血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子對胃癌樹突狀細(xì)胞作用的研究進(jìn)展

鄭小華++何守搞

【關(guān)鍵詞】血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子；樹突狀細(xì)胞；胃癌

中圖分類號：R735.2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2016.04.021

胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)生率與死亡率趨勢有所增加[1]。胃癌的發(fā)病率及死亡率嚴(yán)重威脅人類健康，因此對胃癌早期診斷及探索新的輔助療法成為科學(xué)研究的重點。樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）可通過誘導(dǎo)免疫應(yīng)答或者免疫耐受對宿主免疫反應(yīng)起著關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在多種腫瘤組織高表達(dá)，可通過調(diào)節(jié)血管和淋巴管生成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移。大量研究證明，其還具有免疫調(diào)節(jié)功能，可通過下調(diào)DC功能而促進(jìn)免疫逃逸的發(fā)生[2]。為闡明VEGF與DC在胃癌中的作用機(jī)制，筆者就近年來VEGF對胃癌DC作用的相關(guān)研究進(jìn)展作如下綜述。

1DC的特性與生物學(xué)功能

樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）起源于骨髓CD34+造血祖細(xì)胞，在各種細(xì)胞因子的作用下分化為DC前體細(xì)胞、未成熟DC、成熟DC。從骨髓來源的DC前體細(xì)胞，在各種因素的刺激下分化為未成熟的DC，它攝取、處理抗原的能力很強(qiáng)。未成熟DC在攝取加工抗原或接受某些刺激因素后隨之分化為成熟DC。成熟的DC能高表達(dá)表面成熟標(biāo)志分子CD83及細(xì)胞表面輔助分子如人類白細(xì)胞抗原HLADR、CD80、CD86等。成熟的DC處理抗原能力較弱，其主要功能是抗原提呈作用，被認(rèn)為是體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞（antigenpresenting cell，APC）。成熟的CD將抗原呈遞給初始T淋巴細(xì)胞，經(jīng)DC刺激后，初始的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞分化為不同功能的特異性效應(yīng)T細(xì)胞。DC還可刺激自然免疫系統(tǒng)中的相關(guān)細(xì)胞， 例如自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及肥大細(xì)胞等[3]。DC亦可通過與B淋巴細(xì)胞相互作用或間接誘導(dǎo)CD4+ T輔助T細(xì)胞增殖分化。這些起關(guān)鍵作用的DC，激活了細(xì)胞免疫和T細(xì)胞依賴的體液免疫，在機(jī)體免疫反應(yīng)的啟動和調(diào)控中起著重要的作用[4]。

2VEGF的蛋白結(jié)構(gòu)及其功能

VEGF屬于VEGF家族，通常又稱為VEGFA，其家族成員還包括胎盤生長因子（placenta growth factor，PlGF）、VEGFB、VEGFC、VEGFD、VEGFE。VEGFA 基因是一分子量為35 kD～46 kD同型二聚體的高度糖基化的堿性蛋白，位于 6p21.3， 全長 28 kb， 編碼 VEGFA 的基因約14 kb， 由 8 個外顯子和 7 個內(nèi)含子組成。其同源受體有三種酪氨酸激酶受體，即VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3。VEGFA、VEGFB 和 PGF可結(jié)合VEGFR1；VEGF主要激活VEGFR2；VEGFC 和 VEGFD 激活VEGFR3。VEGF家族成員與不同的受體結(jié)合引起一系列的信號傳導(dǎo)，能特異性地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖及遷移， 刺激腫瘤血管生成，在腫瘤形成過程中起重要作用。尤其是VEGFR2通常限于血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，并且被廣泛地認(rèn)為是驅(qū)動的血管生成的主要受體[5]。VEGF及其受體的高表達(dá)與胃癌患者的病理類型、浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、血管密度（MVD）、預(yù)后差呈正相關(guān)[6]。

3VEGF對DC功能的影響

3.1VEGF抑制DC的成熟與分化

大量實驗證實VEGF作為腫瘤分泌的免疫抑制因子，抑制DC的分化與成熟，影響其抗原遞呈功能。DC表面有VEGFR受體的表達(dá)，VEGF對CD34+造血干細(xì)胞向DC的分化具有強(qiáng)烈的抑制作用， 其可能的機(jī)制之一是由于VEGF抑制了NFκB信號通路而發(fā)揮阻礙DC的作用，進(jìn)而影響細(xì)胞毒性T細(xì)胞的擴(kuò)增、活化及對腫瘤細(xì)胞殺傷作用的敏感性，這一系列連鎖反應(yīng)促使免疫逃逸的發(fā)生。高度侵襲性黑色素瘤內(nèi)的DC功能障礙與轉(zhuǎn)化生長因子β1 （transforming growth factorβ1，TGFβ1）和VEGF等可溶性因子作用相關(guān)，而敲除其中的某一個可溶性因子可部分恢復(fù)脾臟內(nèi)DC的功能[7]。有研究指出[8]，腫瘤分泌的免疫抑制因子（IL6，TGFβ1，IL10和VEGF）可下調(diào)DC表面的共刺激的分子CD80、CD86的表達(dá)，誘導(dǎo)APC耐受性表型。腫瘤分泌的上述因子使CD的交叉呈遞能力受損，進(jìn)一步抑制腫瘤特異性CD8+CTL的活化和細(xì)胞毒性的功能，機(jī)體的免疫細(xì)胞便不能識別腫瘤細(xì)胞表面的抗原，促使腫瘤細(xì)胞不斷增殖并向惡性方向發(fā)展[9]。在DC培養(yǎng)液中加入不同的VEGF和LPS（脂多糖，DC誘導(dǎo)劑），通過流式細(xì)胞技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)DC表面成熟標(biāo)記分子CD80，CD83和CD86的表達(dá)水平前者顯著低于后者，提示異常表達(dá)的VEGF影響了不同表型的DC分布[10]。上述研究結(jié)果佐證了目前許多學(xué)者的觀點，他們認(rèn)為宿主DC功能缺陷的主要原因是腫瘤細(xì)胞釋放的免疫抑制因子作用于DC，改變了其表面分子的表達(dá)，DC便不能正常識別腫瘤抗原及誘發(fā)機(jī)體抗腫瘤的免疫效應(yīng)。總之DC的成熟及分化與腫瘤微環(huán)境的抑制或激活信號的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)調(diào)控緊密相關(guān)，異常調(diào)節(jié)DC可能會導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸的發(fā)生。

3.2VEGF相關(guān)信號通道對DC功能的影響

STAT3是一種具有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄因子雙功能的蛋白，許多研究證明STAT3不僅促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，而且還調(diào)控腫瘤血管生成和誘發(fā)機(jī)體免疫耐受。STAT3過度磷酸化使DC分化成熟障礙[11]。Hong CH等[12]在砷誘導(dǎo)的皮膚癌的研究中發(fā)現(xiàn)，砷誘導(dǎo)STAT3活化和角化細(xì)胞產(chǎn)生VEGF，同時DC的免疫應(yīng)答作用受到抑制，說明STAT3VEGF信號通道可能參與調(diào)控DC的成熟與分化。在低氧條件下缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）能增加下游產(chǎn)物VEGF基因的轉(zhuǎn)錄。Garufi A等[13]在結(jié)腸癌細(xì)胞中加入HIF1的激活阻滯劑（鋅處理劑），可下調(diào)COX2的表達(dá)及抑制其下游產(chǎn)物 PGE（2）/VEGF的產(chǎn)生，同時DC表面共刺激分子CD80和CD86表達(dá)上升，DC的免疫作用又得到恢復(fù)。提示HIF1可能介導(dǎo)COX2PGE（2）/VEGF信號軸調(diào)控DC表面分子的表達(dá)。TGFβ1可直接刺激VEGF的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤新生血管的生成、腫瘤的增殖和遷徙。Novitskiy SV[14]在TGFβ1受體TGFBR2缺失的小鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)該鼠瘤組織中DC抗原提呈作用增加了，并刺激產(chǎn)生大量的抗原特異性T細(xì)胞，而 VEGF的表達(dá)量明顯下降，說明DC功能的發(fā)揮可能受TGFβ1TGFBR2VEGF信號軸的調(diào)控。

4VEGF與DC在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的關(guān)系

胃癌的發(fā)生涉及多方面因素，包括：環(huán)境因素、宿主基因突變或缺失、腫瘤干細(xì)胞異常表達(dá)及腫瘤免疫抑制等因素相互作用的結(jié)果。正常情況下機(jī)體免疫系統(tǒng)可以殺死衰老和腫瘤細(xì)胞，其中DC能識別腫瘤細(xì)胞表面抗原并將之呈遞給T細(xì)胞，從而誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的發(fā)生，但腫瘤微環(huán)境內(nèi)存在許多抑制免疫的因素。諸如VEGF基因的過度表達(dá)就是其中的因素之一。VEGF和DC在胃癌發(fā)病的分子機(jī)制是目前研究熱點之一。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，一方面VEGF促進(jìn)腫瘤血管形成進(jìn)而為腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲提供營養(yǎng)；另一方面VEGF通過影響DC的成熟與分化而抑制機(jī)體免疫應(yīng)答。楊峰等人[15]研究147例胃癌患者發(fā)現(xiàn)，VEGF在胃癌組織的表達(dá)明顯高于癌旁組織，而胃癌組織中DC的浸潤密度低于癌旁組織，兩者呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。胃癌侵襲深度、TNM分期與VEGF的高表達(dá)呈正相關(guān)，但與DC表面分子S100表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)[16]。與胃癌腹膜轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的M2型巨噬細(xì)胞高表達(dá)VEGF，而DC表面的CD80，CD86 分子呈低表達(dá)[17]。Wang Z等[18]發(fā)現(xiàn)胃癌術(shù)后患者血清中細(xì)胞因子IL6、IL10和VEGF的表達(dá)水平較術(shù)前明顯降低；同時術(shù)后患者外周血中免疫細(xì)胞如DC、CD4+、NK細(xì)胞比例升高。Shi Y等[19]構(gòu)建缺乏免疫功能的小鼠胃癌細(xì)胞（MFC）模型，在該研究中發(fā)現(xiàn)MFC細(xì)胞的上清液可抑制LPS誘導(dǎo)的DC的成熟和交叉呈遞作用，敲除VEGF基因表達(dá)的子代MFC細(xì)胞其免疫功能得到恢復(fù)，大大削弱了小鼠MFC細(xì)胞的致瘤性，小鼠的生存性也得到了顯著的改善。上述研究結(jié)果提示腫瘤微環(huán)境內(nèi)高濃度VEGF的表達(dá)可通過抑制DC的成熟、分化，使機(jī)體免疫反應(yīng)不能正常進(jìn)行。而腫瘤微環(huán)境改變后機(jī)體免疫功能的恢復(fù)可能是通過VEGF等免疫抑制因子表達(dá)下調(diào)，成熟DC誘發(fā)一系列新的免疫反應(yīng)而實現(xiàn)的。總之，VEGF對DC的調(diào)控作用與胃癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，兩者在胃癌治療上的應(yīng)用有很好的前景。

5VEGF的靶向治療及DC疫苗在胃癌治療的應(yīng)用前景

目前單克隆抗體、酪氨酸激酶、VEGF 捕捉物以及重組人血管內(nèi)皮抑制素等已成為抗腫瘤血管生成的主要藥物。這些藥物在臨床治療中取得一定成效，但也出現(xiàn)不良反應(yīng)及某些強(qiáng)效的VEGF抑制劑可能會增加腫瘤缺氧，影響抗腫瘤免疫力的發(fā)揮[20]。為解決這些問題，開發(fā)新的藥物，合理有效地搭配其他治療方案是我們急需解決的問題。國外學(xué)者也在積極探索新型抗腫瘤血管生成藥。Wang W 等[21]報道的新型的索拉非尼衍生物（DCT015）被認(rèn)為是治療胃癌的一種很有前途的抗癌藥物，它可下調(diào)VEGF誘導(dǎo)VEGFR2磷酸化及降低下游關(guān)鍵蛋白的磷酸化，進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)凋亡、抑制內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管形成。Du Four S等[22]對阿西替尼在小鼠黑色素瘤模型的研究中發(fā)現(xiàn)其處理后瘤塊表面積縮小，小鼠脾內(nèi)T細(xì)胞顯著增加，特別是增加CD8+細(xì)胞的數(shù)量及DC成熟標(biāo)記物CD80 的表達(dá)，這說明阿西替尼既有抗腫瘤血管生成，又有調(diào)節(jié)免疫的作用。研發(fā)此類新型藥物將在胃癌治療中發(fā)揮更好的作用。近年來，DC疫苗與傳統(tǒng)方法聯(lián)合應(yīng)用是一種新的治療方法。DC和細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinducedkiller，CIK）構(gòu)成的免疫治療方案在胃癌術(shù)后患者的治療中取得了療效，其機(jī)制是DC分泌IL2、IL12、IFRγ等細(xì)胞因子，促進(jìn)CIK增殖，顯著提高CIK細(xì)胞的殺瘤活性[23]。使用該療法后的胃癌患者血清CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比例均升高[24]。該療法聯(lián)合常規(guī)化療有抗腫瘤血管生成，抑制腫瘤增殖信號通道，且與化療藥物起到療效協(xié)同作用，減少耐藥的發(fā)生[25]。另外選擇特異的抗原負(fù)載DC以誘導(dǎo)機(jī)體免疫抗腫瘤效應(yīng)是當(dāng)前研究的熱點。Li C等[26]制成能與腫瘤細(xì)胞融合的同種異體DC疫苗聯(lián)合細(xì)胞因子的療法可誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）生成和增強(qiáng)胃癌免疫治療功效。Lin等[27]基于黑色素瘤抗原基因3（melanoma antigenencoding gene3， MAGE3）在胃癌中高表達(dá)，構(gòu)建攜帶AGEA3基因的慢病毒載體（LVS），轉(zhuǎn)導(dǎo)DC后穩(wěn)定表達(dá)MAGEA3和較高表達(dá)CD80、CD86和HLADR細(xì)胞的比例，同時誘導(dǎo)CTL，結(jié)果提示用抗原轉(zhuǎn)導(dǎo)的DC可獲得特異性抗腫瘤反應(yīng)，這種方法將在胃癌治療和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有著巨大的潛力。總之探索和研發(fā)抗腫瘤血管生成的新藥物、特異的DC疫苗及合理的治療方案，對提高療效，減少藥物不良反應(yīng)，提高患者的生存期有很大的價值。

6總結(jié)與展望

腫瘤微環(huán)境通過分泌VEGF等免疫抑制因子來抑制DC的活性，從而介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的發(fā)生，但其具體分子調(diào)控機(jī)制期待深入研究。研究者們在以VEGF為靶點的抗腫瘤血管生成和DC 疫苗為基礎(chǔ)的抗腫瘤免疫治療方面進(jìn)行了大量探索，也在胃癌治療中取得一定成果。但對晚期胃癌治療效果仍未取得突破性進(jìn)展，新的治療策略需綜合考慮患者自身遺傳學(xué)背景和腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性，化療、分子靶向藥物及多靶向藥物聯(lián)合治療起到相輔相成作用，這種醫(yī)治策略將會成為一種新的趨向。

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（收稿日期：2016-06-19修回日期：2016-08-09）

（編輯：梁明佩）

鄭小華 何守搞

【關(guān)鍵詞】血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子；樹突狀細(xì)胞；胃癌

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胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)生率與死亡率趨勢有所增加[1]。胃癌的發(fā)病率及死亡率嚴(yán)重威脅人類健康，因此對胃癌早期診斷及探索新的輔助療法成為科學(xué)研究的重點。樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）可通過誘導(dǎo)免疫應(yīng)答或者免疫耐受對宿主免疫反應(yīng)起著關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在多種腫瘤組織高表達(dá)，可通過調(diào)節(jié)血管和淋巴管生成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移。大量研究證明，其還具有免疫調(diào)節(jié)功能，可通過下調(diào)DC功能而促進(jìn)免疫逃逸的發(fā)生[2]。為闡明VEGF與DC在胃癌中的作用機(jī)制，筆者就近年來VEGF對胃癌DC作用的相關(guān)研究進(jìn)展作如下綜述。

1DC的特性與生物學(xué)功能

樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）起源于骨髓CD34+造血祖細(xì)胞，在各種細(xì)胞因子的作用下分化為DC前體細(xì)胞、未成熟DC、成熟DC。從骨髓來源的DC前體細(xì)胞，在各種因素的刺激下分化為未成熟的DC，它攝取、處理抗原的能力很強(qiáng)。未成熟DC在攝取加工抗原或接受某些刺激因素后隨之分化為成熟DC。成熟的DC能高表達(dá)表面成熟標(biāo)志分子CD83及細(xì)胞表面輔助分子如人類白細(xì)胞抗原HLADR、CD80、CD86等。成熟的DC處理抗原能力較弱，其主要功能是抗原提呈作用，被認(rèn)為是體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞（antigenpresenting cell，APC）。成熟的CD將抗原呈遞給初始T淋巴細(xì)胞，經(jīng)DC刺激后，初始的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞分化為不同功能的特異性效應(yīng)T細(xì)胞。DC還可刺激自然免疫系統(tǒng)中的相關(guān)細(xì)胞， 例如自然殺傷細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及肥大細(xì)胞等[3]。DC亦可通過與B淋巴細(xì)胞相互作用或間接誘導(dǎo)CD4+ T輔助T細(xì)胞增殖分化。這些起關(guān)鍵作用的DC，激活了細(xì)胞免疫和T細(xì)胞依賴的體液免疫，在機(jī)體免疫反應(yīng)的啟動和調(diào)控中起著重要的作用[4]。

2VEGF的蛋白結(jié)構(gòu)及其功能

VEGF屬于VEGF家族，通常又稱為VEGFA，其家族成員還包括胎盤生長因子（placenta growth factor，PlGF）、VEGFB、VEGFC、VEGFD、VEGFE。VEGFA 基因是一分子量為35 kD～46 kD同型二聚體的高度糖基化的堿性蛋白，位于 6p21.3， 全長 28 kb， 編碼 VEGFA 的基因約14 kb， 由 8 個外顯子和 7 個內(nèi)含子組成。其同源受體有三種酪氨酸激酶受體，即VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3。VEGFA、VEGFB 和 PGF可結(jié)合VEGFR1；VEGF主要激活VEGFR2；VEGFC 和 VEGFD 激活VEGFR3。VEGF家族成員與不同的受體結(jié)合引起一系列的信號傳導(dǎo)，能特異性地促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞分裂、增殖及遷移， 刺激腫瘤血管生成，在腫瘤形成過程中起重要作用。尤其是VEGFR2通常限于血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，并且被廣泛地認(rèn)為是驅(qū)動的血管生成的主要受體[5]。VEGF及其受體的高表達(dá)與胃癌患者的病理類型、浸潤深度、淋巴轉(zhuǎn)移、血管密度（MVD）、預(yù)后差呈正相關(guān)[6]。

3VEGF對DC功能的影響

3.1VEGF抑制DC的成熟與分化

大量實驗證實VEGF作為腫瘤分泌的免疫抑制因子，抑制DC的分化與成熟，影響其抗原遞呈功能。DC表面有VEGFR受體的表達(dá)，VEGF對CD34+造血干細(xì)胞向DC的分化具有強(qiáng)烈的抑制作用， 其可能的機(jī)制之一是由于VEGF抑制了NFκB信號通路而發(fā)揮阻礙DC的作用，進(jìn)而影響細(xì)胞毒性T細(xì)胞的擴(kuò)增、活化及對腫瘤細(xì)胞殺傷作用的敏感性，這一系列連鎖反應(yīng)促使免疫逃逸的發(fā)生。高度侵襲性黑色素瘤內(nèi)的DC功能障礙與轉(zhuǎn)化生長因子β1 （transforming growth factorβ1，TGFβ1）和VEGF等可溶性因子作用相關(guān)，而敲除其中的某一個可溶性因子可部分恢復(fù)脾臟內(nèi)DC的功能[7]。有研究指出[8]，腫瘤分泌的免疫抑制因子（IL6，TGFβ1，IL10和VEGF）可下調(diào)DC表面的共刺激的分子CD80、CD86的表達(dá)，誘導(dǎo)APC耐受性表型。腫瘤分泌的上述因子使CD的交叉呈遞能力受損，進(jìn)一步抑制腫瘤特異性CD8+CTL的活化和細(xì)胞毒性的功能，機(jī)體的免疫細(xì)胞便不能識別腫瘤細(xì)胞表面的抗原，促使腫瘤細(xì)胞不斷增殖并向惡性方向發(fā)展[9]。在DC培養(yǎng)液中加入不同的VEGF和LPS（脂多糖，DC誘導(dǎo)劑），通過流式細(xì)胞技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)DC表面成熟標(biāo)記分子CD80，CD83和CD86的表達(dá)水平前者顯著低于后者，提示異常表達(dá)的VEGF影響了不同表型的DC分布[10]。上述研究結(jié)果佐證了目前許多學(xué)者的觀點，他們認(rèn)為宿主DC功能缺陷的主要原因是腫瘤細(xì)胞釋放的免疫抑制因子作用于DC，改變了其表面分子的表達(dá)，DC便不能正常識別腫瘤抗原及誘發(fā)機(jī)體抗腫瘤的免疫效應(yīng)。總之DC的成熟及分化與腫瘤微環(huán)境的抑制或激活信號的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)調(diào)控緊密相關(guān)，異常調(diào)節(jié)DC可能會導(dǎo)致腫瘤免疫逃逸的發(fā)生。

3.2VEGF相關(guān)信號通道對DC功能的影響

STAT3是一種具有信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄因子雙功能的蛋白，許多研究證明STAT3不僅促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，而且還調(diào)控腫瘤血管生成和誘發(fā)機(jī)體免疫耐受。STAT3過度磷酸化使DC分化成熟障礙[11]。Hong CH等[12]在砷誘導(dǎo)的皮膚癌的研究中發(fā)現(xiàn)，砷誘導(dǎo)STAT3活化和角化細(xì)胞產(chǎn)生VEGF，同時DC的免疫應(yīng)答作用受到抑制，說明STAT3VEGF信號通道可能參與調(diào)控DC的成熟與分化。在低氧條件下缺氧誘導(dǎo)因子1α（HIF1α）能增加下游產(chǎn)物VEGF基因的轉(zhuǎn)錄。Garufi A等[13]在結(jié)腸癌細(xì)胞中加入HIF1的激活阻滯劑（鋅處理劑），可下調(diào)COX2的表達(dá)及抑制其下游產(chǎn)物 PGE（2）/VEGF的產(chǎn)生，同時DC表面共刺激分子CD80和CD86表達(dá)上升，DC的免疫作用又得到恢復(fù)。提示HIF1可能介導(dǎo)COX2PGE（2）/VEGF信號軸調(diào)控DC表面分子的表達(dá)。TGFβ1可直接刺激VEGF的表達(dá)，從而促進(jìn)腫瘤新生血管的生成、腫瘤的增殖和遷徙。Novitskiy SV[14]在TGFβ1受體TGFBR2缺失的小鼠模型的研究中發(fā)現(xiàn)該鼠瘤組織中DC抗原提呈作用增加了，并刺激產(chǎn)生大量的抗原特異性T細(xì)胞，而 VEGF的表達(dá)量明顯下降，說明DC功能的發(fā)揮可能受TGFβ1TGFBR2VEGF信號軸的調(diào)控。

4VEGF與DC在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的關(guān)系

胃癌的發(fā)生涉及多方面因素，包括：環(huán)境因素、宿主基因突變或缺失、腫瘤干細(xì)胞異常表達(dá)及腫瘤免疫抑制等因素相互作用的結(jié)果。正常情況下機(jī)體免疫系統(tǒng)可以殺死衰老和腫瘤細(xì)胞，其中DC能識別腫瘤細(xì)胞表面抗原并將之呈遞給T細(xì)胞，從而誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的發(fā)生，但腫瘤微環(huán)境內(nèi)存在許多抑制免疫的因素。諸如VEGF基因的過度表達(dá)就是其中的因素之一。VEGF和DC在胃癌發(fā)病的分子機(jī)制是目前研究熱點之一。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，一方面VEGF促進(jìn)腫瘤血管形成進(jìn)而為腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲提供營養(yǎng)；另一方面VEGF通過影響DC的成熟與分化而抑制機(jī)體免疫應(yīng)答。楊峰等人[15]研究147例胃癌患者發(fā)現(xiàn)，VEGF在胃癌組織的表達(dá)明顯高于癌旁組織，而胃癌組織中DC的浸潤密度低于癌旁組織，兩者呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。胃癌侵襲深度、TNM分期與VEGF的高表達(dá)呈正相關(guān)，但與DC表面分子S100表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)[16]。與胃癌腹膜轉(zhuǎn)移密切相關(guān)的M2型巨噬細(xì)胞高表達(dá)VEGF，而DC表面的CD80，CD86 分子呈低表達(dá)[17]。Wang Z等[18]發(fā)現(xiàn)胃癌術(shù)后患者血清中細(xì)胞因子IL6、IL10和VEGF的表達(dá)水平較術(shù)前明顯降低；同時術(shù)后患者外周血中免疫細(xì)胞如DC、CD4+、NK細(xì)胞比例升高。Shi Y等[19]構(gòu)建缺乏免疫功能的小鼠胃癌細(xì)胞（MFC）模型，在該研究中發(fā)現(xiàn)MFC細(xì)胞的上清液可抑制LPS誘導(dǎo)的DC的成熟和交叉呈遞作用，敲除VEGF基因表達(dá)的子代MFC細(xì)胞其免疫功能得到恢復(fù)，大大削弱了小鼠MFC細(xì)胞的致瘤性，小鼠的生存性也得到了顯著的改善。上述研究結(jié)果提示腫瘤微環(huán)境內(nèi)高濃度VEGF的表達(dá)可通過抑制DC的成熟、分化，使機(jī)體免疫反應(yīng)不能正常進(jìn)行。而腫瘤微環(huán)境改變后機(jī)體免疫功能的恢復(fù)可能是通過VEGF等免疫抑制因子表達(dá)下調(diào)，成熟DC誘發(fā)一系列新的免疫反應(yīng)而實現(xiàn)的。總之，VEGF對DC的調(diào)控作用與胃癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，兩者在胃癌治療上的應(yīng)用有很好的前景。

5VEGF的靶向治療及DC疫苗在胃癌治療的應(yīng)用前景

目前單克隆抗體、酪氨酸激酶、VEGF 捕捉物以及重組人血管內(nèi)皮抑制素等已成為抗腫瘤血管生成的主要藥物。這些藥物在臨床治療中取得一定成效，但也出現(xiàn)不良反應(yīng)及某些強(qiáng)效的VEGF抑制劑可能會增加腫瘤缺氧，影響抗腫瘤免疫力的發(fā)揮[20]。為解決這些問題，開發(fā)新的藥物，合理有效地搭配其他治療方案是我們急需解決的問題。國外學(xué)者也在積極探索新型抗腫瘤血管生成藥。Wang W 等[21]報道的新型的索拉非尼衍生物（DCT015）被認(rèn)為是治療胃癌的一種很有前途的抗癌藥物，它可下調(diào)VEGF誘導(dǎo)VEGFR2磷酸化及降低下游關(guān)鍵蛋白的磷酸化，進(jìn)而抑制胃癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)凋亡、抑制內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管形成。Du Four S等[22]對阿西替尼在小鼠黑色素瘤模型的研究中發(fā)現(xiàn)其處理后瘤塊表面積縮小，小鼠脾內(nèi)T細(xì)胞顯著增加，特別是增加CD8+細(xì)胞的數(shù)量及DC成熟標(biāo)記物CD80 的表達(dá)，這說明阿西替尼既有抗腫瘤血管生成，又有調(diào)節(jié)免疫的作用。研發(fā)此類新型藥物將在胃癌治療中發(fā)揮更好的作用。近年來，DC疫苗與傳統(tǒng)方法聯(lián)合應(yīng)用是一種新的治療方法。DC和細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinducedkiller，CIK）構(gòu)成的免疫治療方案在胃癌術(shù)后患者的治療中取得了療效，其機(jī)制是DC分泌IL2、IL12、IFRγ等細(xì)胞因子，促進(jìn)CIK增殖，顯著提高CIK細(xì)胞的殺瘤活性[23]。使用該療法后的胃癌患者血清CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比例均升高[24]。該療法聯(lián)合常規(guī)化療有抗腫瘤血管生成，抑制腫瘤增殖信號通道，且與化療藥物起到療效協(xié)同作用，減少耐藥的發(fā)生[25]。另外選擇特異的抗原負(fù)載DC以誘導(dǎo)機(jī)體免疫抗腫瘤效應(yīng)是當(dāng)前研究的熱點。Li C等[26]制成能與腫瘤細(xì)胞融合的同種異體DC疫苗聯(lián)合細(xì)胞因子的療法可誘導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）生成和增強(qiáng)胃癌免疫治療功效。Lin等[27]基于黑色素瘤抗原基因3（melanoma antigenencoding gene3， MAGE3）在胃癌中高表達(dá)，構(gòu)建攜帶AGEA3基因的慢病毒載體（LVS），轉(zhuǎn)導(dǎo)DC后穩(wěn)定表達(dá)MAGEA3和較高表達(dá)CD80、CD86和HLADR細(xì)胞的比例，同時誘導(dǎo)CTL，結(jié)果提示用抗原轉(zhuǎn)導(dǎo)的DC可獲得特異性抗腫瘤反應(yīng)，這種方法將在胃癌治療和預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有著巨大的潛力。總之探索和研發(fā)抗腫瘤血管生成的新藥物、特異的DC疫苗及合理的治療方案，對提高療效，減少藥物不良反應(yīng)，提高患者的生存期有很大的價值。

6總結(jié)與展望

腫瘤微環(huán)境通過分泌VEGF等免疫抑制因子來抑制DC的活性，從而介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的發(fā)生，但其具體分子調(diào)控機(jī)制期待深入研究。研究者們在以VEGF為靶點的抗腫瘤血管生成和DC 疫苗為基礎(chǔ)的抗腫瘤免疫治療方面進(jìn)行了大量探索，也在胃癌治療中取得一定成果。但對晚期胃癌治療效果仍未取得突破性進(jìn)展，新的治療策略需綜合考慮患者自身遺傳學(xué)背景和腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特性，化療、分子靶向藥物及多靶向藥物聯(lián)合治療起到相輔相成作用，這種醫(yī)治策略將會成為一種新的趨向。

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（收稿日期：2016-06-19修回日期：2016-08-09）

（編輯：梁明佩）