不同方法檢測抗鏈球菌溶血素O的比較研究

米劍

【摘要】目的：對不同方法檢測抗鏈球菌溶血素O進行比較研究。方法：選取我院2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者，分別用溶血抑制法、乳膠凝集試驗及自動化透射比濁法檢測患者的血清ASO，對ASO增高率進行分析比較。結果：溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗檢測的ASO增高率為37.5%，自動化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組數據之間比較無統計學差異（P>0.05）。結論：ASO較低或較高水平增高時，溶血抑制法與乳膠法容易出現誤差，而比濁法檢測ASO的敏感性較佳，結果重復性好，檢測ASO比較準確，值得于臨床推廣應用。

【關鍵詞】不同方法，檢測，抗鏈球菌溶血素O，比較研究

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2015）01-0112-02

溶血性鏈球菌的感染與急性腎小球腎炎、急性風濕熱、風濕性關節炎、風濕性心臟病等都有關[1]。目前，常用來檢測感染溶血性鏈球菌的方法主要有溶血抑制法、乳膠凝集試驗及自動化透射比濁法等。這三種方法的檢測原理各不相同，結果也存在差異[2]。為了進一步研究三種方法檢測的臨床價值，我院對2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者采取不同方法檢測抗鏈球菌溶血素O進行比較研究，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取我院2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者，男45例，女35例，年齡9-73歲，平均年齡（42.6±5.8）歲。其中20例急性腎小球腎炎患者，35例游走性關節疼痛伴發熱患者，25例風濕熱患者，所有患者均已了解治療方案并簽署了知情同意書，自愿接受檢測安排。抽取患者4 mL空腹靜脈血，分離血清備用，分離血清后-30℃凍存。

1.2方法

溶血抑制法檢測：溶血素來自上海醫化所，進行溶血抑制法檢測；乳膠凝集試驗檢測法：將ASO膠乳靈敏度調整為200IU/ml，超過該滴度便按出現可見的凝集顆粒原理測定，具體 操作方法依據說明書實行；自動化透射比濁法檢測法：（1）精密度評價：ASO質控品、校準品，樣品為高濃度血清標本，分別重復測定50次，再計算均值與變異系數；（2）定標穩定性評價：于第0天定標同時測定質控品、校準品、高濃度血清標本，在接下來的3個月內，繼續用該試劑進行檢測，與第0天結果相比；（3）復溶后校準品的穩定性評價：用蒸餾水復溶凍干校準品后置于2-8℃，連續以此標本測定2個月，密切關注測定值變化；（4）線性測定范圍評價：凍干校準品被不同量蒸餾水稀釋為12個濃度水平，按照不準確度以確定線性測定范圍；（5）抗干擾性評價：以遞增方式將干擾物質加入血清標本，游離膽紅素、血紅蛋白、結合膽紅素、類風濕因子及三酰甘油加入的最高濃度依次為0.18g/L、5.0g/L、0.21g/L、416 Iu/m1、12.82g/L，濁度在660nm處的最高吸光度是0.18。

1.3統計學處理

數據均通過SPSS19.0軟件處理，計量資料用t檢驗，計數資料用卡方檢驗，當P<0.05時表示數據間比較差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同方法檢測ASO增高率情況的比較

溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗檢測的ASO增高率為37.5%，自動化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組間數據比較無統計學差異（P>0.05）。具體見下表1。

表1 不同方法檢測ASO增高率情況的比較

檢測方法 例數 ASO增高率（%）

溶血抑制法 80 24 30

乳膠凝集試驗 80 30 37.5

自動化透射比濁法 80 35 43.75

X2 3.25

P >0.05

3 討論

鏈球菌溶血素O為A族溶血性鏈球菌代謝產物之一，是一種有溶血活性的蛋白質，具備抗原性[3-4]。在人體中A族溶血性鏈球菌作為正常菌群存在，正常情況下人體內抗鏈球菌溶血素O（ASO）有一定的基礎值。通常當機體被感染A群溶血性鏈球菌后3周內，血清中就會出現ASO[5]，滴度直到病愈后幾個月月到半年內才可以降為正常水平。所以ASO增高能夠作為機體感染A群溶血性鏈球菌的標志。在臨床上我們通常觀察到有的AS患者出現不同程度的ASO增高，這些患者一般是難治性的AS。感染鏈球菌后[6]，該細胞壁上的胞漿及其分泌的蛋白質或者M蛋白發揮抗原作用，與免疫球蛋白相互結合后，成為免疫復合物，沉積在腎小球基底膜從而損傷了腎小球濾過膜。鏈球菌有些抗原具有陽性電荷，能夠利用電荷反應同腎小球結構相互結合形成原位種植抗原，再結合免疫球蛋白后成為原位免疫復合物，從而激活補體，導致腎小球內系膜細胞及皮質細胞增生，吸引單核細胞與中性粒細胞浸潤導致病變。測定抗鏈球菌溶血素O抗體，對診斷急性腎小球腎炎有十分重要的意義。有70-80%的急性腎小球腎炎患者能夠因抗鏈球菌溶血素O抗體增高滴度。

以前多選擇溶血抑制法檢測ASO，該方法按照還原劑助O溶血素可以溶解紅細胞的特點，觀察ASO中和O溶血素溶血效果，定量檢測ASO，雖然方法敏感，但是操作比較煩瑣，影響試驗因素多，結果重復性不佳[7]。近幾年來，國外通常選擇使用比濁法，其操作自動化，穩定的試劑，定量的結果，我國也正在逐漸引用，但因試驗費用、儀器設備經常受到限制。現在比較普遍的方法是乳膠凝集試驗，其敏感性差，只可以定性，影響的因素較多，對觀察病情與療效不利。本次研究我院同時采用了上述三種方法檢測80份樣本，結果顯示溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗檢測的ASO增高率為37.5%，自動化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組數據之間比較無統計學差異（P>0.05）。檢測的敏感性：自動化透射比濁法>乳膠凝集試驗檢測>溶血抑制法溶血法。值得注意的是，ASO水平較高抗體過剩時，溶血抑制法與乳膠法常規操作會呈假陰性，容易出現漏檢、誤檢。故由此可知，上述三種方法相比，可見比濁法檢測ASO的敏感性較佳，結果重復性好，檢測ASO比較準確，值得推廣。

參考文獻：

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[3]周晶晶，汪國生，李向培，厲小梅，錢龍. 血清抗鏈球菌溶血素O檢測在強直性脊柱炎中的臨床意義[J].安徽醫科大學學報，2013，（4）：419-422.

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[5]孫秀鳳，曹麗群. 抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）定量檢測的臨床應用體會[J]. 中國實用醫藥，2007，7（1）：72-73.

[6]陸巧英，吳鳴，陸燕. 過敏性紫癜、紫癜性腎炎患兒鏈球菌感染的檢測與臨床意義[J]. 浙江醫學教育，2010，（01）：38-39.

[7]池繼敏，張峰，張靜. 不同類型關節炎患者血液及關節液中尿酸、抗鏈球菌溶血素O和類風濕因子含量比較[J]. 中華臨床醫師雜志，2013，（21）：47-48.