單純性膽紅素溶液對果糖胺測定的影響分析

摘要：目的 探討單純的膽紅素溶液在日立7180全自動生化分析儀上對果糖胺測定的影響。方法 用實驗制品膽紅素溶液，取健康體檢者200例采血作為標本，按黃疸診斷標準加入膽紅素溶液，反復比對使膽紅素溶液濃度分別達到或接近預先設定好的濃度，分為隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組四組；用礬酸鹽反應法和果糖胺法分別測定膽紅素和果糖胺。結果 中度黃疸組和重度黃疸組加入膽紅素溶液的標本果糖胺檢測數據較未加入膽紅素溶液的檢測數據在中有顯著差異。結論 膽紅素溶液可對果糖胺的測定造成一定影響，膽紅素濃度越高影響越顯著，中高濃度膽紅素可致果糖胺水平誤差；在篩查、診斷、鑒別與果糖胺有關疾病時，應考慮患者是否合并有可致高濃度膽紅素疾病如黃疸、高膽紅素血癥。

關鍵詞：膽紅素；果糖胺；測定；影響

果糖胺（FRUC）又稱糖化血清蛋白（GSP）它是葡萄糖在血液中與白蛋白發生緩慢且不可逆的非酶促反應形成的糖基化蛋白。這種蛋白的組成是由白蛋白肽鏈189位賴氨酸與葡萄糖結合形成相對穩定的高分子酮胺結構，這種結構中的葡萄糖只有在白蛋白降解后才得以釋放，且糖基化蛋白的合成速率與血糖的濃度成正比。故可通過檢測血清的糖基化蛋白的水平來反映患者前2～3w的血糖水平。果糖胺檢測已在國內外醫院廣泛用于對患者血糖的監控，但由于目前的生化檢測方法和儀器的技術層面上的問題仍存在一定的局限性，致使生化的大部分項目在遇到溶血、脂血、黃疸等異常標本時，儀器不能自動排除干擾而導致生化大部分的項目失準[1]。本文主要探討單純性的膽紅素溶液能否對果糖胺測定造成影響。意在明確在黃疸血清條件下測定的果糖胺結果是否會受到膽紅素的干擾而失準。

1資料與方法

1.1一般材料 選擇2013年5月～6月在我院體檢的健康成年人200例，其中男132例、女68例，年齡18～55歲，平均（43.2±4.9）歲。納入標準：①所選體檢者均要求各項指標基本正常，無服用藥物史、無肝、腎及胰腺功能異常，無糖尿病、高血脂及其他內分泌疾病病史；②采用統計標準，相同質控管理采樣。

1.2方法

1.2.1檢測指標 依照人民衛生部出版的第七版《診斷學》制定內容。總膽紅素（TBIL）在17.1～34.2umol/L為隱性或生理性黃疸，TBIL在34.2～171umol/L為輕度黃疸。TBIL在171～342umol/L為中度黃疸，TBIL在大于342umol/L為重度黃疸。

1.2.2檢測方法

1.2.2.1所選體檢者均在清晨空腹抽取靜脈血3～4ml。不加抗凝劑，離心分離血清；-20℃冰箱保存，待標本收集完畢后。使用儀器為日立7180全自動生化分析儀對這200例血清標本進行果糖胺測定。果糖胺試劑盒選擇北京九強公司產品，檢驗操作嚴格按照廠家提供的說明書及檢驗科生化室制定的SOP文件執行。

1.2.2.2將200份血清以50份為一組，分別加入一定比例的膽紅素溶液，使這四組標本分別按照衛生部對黃疸程度制定的標準來配制成隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組。測定并驗證各組膽紅素濃度是否在標準中的范圍，按要求加入不同濃度的膽紅素溶液后再次測定各組中所有血清果糖胺的數據，收集并統計數據。

1.3統計學處理 對每組的每一份標本在加入膽紅素溶液前后各測定一次果糖胺數據，對比隱性黃疸、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組各組在加入膽紅素前后數據的差異。相關實驗數據均以x±s表述。各組間前后兩組數據比較均用t檢驗。

2結果

各組血清標本在加入膽紅素溶液前后分別測定的果糖胺結果比較顯示。隱性黃疸和輕度黃疸組FRUC，P>0.05無顯著性的差異，其余的中度黃疸和重度黃疸組的FRUC前后結果對比顯示，均為P<0.05結果有顯著性差異。見表1。

3討論

果糖胺是血漿蛋白質在葡萄糖非酶糖化過程中的產物，可較好的反應1～3w內人體血糖水平，一定程度上彌補了糖化血紅蛋白不能反映較短期內血糖濃度，是評價糖尿病短期控制效果的可靠指標，適用于血糖波動較大的脆性糖尿病、妊娠糖尿病診斷 [3]。近年來，果糖胺測定由化學法逐漸轉為全自動生化分析儀分析，受限于儀器測量原理，果糖胺測定結果易受溶血、脂血、黃疸影響，測量精準度顯著下降，影響疾病的診斷與療效評估。

本次實驗是利用添加單純性的膽紅素溶液來干擾正常血清的果糖胺的測定，其目的是觀察模擬血標本在不同程度的黃疸影響條件下，其果糖胺的測定是否會受到膽紅素的干擾[4]。實驗結果表明低濃度的膽紅素對果糖胺測定的結果影響不大，但隨著膽紅素濃度的不斷加大，膽紅素濃度達到一定程度時，便可干擾到果糖胺的測定結果，導致果糖胺的測定結果失準。其原因在于目前我們所使用的日立7180全自動生化分析儀在對物質反應結果的識讀時均需要通過比色來分辨。對于低濃度膽紅素的干擾而言，儀器可通過樣本空白或兩點的比色法連續監測在一定程度上消除了膽紅素對測定結果的干擾。而高濃度的膽紅素（即黃疸）血清較大程度的改變了反應杯中反應混合物的色度，影響了儀器光電部分的敏感性。膽紅素濃度越大，色素越深，則儀器的光電部分的敏感性就越低。也正因如此，許多生化項目的測定會在光度的非反應性變化的干擾下而失準[1，2]。由此可見，隨著濃度的增大，其干擾果糖胺測定的程度也越大。

綜上所述：醫院若有測定果糖胺需要，需綜合考慮干擾因素，特別是針對伴有黃疸等臨床表現，膽紅素水平較高者，應提高警惕，必要時轉人工化學法測量，以提高測量精度[5]。

參考文獻：

[1]Bonini P，Plebani M，Ceriotti F，el al.Errors in laboratory medicine[J].Clin Chem，2002，48（5）：691-698.

[2]顏思仁麥芒.黃疸對已糖激酶法測定血糖的影響[J].實用醫技雜志，2003，10（5）：436-437.

[3]Robert M，Cohen MD，Yancey R，et al.Discordance Between HbA1c and Fructosamine[J].Diabetes Care，2003，26（1）：163-167.

[4]鄭為平，姜慶波，史偉峰，等.血清果糖胺測定的臨床意義[J].中國醫療前沿，2010，5（19）：62-64.

[5]朱筠，許慧，熊祝嘉，等.四氮唑藍法檢測果糖胺的分析性能評價[J].現代醫學，2014，42（5）：522-524.

編輯/王海靜