海市性病檢測質(zhì)量控制的管理平臺,經(jīng)過長期的生物學和方法學的比較研究,匯聚專家意見后制定了泌尿生殖道支原體感染的常規(guī)檢測標準化方案,在11家二級以上醫(yī)院進行應(yīng)用性研究。該方案的主要特點:(1)檢測方法是液體和固體聯(lián)合的模式;(2)固體培養(yǎng)觀察到菌落作為主要診斷依據(jù),液體培養(yǎng)顏色改變和濁度情況作為輔助參考依據(jù);(3)檢測程序是樣本同步接種固體和液體培養(yǎng)基,當液體培養(yǎng)變色而固體未見菌落時,取液體培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)基;(4)由于轉(zhuǎn)種時不需要過濾,減少了操作環(huán)節(jié)和降低了成本。新方案的優(yōu)勢在于液體培養(yǎng)在抑制雜菌的同時也支持支原體增殖,提高了檢測敏感性,降低雜菌污染,轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)基顯示背景雜質(zhì)少,菌落清晰。固體培養(yǎng)可以通過觀察典型菌落形態(tài)而提高特異性。另外,固體培養(yǎng)可以識別菌落形態(tài)的多態(tài)性,通過獲得分純菌株開展后續(xù)研究,加深理解支原體感染與疾病的相互關(guān)系。

用固體和液體組合方法針對性病和不孕不育門診高危感染人群的檢測,Uu和Mh總感染率分

別是41.1%和13.9%。固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)同步接種樣本,明顯縮短了固體培養(yǎng)的檢測周期。本研究用固體培養(yǎng)時,超過85%的支原體在24 h以內(nèi)觀察到菌落,僅比液體培養(yǎng)低了約8%比例,而48 h以內(nèi)固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)的陽性率幾乎沒有差別,見圖1和圖2。

固體培養(yǎng)與液體培養(yǎng)組合檢測提高了檢測的準確性。液體培養(yǎng)顏色改變可以通過固體培養(yǎng)基表面觀察典型菌落而得到確證。大部分原始接種樣本,Uu和Mh的固體與液體培養(yǎng)同時出現(xiàn)了陽性,但是固體培養(yǎng)敏感性較低,導(dǎo)致與液體培養(yǎng)陽性率差異有統(tǒng)計學意義。鑒于高pH值的培養(yǎng)液不利于支原體存活,我們研究方案中強調(diào)了液體顏色改變后必須立刻轉(zhuǎn)種的要求。將液體培養(yǎng)轉(zhuǎn)種后,固體與液體培養(yǎng)的陽性率差異無統(tǒng)計學意義,說明液體培養(yǎng)變色后轉(zhuǎn)種固體可以提高檢測的敏感性。有報道液體培養(yǎng)有較高的假陽性率[6],本研究結(jié)果顯示有17例樣本液體培養(yǎng)疑似陽性結(jié)果,在經(jīng)過原代和轉(zhuǎn)種2次固體培養(yǎng),均沒有觀察到菌落。這個結(jié)果有2種提示:固體培養(yǎng)可以降低液體培養(yǎng)假陽性的發(fā)生;單獨使用液體瓶進行檢測會有更高的假陽性。

培養(yǎng)基的質(zhì)量會影響檢測結(jié)果。在中國食品和藥品管理局網(wǎng)站上查詢到僅有幾家符合商品化要求的同一體系固體和液體組合的培養(yǎng)基產(chǎn)品。從預(yù)先實驗階段的比對數(shù)據(jù)看,采用Uu (ATCC 27813)和 Mh (ATCC 23114)做質(zhì)控,該產(chǎn)品與法國梅里埃的配套固體和液體組合培養(yǎng)基的檢測性能基本一致。該國產(chǎn)商品培養(yǎng)基還有2個特性:固體培養(yǎng)會改變顏色提示有支原體生長,見圖3。液體培養(yǎng)變色時間較梅里埃公司產(chǎn)品延緩8 h,恰好給液體培養(yǎng)的支原體贏得了更長的存活時間,提高了轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)的陽性率。另外,該固體培養(yǎng)基試劑盒還提供CO2化學發(fā)生片,給基層醫(yī)院開展檢測提供了方便。固體和液體組合培養(yǎng)的模式會增加直接成本,但是降低了由于誤診帶來的更大間接成本,我們不應(yīng)只關(guān)注成本而給患者帶來質(zhì)量風險。總之,固體和液體組合培養(yǎng)的檢測模式,對泌尿生殖道支原體感染的檢測具有更高的敏感性和特異性。固體和液體同步接種樣本,可以提高固體培養(yǎng)的檢測效率。對液體培養(yǎng)疑似假陽性的樣本及時轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)基,兼具降低假陽性和漏診的風險。技術(shù)人員經(jīng)過簡短的培訓,控制影響檢測質(zhì)量的操作環(huán)節(jié),新檢測方案可以投入臨床應(yīng)用,希望本方案能在同行的臨床實踐中加以完善。

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(本文編輯:范基農(nóng))

注:吳磊與周運恒對本研究具有同等貢獻,并列為第一作者。

Research on the modification detection scheme for mycoplasma infection of genitourinary tractWULei1,ZHOUYunheng2,CHENXiangming3,WANGGuojiang3,LIUYing4,CHENFeng4,F(xiàn)ENGJing5,TANGQunli5,WANGRuizhong6,F(xiàn)ANGHua6,ZHAOHu7,F(xiàn)ANGYi7,ZHOUChunmei8,HUANGShenglei8,TANGZhenhua9,LUTingyan9,TANGJin10,WANGJianqiang10,HANLizhong11,XIAOShuzhen11,HUWeizhong1,YANGYang1,GUWeiming1.(1.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiDermatologyHospital,Shanghai200443,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiCropsHospitalofChinesePeople′sArmedPolice,Shanghai201103,China; 3.DepartmentofVenereology,ShanghaiJadingNanxiangHospital,Shanghai201802,China; 4.DepartmentofClinicalLaboratory,XinhuaHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200092,China; 5.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiFengxianDistrictCentralHospital,Shanghai201499,China; 6.DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiPudongNewAreaPeople′sHospital,Shanghai201299,China; 7.DepartmentofClinicalLaboratory,HuadongHospital,F(xiàn)udanUniversity,Shanghai200040,China; 8.DepartmentofClinicalLaboratory,ZhongshanHospital,F(xiàn)udanUniversity,Shanghai200032,China; 9.DepartmentofClinicalLaboratory,theInternationalPeaceMaternityandChildHealthHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200030,China; 10.DepartmentofClinicalLaboratory,theSixthPeople′sHospitalAffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200233,China; 11.DepartmentofOrganism,RuijinHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200025,China)

Abstract:ObjectiveTo optimize culture methods and processes for mycoplasma and to establish a new scheme to improve the detection accuracy of ureaplasma urealyticum (Uu) and mycoplasma hominis (Mh) infections. MethodsA practical standard laboratory procedure was established, and the models of mycoplasma culture in solid and liquid cultures were optimized. A total of 11 hospitals above Grade 2 in Shanghai participated in the study. Study cases were randomly selected, and genitourinary samples were determined. Statistical analysis was performed, and the clinical application of the procedure was evaluated. ResultsA total of 747 samples were collected. The overall positive rate was 45.1% (337/747), for Uu 41.1% (307/747) and for Mh 13.9% (104/747). The positive coincidence percentages of original sample inoculation were 92.6% and 94.0% (P<0.01), respectively. The positive coincidence percentages after transmission inoculation were 97.5% and 96.1% (P>0.05). The sensitivity of solid culture was improved when culture was transferred from liquid culture with color changes. A total of 17 liquid culture samples did not produce any colonies on the solid culture, and even the solid culture was passed twice. This indicated that solid culture decreased the false positivity in liquid culture. The determination time reduced significantly when solid and liquid cultures were performed simultaneously. Over 85% mycoplasma samples had colony formation within 24 h, and in 48 h liquid culture and solid culture had same positive percentage. ConclusionsThe combination of liquid culture and solid culture of mycoplasma produces high sensitivity and specificity, although the costs of the testing increase. This combination determination procedure should be recommended in the laboratory diagnosis of mycoplasma infections.

Key words:Mycoplasma; Ureaplasma urealyticum; Mycoplasma hominis; Culture; Determination method; Standardization

收稿日期:(2015-08-25)

通訊作者:顧偉鳴,聯(lián)系電話:021-61833177。

作者簡介:吳磊,男,1978年生,碩士,主管技師,主要從事性病檢測方法學研究。

基金項目:上海市自然科學基金資助項目(06ZR14074);吳階平醫(yī)學基金會資助項目(320.6750.13233)

中圖分類號:

文章編號:1673-8640(2015)12-1214-05R446.11

文獻標志碼:A

DOI:10.3969/j.issn.1673-8640.2015.12.012

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