劉敏 郭曉英 曹艷菲
摘要:白細胞分類計數方法(DLC)包括手工法白細胞分類計數、血細胞儀三分群法白細胞分類計數、血細胞儀五分類法白細胞分類計數的操作方法及臨床意義進行分析。白細胞分類計數(DLC)主要用于血液造血系疾病、感染性疾病、過敏性和嗜酸細胞增多性疾病診斷、輔助診斷和篩查,非特異性防御功能和感染性疾病預后評價。
關鍵詞:白細胞分類計數;臨床意義
【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-8602(2015)06-0116-01
白細胞分類計數是把血液制成薄血涂片,按照形態特征分類計數白細胞,得出相對比值(百分率),以觀察數量、形態和質量的變化,對疾病有輔助診斷意義[1]。
1標本來源
均為我院門診患者及健康體檢者50例,其男27例,女23例,年齡最小4歲,最大63歲。
2 計數方法
2.1手工法白細胞分類計數
2.1.1標本采集 可使用毛細血管采血法所取的樣本或靜脈血EDTA·K2抗凝樣本。
2.1.2試劑 瑞氏染液。
2.1.3操作 將血液滴加在潔凈的玻片上,用推片將其推成薄血涂片。自然干燥后用蠟筆在血涂片兩頭劃線以防染液溢出,然后將血涂片平放在染色架上。加瑞氏染液于血涂片上,使之覆蓋整個血涂片,固定0.5~1min。滴加等量的緩沖液與染液混勻,染色5~10min。用清水沖去染液,待自然干燥后或用吸水紙吸干即可鏡檢。
2.1.4參考值 中性粒細胞,桿狀核0.01~0.05(1%~5%)分葉核0.50~0.70(50%~70%)。嗜酸性粒細胞0.005~0.05(0.5%~5%)。嗜堿性粒細胞0~0.01(0%~1%)。淋巴細胞0.20~0.40(20%~40%)。單核細胞0.03~0.08(3%~8%)。
2.2血細胞儀三分群法白細胞分類計數
2.2.1標本采集 靜脈血EDTA·K2抗凝樣本1~2ml。
2.2.2試劑操作 根據儀器不同使用其配套試劑。按儀器操作說明書進行操作。
2.2.3參考值 儀器的報告方式為小細胞、中間細胞及大細胞。小-細胞代表淋巴細胞,中間細胞包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胸及在病理情況下出現的原始及幼稚細胞,大細胞代表中性分葉核以及桿狀核和晚幼粒細胞[2]。小細胞群(1.0~3.3)×109/L。中間細胞群(0.2~0.,7)×109/L。大細胞群 (1.8~6.4)×109/L。
2.3血細胞儀五分類法白細胞分類計數
2.3.1標本采集 靜脈血EDTA·K2抗凝樣本1~2ml。
2.3.2試劑方法 根據儀器不同使用其配套試劑。操作按儀器操作說明書進行操作。
2.3.3參考值 五分類法白細胞分類計數的報告方式同手工法,有淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞,故參考范圍如手工法白細胞分類。雖然儀器法白細胞五分類采用了多種技術來保證結果的準確性,但由于儀器是依靠細胞的各種物理化學特性來進行細胞分類,與手工方法利用細胞的形態學特征進行分類不同,故在各種病理情況下準確性不如手工方法。手工方法仍然是白細胞分類計數的金標準。
3 白細胞分類計數的意義
3.1中性粒細胞 具有吞噬和激活補體功能,能吞噬細菌和組織細胞碎片,激活的補體成分(C3a、C5a、C567)具有粒細胞趨化作用。
3.1.1增多 ①反應性增多 見于:a.感染,細菌、病毒、真菌、螺旋體、立克次體、寄生蟲,特別是化膿性細菌全身性或嚴重局部感染如敗血癥、肺炎、腦膜炎、闌尾炎、急性腎盂炎或腎盂腎炎、丹毒、蜂窩組織炎等。b.炎癥,化學性如腐蝕性或刺激性化學品損傷、急性胰腺炎、化學性腹膜炎;免疫性如風濕熱、類風濕性關節炎、結節性動脈周圍炎、脈管炎等。c.急性中毒,化學品或藥物中毒,自身代謝性中毒如尿毒癥、酮癥酸中毒或乳酸性酸中毒。d.急性失血,尤以內臟出血如肝、脾、宮外孕破裂出血;1~2小時開始升高,2~5小時達高峰。e.組織損傷或壞死,如心、肺、腎、腦等臟器梗死,肌肉挫傷、大手術后。f.排異反應。g.惡性腫瘤,尤其合并感染、壞死或骨髓轉移時。②腫瘤性增多 見于骨髓增生性疾病如白血病特別是慢性粒細胞白血病、骨髓纖維化、原發性血小板增多癥。
3.1.2減少 ①感染 某些病毒或桿菌感染如流感、傷寒、副傷寒、布魯菌病,機體反應性降低時的嚴重感染。②造血功能障礙 缺乏造血組織如再生障礙性貧血、缺乏造血原料如巨幼細胞性貧血。③骨髓病 非白血性白血病、惡性組織細胞病、腫瘤骨轉移、苯中毒、輻射損傷。④破壞過多 自身抗體如免疫性粒細胞減少癥、脾功能亢進癥等。⑤藥物 多種抗腫瘤藥物、氯霉素、頭孢菌素、磺胺類、奎諾酮類、萬古霉素、磺脲類、氨基比林、非那西汀、保太松、硫氧嘧啶和甲巰咪唑類、氯丙嗪、奎寧等藥物使用。⑥特發性粒細胞減少癥、Felty綜合征。
3.2嗜酸性粒細胞 與過敏反應密切相關,受嗜酸細胞趨化因子調節,吞噬免疫復合物和異體蛋白。
3.2.1增多 ①變態反應性疾病,如支氣管哮喘、血管神經性水腫、血清病、蕁麻疹、藥物過敏反應。②寄生蟲病,尤其是腸道外感染如華支睪吸蟲、血吸蟲、肺吸蟲、絲蟲、包囊蟲病。③某些皮膚病,如濕疹、剝脫性皮炎、天皰瘡、銀屑病等。④腫瘤性疾病,如腫瘤轉移壞死時、肺癌、惡性淋巴瘤、慢性粒細胞白血病、真性紅細胞增多癥[3]。⑤內分泌疾病,如垂體前葉功能減退癥、腎上腺皮質功能減退癥。⑥酸細胞浸潤性疾病,如嗜酸細胞增多綜合征、伴有肺浸潤的嗜酸細胞增多癥如L0f. fler綜合征、嗜酸細胞性肺炎、熱帶嗜酸細胞增多癥以及嗜酸細胞性心內膜炎、嗜酸細胞性肉芽腫等。⑦某些感染性疾病,如猩紅熱、傳染病恢復期。⑧某些結締組織病,如皮肌炎、結節性動脈周圍炎。
3.2.2減少 見于急性嚴重感染如傷寒、肺炎、敗血癥,各種急性應激如創傷、大手術后,皮質醇增多癥或皮質激素治療,巨幼細胞性貧血等。
3.3嗜堿性粒細胞 表面有IgE的Fc受體,與IgE結合即被致敏,再受相應抗原攻擊時發生顆粒釋放反應,顆粒含有組胺、慢反應物、肝素、嗜酸細胞趨化因子、血小板活化因子。
3.3.1增多 見于骨髓增殖性疾病如慢性粒細胞白血病、骨髓纖維化,也見于慢性溶血、脾切除術后、淋巴瘤、骨髓轉移癌、鉛中毒、過敏反應。
3.3.2減少 未見有臨床意義。
3.4淋巴細胞 免疫細胞,合成和釋放淋巴因子,參與細胞免疫和體液免疫。
3.4.1增多 ①生理性增多,6歲前兒童期伴隨免疫功能成熟過程。②感染,病毒感染如麻疹、風疹、水痘、流行性腮腺炎、傳染性單核細胞增多癥、傳染性淋巴細胞增多癥、病毒性肝炎、流行性出血熱等;細菌感染如百日咳、結核病、布魯菌病;螺旋體感染如梅毒。病毒感染可見胞體大、核不規則、胞漿豐富或泡沫樣的異型淋巴細胞。異型淋巴細胞增多有時也見于藥物過敏、血液透析或體外循環。③急性傳染病恢復期。④自身免疫性疾病、器官移植排異反應前。⑤淋巴細胞白血病、淋巴瘤。
3.4.2減少 主要見于皮質醇或烷化劑治療,輻射損傷、免疫缺陷綜合征、先天性免疫球蛋白缺乏癥。
3.5單核細胞 吞噬細胞,具有吞噬細菌、清除壞死細胞和異物、向T細胞傳遞免疫信息功能。
3.5.1增多 ①病毒、立克次體感染,如麻疹、水痘、風疹、傳染性單核細胞增多癥、病毒性肝炎、斑疹傷寒。②慢性細菌、螺旋體或寄生蟲感染,如結核病、麻風病、亞急性細菌性心內膜炎(SBE)、梅毒、瘧疾、黑熱病等。③急性傳染病或急性感染恢復期。④惡性淋巴瘤、惡性組織細胞病、單核細胞白血病。
3.5.2減少 未見有臨床意義。
參考文獻
[1] 葉應嫵,王毓三,申子瑜,主編.全國臨床檢驗操作規程.第3版.武漢:東南大學出版社,2006:132-133,137-138.
[2] 唐滬強,許凱聲,吳敏良,等.庫爾特STKS血細胞分析儀對白細胞分類異常提示的可信性[J].臨床檢驗雜志,2000,18(3):176-177.
[3] 李筱梅,楊玉寶,李承文,等.白細胞分類計數方法學比較[J].檢驗醫學,2004,19(2):100-103.