兒童骨髓細胞形態學診斷結果的研究

陳 瑩

兒童骨髓細胞形態學診斷結果的研究

陳 瑩

目的 通過對兒童骨髓細胞形態學診斷結果的分析, 研究其在臨床初步診斷上的意義。方法 將送檢的527例合格兒童骨髓穿刺標本進行細胞形態學檢查以及細胞化學染色, 結合臨床表現做出實驗室骨髓細胞形態學診斷, 與最終臨床結果進行研究比較。結果 對兒童骨髓細胞形態學進行分析, 臨床診斷結果與兒童骨髓細胞形態學診斷結果符合率前三位的疾病分別是原發性血小板減少性紫癜(ITP)、缺鐵性貧血(IDA)、急性淋巴細胞性白血病(ALL)。結論 骨髓細胞形態學檢驗對小兒的血液疾病確診有重要意義。

骨髓細胞形態學；兒童；診斷；血液疾病

骨髓是重要的造血組織, 更是生成紅細胞、血小板、粒細胞的唯一組織。除了上述外骨髓也產生淋巴細胞和單核細胞, 是人維持正常生理活動的重要組織。骨髓穿刺涂片可以觀察到血細胞的形態和成分的變化, 了解骨髓是否產生病理改變以及造血功能是否異常, 所以對于血液疾病來說, 骨髓細胞形態學診斷是具有重要價值和意義的。隨著工業化和城市化進程, 少兒由于其抵抗力較低, 部分器官和功能尚未發育完全, 而成為了血液疾病的高發人群。無論對其本身還是其所在的家庭來說, 心理和經濟的雙重壓力已經成為了社會關注的重點問題之一。為了更早的診斷和治療, 減輕患兒家庭的負擔, 骨髓細胞形態學診斷成為了血液疾病診斷和鑒別的重要依據, 為臨床的治療提供了有價值的信息。目前骨髓細胞形態學診斷因其方便快捷、特異性強等特點成為了少兒血液疾病診斷的常規檢驗, 具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 所有病例為2013年1月～2014年9月本院門診病房送檢的527例少兒骨髓穿刺合格標本, 所有標本進行細胞形態學診斷和化學染色。男293例, 占總樣本的55.60%, 女234例, 占總樣本的44.40%；年齡2個月～14歲, 1歲以下102例, 2～5歲216例, 6～10歲141例, 11～14歲68例。1.2 方法 骨髓細胞學檢查與判斷：首先對骨髓涂片進行瑞氏-吉姆薩染色, 然后用顯微鏡低倍鏡10×觀察, 再用高倍鏡40×觀察, 最后用油鏡100×觀察, 確認標本有核細胞形態。對200個有核細胞進行計數, 并計算百分率。按照《血液病學診斷及療效標準》［1］, 結合臨床做出診斷。

細胞化學染色：為了提高診斷正確率, 彌補骨髓細胞形態學檢驗的部分缺陷, 采用細胞化學染色觀察細胞內代謝產物或某些成分。化學染色包括過氧化酶染色(POX)、糖原染色(PAS)、氯乙酸萘酚酯酶染色(AS-DCE)、α-丁酸萘酚酯酶(α-NBE)染色、堿性磷酸酶染色(ALP)等。

2 結果

2.1 527例兒童骨髓穿刺標本臨床診斷構成, 見表1。

表1 527例兒童骨髓穿刺標本臨床診斷構成(n, %)

2.2 骨髓細胞形態學診斷與臨床診斷符合率前三位分別是ITP、ALL、IDA。臨床診斷158例ITP中骨髓細胞學診斷143例, 正常5例, ALL 8例, 感染性疾病2例；白血病78例中, ALL 68例, 急性非淋巴細胞性白血病(ANLL)6例, 瘤骨髓轉移4例；貧血127例中, IDA 76例, 再生障礙性貧血31例,溶血性貧血20例；發熱待查72例中, 正常61例, ALL 2例, ANLL 9例；肝脾腫大32例中正常28例, ALL 4例, 其他疾病60例中無ITP、ALL、IDA。骨髓細胞診斷符合率見表2。

表2 ITP、ALL、IDA比例與診斷率(n, %)

3 討論

血液疾病由于表觀特征特異性差、血液成分組成復雜、某些病因上尚未明確, 一般的診斷較難快速定性。骨髓細胞形態學檢查由于其對血液細胞直觀觀察, 并采用化學染色等手段輔助判斷, 所以對大部分的血液疾病的確診起著至關重要的作用。

由于兒童自身免疫力低, 易患感染性疾病, 且隨著生長發育營養需求顯著增加, 容易引起營養缺乏疾病, 青春期的兒童較嬰幼兒患病的比例明顯下降。兒童血液疾病已經日益成為現代醫學關注的重點問題之一。兒童血液疾病種類較多,出血性貧血、繼發性貧血、再生障礙性貧血、血小板減少性紫癜、血友病等屬于血液疾病中的良性疾病, 而白血病是一種危害兒童健康和生命的惡性疾病。兒童白血病有急性慢性之分, 急性又分為急性淋巴細胞白血病和急性粒細胞白血病兩種, 前者占所有種類白血病的大多數且治療效果較其他疾病效果更好。

兒童患白血病的臨床表現主要有發熱、貧血、出血、肝脾部位的水腫。在發病早期孩子出現臉色暗淡無光、氣虛乏力、不愛活動、皮膚黏膜出血、不明原因持續性發熱等, 都需要警惕是否為白血病。早期發現早期治療可以為白血病患兒爭取最佳的食療時間。急性早幼粒細胞白血病等急性白血病發病時病情非常兇險, 耽誤診斷或誤診很有可能造成生命危險和無法挽回的損失。

原發性血小板減少性紫癜是免疫性綜合病, 由于體內血小板遭到自身免疫破壞, 致使外周血液的血小板減少, 造成出血。而這一疾病與病毒或細菌感染有非常緊密的關聯。一般成人患病前通常出現呼吸道感染現象, 多種免疫因素參與其中, 致使發病。胎兒可通過胎盤從母體獲得血小板抗體,進而造成出生后發病, 對于這一疾病治療研究發現脾臟切除能較為有效的控制病情。

缺鐵性貧血是較為常見的血液疾病癥狀, 主要是體內儲存的鐵無法滿足紅細胞正常生成。原因主要是鐵攝入不足、吸收減少、需求增加、利用障礙或丟失過多。其發病率在發展中國家和經濟不發達地區、嬰幼兒明顯增高。嬰幼兒輔食添加不足、小兒偏食是兒童患病的主要原因。缺鐵性貧血可表現為頭暈眼花、心悸氣短、心率加快、煩躁易怒、異食癖、皮膚干燥、毛發干枯脫落、指甲不平且薄, 易斷裂等。

骨髓細胞形態學診斷對以上三種疾病的診斷符合率高,有助于疾病的發現, 實現早診斷早治療。除了上述三種疾病外, 對于多發性骨髓瘤、鐵幼粒細胞貧血乃至某些寄生蟲病,如瘧疾、黑熱病等都具有良好的診斷作用。骨髓形態學診斷的準確性受許多因素影響, 如采髓部位、抽取過程、制片過程、染色過程等各個環節。

骨髓液采集使用5 ml注射器穿刺, 在胸骨柄抽取骨髓,約0.2 ml涂片, 不宜抽取過多, 防止稀釋。

為得到辨識度高的合格標本, 需使用表面光滑干燥的清潔載玻片, 推片時不應殘留過多氣泡影響觀察。涂片薄厚應適中, 避免過厚細胞重疊以及過薄難以找到細胞。細胞形態學應特別注意涂片尾部有無原始及幼稚細胞, 以避免因制片失誤造成的誤診［2］。

骨髓細胞形態學的檢查, 結合其他臨床資料, 對診斷、 鑒別診斷、 療效的觀察以及預后估計等方面均有重要價值［3］。在骨髓細胞形態學檢查中, 通過骨髓細胞學檢查和細胞化學染色聯合診斷［4］, 在顯微鏡觀察細胞的形態, 而利用染色判斷病變情況, 如此協同配合檢查, 提高了診斷率。

近年來, 盡管免疫學、細胞遺傳學和分子生物學的檢查在血液病的診斷、治療中占據了越來越重要的地位, 但骨髓形態學分析仍然是最基本、最直觀、最重要并且是不可替代的檢驗方法［5］。

由于有些疾病在實施治療過程中會引發骨髓的變化, 所以應在治療前進行骨髓檢查。除骨髓檢查外, 還應與外周血涂片進行同步檢查, 了解細胞的全面動態。

［1］ 葉應嫵, 王毓三.全國臨床檢驗操作規程.南京: 東南大學出版社, 1991:68-75.

［2］ 李早榮, 唐興洲, 周巧慧, 等.骨髓有核細胞幾種計數方法的比較.中華檢驗醫學雜志, 2004, 27(3):160-161.

［3］ 熊玲, 冷文學.兒童骨髓細胞形態學檢查及臨床意義.中國醫藥指南, 2013, 11(4):109-110.

［4］ 邢富興, 韓斯琴, 王麗紅, 等.難治性貧血與巨幼細胞貧血骨髓細胞形態學分析.中國醫藥導報, 2008, 5(13):174.

［5］ 王國鋒, 劉煒, 劉俊閃, 等.1676例兒童骨髓細胞學診斷結果分析.河南醫學研究, 2011, 20(4):459-460.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.16.028

2014-12-25］

475000 開封市兒童醫院